【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于植物基因工程，具体涉及一种甘蓝型油菜淹水胁迫诱导型启动子及其应用。
技术介绍
1、油菜是世界上最重要的油料作物之一，在我国油菜主要分布于长江流域，在该地区主要为水稻油菜的轮作制度，油菜渍害发生十分普遍，占长江流域总面积10-20％以上。由于传统作物耐渍育种周期长，成效缓慢且受耐渍种质资源匮乏等因素的制约，使得耐渍育种进展缓慢。当前迅速发展的生物技术育种，尤其是基因工程打破了物种间的限制，为高效耐渍育种提供了新的途径。
2、现有的植物基因工程通常采用camv35s等组成型启动子，在何时何地均能驱动下游基因的表达，这种方式不仅浪费植物自身能量，而且极有可能影响植物正常的生理代谢。长期进化过程中，植物进化出一类启动子，这一类启动子在正常生长条件下不驱动下游基因的转录或者转录水平很低，而一定范围内为了适应光、温、水等环境的变化可以大幅度地提高下游基因的表达。这类启动子叫作诱导型启动子，借助这一类诱导型启动子与抗逆基因融合，从而使转基因植物更好地适应逆境，在基础研究和生产实践中均具有重要的应用价值。
3、本专利技术通过研究甘蓝型油菜淹水诱导表达基因，获得了一个淹水诱导型启动子，该启动子能够用于耐淹水抗逆作物的培育，也可以用于淹水诱导表达基因调控机制研究。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一个淹水胁迫诱导型启动子，该启动子来源于甘蓝型油菜(brassica napus)，其位于基因bnrap2.3.2的上游。
2、为了实现上述目的，本
3、利用甘蓝型油菜淹水诱导表达基因bnrap2.3.2的基因组序列在油菜数据库中进行blast分析获得与bnrap2.3.2序列一致的甘蓝型油菜bac序列。根据bac序列设计引物，扩增bnrap2.3.2的上游序列。然后将该序列与报告基因gus融合，构建重组表达载体pbnrap2.3.2:gus，通过农杆菌介导转化油菜经过抗生素筛选、pcr鉴定获得转基因植株。淹水胁迫后进行gus染色分析，结果表明，在淹水胁迫下bnrap2.3.2启动子驱动gus在子叶、茎、根上调表达。同时，对野生型油菜植株淹水胁迫下基因bnrap2.3.2的表达进行分析，表明根、茎、子叶中bnrap2.3.2表达均显著受渍水胁迫诱导表达。以上结果说明，bnrap2.3.2启动子是一个受淹水胁迫诱导的启动子。
4、本专利技术一方面保护甘蓝型油菜淹水胁迫诱导型启动子，其核苷酸序列如seq idno.1所示。
5、本专利技术另一方面保护含有所述启动子的重组载体或转基因细胞系或重组菌。
6、本专利技术另一方面保护所述启动子在启动外源基因表达中的应用，具体地是启动外源基因在淹水胁迫下表达。
7、本专利技术还保护所述启动子在调控甘蓝型油菜淹水胁迫或培育耐淹水甘蓝型油菜中的应用。
8、本专利技术的有益效果在于：克隆了甘蓝型油菜基因bnrap2.3.2启动子序列，通过生物信息学软件预测了序列所包含的启动子元件，并通过构建植物表达载体对其启动子活性进行了定性检测，结果表明该启动子在胚根、茎、子叶中在淹水胁迫下诱导外源基因(gus基因)表达，可以作为淹水胁迫诱导型启动子应用于植物基因工程研究及应用中。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.甘蓝型油菜淹水胁迫诱导型启动子，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.含有权利要求1所述启动子的重组载体。
3.含有权利要求1所述启动子的转基因细胞系或重组菌。
4.权利要求1所述启动子在启动外源基因表达中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述启动受淹水胁迫诱导。
6.权利要求1所述启动子在调控甘蓝型油菜淹水胁迫中的应用。
7.权利要求1所述启动子在耐淹水甘蓝型油菜育种中的应用。
【技术特征摘要】
1.甘蓝型油菜淹水胁迫诱导型启动子，其特征在于，其核苷酸序列如seq id no.1所示。
2.含有权利要求1所述启动子的重组载体。
3.含有权利要求1所述启动子的转基因细胞系或重组菌。
4.权利要求1所述启动子在...
【专利技术属性】
技术研发人员：邹锡玲，谭贤，苏威，吕艳，罗丹，曾柳，丁晓雨，程勇，
申请(专利权)人：中国农业科学院油料作物研究所，
类型：发明
国别省市：
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