一种人脐带间充质干细胞的细胞冻存液制造技术

本发明专利技术公开了一种人脐带间充质干细胞的细胞冻存液，其中成分的百分比为：无血清培养液：41.8‑51.8％、血清代替物：40‑50％、二甲基亚砜：8％、200ug/ml的硫酸链霉素：0.1％和添加剂：0.1％，本发明专利技术还提供了一种利用所述人人脐带间充质干细胞的细胞冻存液的冻存方法，该方法包括：将传代培养的悬浮细胞离心后置于离心管中，将冻存液至含有细胞的离心管中，移至冻存管，将需冻存的冻存管置于装有异丙醇的程序降温盒中，‑80℃过夜，次日移入液氮罐。本发明专利技术能够解决常规冻存液中胎牛血清带来的动物源性成分和病原体污染问题，添加的硫酸链霉素，可减少抗生素含量，减小抗生素对人人脐带间充质干细胞的毒害，减少细胞死亡并维持干细胞特性。

【技术实现步骤摘要】
一种人脐带间充质干细胞的细胞冻存液
本专利技术涉及细胞培养技术，特别涉及一种人脐带间充质干细胞的细胞冻存液。
技术介绍
人脐带间充质干细胞是指从脐带中分离的一种多能干细胞，与其他来源的间充质干细胞比较有明显的临床应用优势，如取材容易、易收集、冷冻保存及相对纯净等，具有较高的分化潜能，可向多个方向进行分化，如成骨细胞、软骨细胞、类肝细胞、类胰岛素细胞、神经细胞和心肌细胞等，且无伦理方面的问题。目前，人脐带间充质干细胞已经在临床领域得到应用并取得令人鼓舞的治疗效果。人脐带间充质干细胞的种子库在临床上已经广泛应用，但也存在受冻存条件限制而不能大规模应用的问题，干细胞的冻存过程中无外源性污染是人脐带间充质干细胞在临床治疗应用中安全可靠的关键，一方面由于常规冻存液中的胎牛血清含有各种不明确的细胞生长因子，会对细胞的分化形成干扰，另一方面采用动物血清培养的干细胞进行临床应用，可能引起病原体的交叉感染，因此需要开发成分明确的人脐带间充质干细胞无血清冻存液。人脐带间充质干细胞种子库细胞的长期活性与冻存坏境有密切关系，冻存液的微环境对人人脐带间充质干细胞有着重要影响，现有的冻存液含有大量抗生素，对细胞本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种人脐带间充质干细胞的细胞冻存液，其特征在于，由无血清培养液、血清代替物、二甲基亚砜、硫酸链霉素和添加剂组成，其中成分的百分比为：无血清培养液：41.8‑51.8％、血清代替物：40‑50％、二甲基亚砜：8％、200ug/ml的硫酸链霉素：0.1％、添加剂：0.1％。

【技术特征摘要】
1.一种人脐带间充质干细胞的细胞冻存液，其特征在于，由无血清培养液、血清代替物、二甲基亚砜、硫酸链霉素和添加剂组成，其中成分的百分比为：无血清培养液：41.8-51.8％、血清代替物：40-50％、二甲基亚砜：8％、200ug/ml的硫酸链霉素：0.1％、添加剂：0.1％。2.根据权利要求1所述的一种人脐带间充质干细胞的细胞冻存液，其特征在于，由无血清培养液、血清代替物、二甲基亚砜、硫酸链霉素和添加剂组成，其中成分的百分比为：无血清培养液：41.8％、血清代替物：50％、二甲基亚砜：8％、200ug/ml的硫酸链霉素：0.1％、添加剂：0.1％。3.根据权利要求1所述的一种人脐带间充质干细胞的细胞冻存液，其特征在于，由无血清培养液、血清代替物、二甲基亚砜、硫酸链霉素和添加剂组成，其中成分的百分比为：无血清培养液：46.8％、血清代替物：45％、二甲基亚砜：8％、200ug/ml的硫酸链霉素：0.1％、添加剂：0.1％。4.根据权利要求1所述的一种人脐带间充质干细胞的细胞冻存液，其特征在于，由无血清培养液、血清代替物、二甲基亚砜、硫酸链霉素和添加剂组成，其中成分的百分比为：无血清培养液：51.8％、血清代替物：40％、二甲基亚砜：8％、200ug/ml的硫酸链霉素：0.1％、添加剂：0.1％。5.根据权利要求1所述的一种人脐带间充质干细胞的细胞冻存液，其特征在于，所述含有无血清培养基在基础培养液中添加有以下组分，各组分终浓度分别为：人血清白蛋白1～2g/L、转铁蛋白5～10mg/L、纤粘连蛋白2～8mg/L、层粘连蛋白1～4mg/L、Fe(NO3)3·9H2O50g/L、FeSO4·7H2O417g/L、雌二醇1～3μg/L、睾酮2～5μg/L、孕酮1～3μg/L、地塞米松39.25～117.74μg/L、胰岛素5～10mg/L、核黄素376.36mg/L、辅酶A80.96～242.87mg/L、丁二胺4.41～6.17mg/L、牛磺酸1～2mg/L、氨基乙醇0.61～1.85mg/L、丙酮酸8....

【专利技术属性】
技术研发人员：戚凤春，宫丽，张炳强，章宏，金铎，于淼，于露，
申请(专利权)人：吉林济惠生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：吉林,22