治疗癌症的组合物和方法技术

本发明专利技术提供了用于治疗癌症的组合物和方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】治疗癌症的组合物和方法相关申请本申请要求于2015年11月20日提交的美国临时申请号62/257,945的优先权和权益，其内容通过引用整体并入本文。专利
本专利技术整体上涉及细胞免疫学，更具体地涉及通过经由MUC-1抑制来抑制PD-L1而治疗癌症的方法。政府利益本专利技术是在国立卫生研究院授予的资助号CA100707和CA078378下的政府支持下完成的。政府对本专利技术享有一定的权利。专利技术背景在健康中，PD-L1/PD-1途径在抗原提呈和效应细胞之间的复杂相互作用中提供关键的负性共刺激信号，充当反调节影响以防止T细胞的过度活化和免疫介导的损伤。癌细胞显著上调PD-L1表达，导致肿瘤微环境中的免疫抑制氛围。PD-1与T细胞上的PD-L1连接后引发耗尽的表型，其特征在于丧失了T细胞活化和扩增，而且钝化了效应物介导的对肿瘤细胞的靶向杀伤。最近的临床研究表明，在对细胞毒化学疗法不再响应的晚期实体瘤和血液恶性肿瘤患者中，抗体阻断PD-1或PD-L1得到了显著且持久的疾病响应。尽管在癌症治疗中作为关键靶标出现，但对于PD-L1表达的致癌调节知之甚少。专利技术概述本专利技术的特征在于通过向患者施用含有足以减少肿瘤PD-L1表达的量的MUC1抑制剂的组合物来治疗患者中的肿瘤的方法。任选地，向患者进一步施用检查点抑制剂。在各个方面中，患者已经接受了自体树突细胞/肿瘤细胞融合体(DC/肿瘤融合体)的群体。MUC1抑制剂是例如GO-203。肿瘤是实体瘤或血液肿瘤。例如，实体瘤是肺肿瘤、乳腺肿瘤或肾肿瘤。血液肿瘤例如是急性骨髓性白血病(AML)或多发性骨髓瘤(MM)。示例性的检查点抑制剂包括A2AR、B7-H3/CD276、B7-H4/VTCN1、BTLA、CD27、CD28、CD40、CD122、CD137、CTLA-4、GITR、ICOS、IDO、KIR、LAG3、OX40、PD1、PD-L1、PD-L2、TIM-3或VISTA抑制剂。优选地，检查点抑制剂是A2AR、B7-H3/CD276、B7-H4/VTCN1、BTLA、CD27、CD28、CD40、CD122、CD137、CTLA-4、GITR、ICOS、IDO、KIR、LAG3、OX40、PD1、PD-L1、PD-L2、TIM-3或VISTA抗体。在各个方面中，该方法还包括向患者施用靶向作用于调节性T细胞的试剂、免疫调节剂或两者。免疫调节剂是来那度胺、泊马度胺(pomalinomide)或阿普斯特。在其他方面中，向患者施用TLR激动剂、CPGODN、polyIC或破伤风类毒素。除非另外定义，否则本文使用的所有技术和科学术语具有与本专利技术所属领域的普通技术人员通常理解的相同的含义。尽管与本文所述相似或等同的方法和材料可用于实施本专利技术，但下文描述了合适的方法和材料。本文提及的所有出版物、专利申请、专利和其他参考文献整体通过引用明确地并入。如果发生冲突，则将以本说明书(包括定义)为准。另外，本文描述的材料、方法和实施例仅仅是说明性的，并不意在进行限制。本专利技术的其他特征和优点在以下的详细描述和权利要求书中会是明显的并且被涵盖。附图说明图1.MUC1-C通过控制miR-200cmicro-RNA来调节PDL-1表达.a.通过qRT-PCR，对稳定表达对照shRNA(CshRNA)或MUC1shRNA(MUC1shRNA)的RPMI-8226多发性骨髓瘤(MM)癌细胞分析MUC1和PDL-1的mRNA水平。结果(3次测定的平均值±SD)表示为与表达MUC1shRNA的细胞相比的相对mRNA水平。用所示抗体对来自RPMI/CshRNA和RPMI/MUC1shRNA细胞的裂解物进行免疫印迹。b.分析稳定表达CshRNA或MUC1shRNA的U266多发性骨髓瘤细胞的(i)MUC1和PDL-1mRNA以及(ii)蛋白质。c.通过qRT-PCR，对稳定表达对照shRNA(CshRNA)或MUC1shRNA(MUC1shRNA)的RPMI-多发性骨髓瘤(MM)癌细胞分析miR200-cmicro-RNA水平，和通过FACS分析PDL-1蛋白水平(左)和采用所示抗体进行免疫印迹(右)。结果(3次测定的平均值±SD)表示为与表达MUC1shRNA的细胞相比的相对mRNA水平。d.分析稳定表达CshRNA或MUC1shRNA的U266多发性骨髓瘤癌细胞的(i)miR-200cmircro-RNA和(ii)通过FACS分析PDL-1蛋白和(iii)采用所示抗体进行免疫印迹。图2.miR-200c的异位表达下调PDL-1表达.a.指示miR-200c结合位点的PDL-13'UTR的示意图。用空3'UTR-海肾载体或PDL-13'UTR-海肾载体转染所示的RPMI(左)和U266(右)细胞。转染48小时后检测海肾萤光素酶活性。结果(3次测定的平均值±SD)表示为与表达对照-shRNA的细胞(赋值为1)相比的相对荧光素酶活性。b.所示的RPMI(左)和U266(右)细胞用所示抗体进行免疫印迹。图3MUC1-C通过控制miR-200cmicro-RNA来调节PDL-1的表达.图4.SNAI-1(Snail)以MUC1依赖性方式占据miR-200c启动子.a.将来自稳定表达对照shRNA(CshRNA)或MUC1shRNA(MUC1shRNA)的RPMI细胞的可溶性染色质用抗SNAI-1(左)或对照IgG进行沉淀。b.将来自稳定表达对照shRNA(CshRNA)或MUC1shRNA(MUC1shRNA)的U266细胞的可溶性染色质用抗SNAI-1snail(右)或对照IgG进行沉淀。用与miR-200c启动子中snail结合位点配对的引物，通过qPCR扩增最终的DNA样品。结果(3次测定的平均值±SD)表示为与MUC1shRNA(赋值为1)相比的相对富集倍数。c.与采用IgG对照的Co-IP相比，在(i)RPMI或(ii)U266细胞中采用Snail抗体进行的Co-IP和采用MUC1-C进行的免疫印迹。图5.MUC1-C沉默增加了细胞对非自体T细胞的敏感性.图6.是PD1表达/抑制机制的示意图。图7:对稳定表达对照shRNA(CshRNA)或MUC1shRNA(MUC1shRNA)的细胞分析MUC1和PDL-1mRNA。用指定的抗体对指定的A549(左)和H460(右)细胞进行免疫印迹。图8:用指定的抗体对指定的A549(左)和H460(右)细胞进行免疫印迹。图9:对稳定表达对照shRNA(CshRNA)或MUC1shRNA(MUC1shRNA)的细胞分析MUC1和PDL-1mRNA。用指定的抗体对指定的A549(左)和H460(右)细胞进行免疫印迹。图10:对稳定表达对照shRNA(CshRNA)或MUC1shRNA(MUC1shRNA)的细胞分析MUC1和PDL-1mRNA。用指定的抗体对指定的A549(左)和H460(右)细胞进行免疫印迹。图11:是柱状图。结果表示为与MUC1shRNA(赋值为1)相比的相对富集倍数。图12:对稳定表达对照shRNA(CshRNA)或MUC1shRNA(MUC1shRNA)的细胞分析了PDL-1表达。结果表示为与MUC1shRNA(赋值为1)相比的相对萤光素酶活性。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种治疗患者中的肿瘤的方法，其包括向所述患者施用包含MUC1抑制剂的组合物，所述MUC1抑制剂的量足以降低肿瘤PD‑L1表达。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.11.20 US 62/257,9451.一种治疗患者中的肿瘤的方法，其包括向所述患者施用包含MUC1抑制剂的组合物，所述MUC1抑制剂的量足以降低肿瘤PD-L1表达。2.权利要求1所述的方法，还包括施用检查点抑制剂。3.权利要求1或2所述的方法，其中所述患者已接受自体树突细胞/肿瘤细胞融合体(DC/肿瘤融合体)的群体。4.前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述MUC1抑制剂是GO-203。5.前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述肿瘤是实体瘤或血液肿瘤。6.权利要求5所述的方法，其中所述实体瘤是肺肿瘤、乳腺肿瘤或肾肿瘤。7.权利要求5所述的方法，其中所述血液肿瘤是急性骨髓性白血病(AML)或多发性骨髓瘤(MM)。8.权利要求1所述的方法，其中所述检查点抑制剂是A2AR、B7-H3/CD276、B7-H4/VTCN1、BTLA、CD27、CD28、CD40、CD1...

【专利技术属性】
技术研发人员：D·艾薇根，J·罗森布拉特，D·库非，
申请(专利权)人：丹娜法伯癌症研究院，贝斯以色列迪肯尼斯医学中心，
类型：发明
国别省市：美国,US