拮抗剂CCR7受体的人源化抗体制造技术

本发明专利技术提供了人源化抗人CCR7抗体和包含这种抗体的组合物。所述抗体和组合物可用于治疗其中肿瘤细胞表达CCR7受体的癌症，治疗炎症性病症、由组织或器官移植引起的病症或并发症和由纤维化引起或与纤维化相关的病症或并发症。详细描述了衍生自小鼠抗体的若干抗体的实验结果。具有内部名称mab729的小鼠抗体[具有CDR VH1：GLTFRDFA；VH2：ISSGGFYT；VH3：VRRAYRYDGTGDYSALDY；VL1：QDIGPS；VL2：ATS；VL3：LQFASSPLT]被进一步人源化(内部名称mAB650_H1L1)。如实验结果所示，所述抗体抑制CCR7受体内化。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】拮抗剂CCR7受体的人源化抗体专利
本专利技术一般涉及医药领域，特别涉及用于肿瘤学的生物药物领域。更具体地说，本专利技术涉及可用于治疗其中肿瘤细胞表达CCR7受体的癌症的抗CCR7受体抗体。专利技术背景人CC基序受体7(以下称为“CCR7”)是七次跨膜结构域G蛋白偶联受体(GPCR)，最初被发现通过EBV感染而以淋巴细胞选择性方式表达(Birkenbach等，1993，J.Virol.67：2209-2220)。后来发现CCR7是CCL19和CCL21的选择性趋化因子受体。在生理条件下，CCR7的表达局限于未成熟的T和B淋巴细胞和成熟的树突状细胞，并在调控其迁移、组织和活化中发挥作用。CCR7活性涉及多种疾病状态，包括慢性炎症性病症(Moschovakis等，2012，EurJImmunol.42：1949-55)，动脉粥样硬化(Luchtefeld等，2010，Circulation122：1621-28)，HIV感染(Evans等，2012，CytokineGrowthFactorRev.23：151-57)和癌症(Ben-Baruch，2009，CellAdhesionMi本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.包含高变区HVR‑H1、HVR‑H2、HVR‑H3、HVR‑L1、HVR‑L2和HVR‑L3的人源化抗CCR7抗体，其中：HVR‑H1包含SEQ ID NO:6；HVR‑H2H1包含SEQ ID NO:13；HVR‑H3H1包含SEQ ID NO:19；HVR‑L1H1包含SEQ ID NO:27；HVR‑L2H1包含SEQ ID NO:31；和HVR‑L3H1包含SEQ ID NO:36，并且其中抗体具有以下至少一种：a)对具有SEQ ID NO:76的氨基酸序列的合成抗原的最小亲和力，所述最小亲和力定义为比小鼠抗CCR7抗体的Kd高不超过10倍的Kd，所述小鼠抗CCR7抗体的重链可变结...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.08.10 EP 15180415.01.包含高变区HVR-H1、HVR-H2、HVR-H3、HVR-L1、HVR-L2和HVR-L3的人源化抗CCR7抗体，其中：HVR-H1包含SEQIDNO:6；HVR-H2H1包含SEQIDNO:13；HVR-H3H1包含SEQIDNO:19；HVR-L1H1包含SEQIDNO:27；HVR-L2H1包含SEQIDNO:31；和HVR-L3H1包含SEQIDNO:36，并且其中抗体具有以下至少一种：a)对具有SEQIDNO:76的氨基酸序列的合成抗原的最小亲和力，所述最小亲和力定义为比小鼠抗CCR7抗体的Kd高不超过10倍的Kd，所述小鼠抗CCR7抗体的重链可变结构域的氨基酸序列是SEQIDNO:1，并且所述小鼠抗CCR7抗体的轻链可变结构域的氨基酸序列是SEQIDNO:2；和，b)不超过100nM的抑制CCR7依赖性细胞内信号传导和CCR7受体内化中的至少一种的IC50，所述CCR7依赖性细胞内信号传导和CCR7受体内化中的至少一种通过选自CCL19和CCL21的至少一种CCR7配体。2.根据权利要求1所述的人源化抗CCR7抗体，其中所述抗体的重链可变结构域包含4个重链框架区HFR1至HFR4，和3个高变区HVR-H1至HVR-H3，所述4个重链框架区和所述3个高变区以HFR1、HVR-H1、HFR2、HVR-H2、HFR3、HVR-H3和HFR4的顺序可操作地连接，其中所述抗体的轻链可变结构域包含4个轻链框架区LFR1至LFR4，和3个高变区HVR-L1至HVR-L3，所述4个轻链框架区和所述3个高变区以LFR1、HVR-L1、LFR2、HVR-L2、LFR3、HVR-L3和LFR4的顺序可操作地连接，其中重链框架区HFR1至HFR4具有氨基酸序列：i)分别为SEQIDNO:40、43、45和48；ii)分别为SEQIDNO:41、44、46和49；或，iii)分别为SEQIDNO:42、44、47和49，并且其中轻链框架区LFR1至LFR4具有氨基酸序列：iv)分别为SEQIDNO:50、52、55和58；或，v)分别为SEQIDNO:51、53、56和59。3.根据权利要求1或2所述的人源化抗CCR7抗体，其中所述抗体的重链可变结构域包含与SEQIDNO:61、62和63中的至少一个具有至少95％序列相同性的氨基酸序列，并且其中所述抗体的轻链可变结构域包含与SEQIDNO:64和65中的至少一个具有至少95％序列相同性的氨基酸序列，其中优选地所述抗体的重链可变结构域包含氨基酸SEQIDNO:61的序列并且优选地所述抗体的轻链可变结构域包含SEQIDNO:64的氨基酸序列。4.根据权利要求3所述的人源化抗CCR7抗体，其中所述抗体的重链可变结构域...

【专利技术属性】
技术研发人员：J·W·巴克，R·伯斯胡伊岑，W·C·皮伊克，J·图尔克斯特拉，
申请(专利权)人：佩普麦博有限公司，
类型：发明
国别省市：荷兰,NL