一种IgG4荧光免疫层析测定试剂盒及测定方法技术

本发明专利技术涉及一种IgG4荧光免疫层析测定试剂盒和测定方法。试剂盒由荧光微球标记的IgG4单克隆抗体溶液和免疫层析试纸条组成，抗体溶液包含特殊浓度的荧光微球，荧光微球分别是时间分辨荧光微球和量子点荧光微球。免疫层析试纸条包括底板、样本垫、硝酸纤维素膜和吸水垫；硝酸纤维素膜上依次设置检测T线和质控C线；T线上包被IgG4，C线上包被羊抗鼠IgG。本发明专利技术提供的测定方法，测定线性范围0.031～8g/L,线性相关系数为0.9987；灵敏度为0.0169g/L；精密度平均为CV

【技术实现步骤摘要】
一种IgG4荧光免疫层析测定试剂盒及测定方法
本专利技术属于医药领域，涉及一种IgG4荧光免疫层析测定试剂盒及测定方法。
技术介绍
IgG4是免疫球蛋白G的一个亚型。研究发现，IgG4与许多疾病相关，因此被学者统称为IgG4相关性疾病。该病是近年来新认识的一种原因不明的慢性、进行性自身免疫性疾病，且并不少见，极易误诊。该病表现为各种组织和脏器的肿胀、炎症和纤维化等，B超、CT或MRI检查后常被诊断为肿瘤，但病理活检却找不到肿瘤细胞，造成误开刀，难治疗。尽管该病的临床表现差异很大，损害部位也不同，但有一个共同特点，就是血液中IgG4升高。鉴于病理活检的依从性较差，血液中IgG4的定量测定对IgG4相关性疾病的诊断和疗效观察就显得至关重要。血液中IgG4的测定方法有酶免法、西门子特定蛋白仪速率散射免疫比浊法及免疫层析胶体金法。酶免法虽价廉，但做定量测定结果不稳定，已逐渐被大医院检验科淘汰；西门子特定蛋白仪属大型仪器设备，测定结果准确稳定，但价格高，不适合基层医院使用，又由于体型大，不便于大医院门、急诊检验科使用。专利申请号为CN103837686A的中国专利技术专利，公开一种检测人免疫球本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种IgG4荧光免疫层析测定试剂盒，其特征在于：包括免疫层析试纸条和荧光微球标记的IgG4单克隆抗体溶液，其中IgG4单克隆抗体溶液中包含荧光微球标记的IgG4单克隆抗体。

【技术特征摘要】
1.一种IgG4荧光免疫层析测定试剂盒，其特征在于：包括免疫层析试纸条和荧光微球标记的IgG4单克隆抗体溶液，其中IgG4单克隆抗体溶液中包含荧光微球标记的IgG4单克隆抗体。2.根据权利要求1所述的IgG4荧光免疫层析测定试剂盒，其特征在于：所述试纸条包括底板、样本垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，硝酸纤维素膜设置在硝酸纤维素膜和吸水垫之间，硝酸纤维素膜上依次设置检测T线和质控C线。3.根据权利要求2所述的IgG4荧光免疫层析测定试剂盒，其特征在于：所述T线上包被IgG4，C线上包被羊抗鼠IgG，T线上包被的IgG4和血液样本中的IgG4能够和荧光微球标记的IgG4单克隆抗体产生特异性竞争结合反应，羊抗鼠IgG与荧光微球标记的IgG4单克隆抗体能够产生抗原抗体特异性结合反应。4.根据权利要求1所述的IgG4荧光免疫层析测定试剂盒，其特征在于：所述荧光微球分别是时间分辨荧光微球或量子点荧光微球中的至少一种。5.根据权利要求1所述的IgG4荧光免疫层析测定试剂盒，其特征在于：所述IgG4单克隆抗体的制备方法包括以下步骤：(1)以人IgG4为靶抗原，分析并选择人IgG4的铰链区为抗原表位，合成IgG4多肽并偶联BSA蛋白，作为免疫原；(2)将步骤(1)得到的免疫原免疫小鼠，取其脾脏细胞与sp2/0骨髓瘤细胞融合，使用多肽多轮筛选最终得到分泌IgG4单克隆抗体的杂交瘤细胞株；(3)将杂交瘤细胞株分别制备Balb/c小鼠腹水，使用...

【专利技术属性】
技术研发人员：张乐之，余铭恩，胡祥叶，王立童，李丹，吴滨，
申请(专利权)人：杭州康知生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33