通过结构稳定化肽选择性靶向泛素及泛素样E1活化酶制造技术

本公开的特征为用于靶向泛素活化酶(E1)的结构稳定化肽和/或具有弹头的结构稳定化肽抑制剂。还公开了在治疗表达E1或依赖E1的癌症或疾病中使用所述结构稳定化肽和具有弹头的结构稳定化肽的方法。还提供了用于治疗表达E1或依赖E1的疾病的包括所述结构稳定化肽和/或具有弹头的结构稳定化肽的组合疗法。具有弹头的结构稳定化肽的组合疗法。具有弹头的结构稳定化肽的组合疗法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】通过结构稳定化肽选择性靶向泛素及泛素样E1活化酶
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2019年4月18日提交的第62/835,721号美国临时申请的优先权，所述美国临时申请的内容以全文引用的方式并入本文中。
[0003]关于联邦资助研究的声明
[0004]本专利技术是在美国国立卫生研究院(National Institutes of Health)授予的授权号R35 CA197583和F30 CA221087下在政府支持下进行的。政府拥有本专利技术的某些权利。
[0005]序列表引用
[0006]本申请含有序列表，所述序列表已经以ASCII格式以电子方式提交并且以全文引用的方式并入本文中。所述ASCII副本创建于2020年4月17日，被命名为00530
‑
0348WO1_SL.txt并且大小为720,896字节。


[0007]本公开涉及靶向泛素和泛素样E1活化酶的结构稳定化肽和使用所述肽治疗癌症和其它病理性细胞存活的疾病的方法。

技术介绍

[0008]泛素
‑
蛋白酶体系统(UPS)为负责细胞内蛋白质降解的高度调节酶网络。泛素活化酶(E1)催化泛素缀合酶(E2)的泛素(Ub)装载。E1通过首先催化Ub C端的腺苷酰化并且随后在Ub C端与E1催化半胱氨酸之间形成高能硫酯键来使Ub活化。E1随后通过与E2结合并且将Ub从E1催化半胱氨酸转移到E2催化半胱氨酸来对E2进行装载。E2又与泛素连接酶(E3)和底物蛋白质复合以将Ub C端羧基共价转移到底物蛋白质上。与目标蛋白质的单个和多个Ub键的不同架构表示调节蛋白质功能和靶向蛋白质以进行蛋白酶体降解的复杂编码。靶向UPS的许多药物在多发性骨髓瘤和套细胞淋巴瘤中已得到临床上成功，所述药物包括重引导E3活性的免疫调节酰亚胺药物(IMiD)和蛋白酶体抑制剂(例如，用于多发性骨髓瘤的硼替佐米(bortezomib))。
[0009]人类基因组含有超过600种泛素E3酶、大致40种泛素E2酶和仅两种泛素E1酶UBA1和UBA6。UBA6为仅一种泛素E2(USE1)的E1，而UBA1为所有其它泛素E2的E1且相应地活化>99％的细胞泛素(Jin等人，《自然(Nature)》,447:1135
‑
1138(2007))。因为整个UPS系统几乎完全依赖于UBA1，所以UBA1的抑制引起通常降解的底物的稳定化、内质网应激和细胞周期停滞(Hyer等人，《自然
·
医学(Nature Medicine)》,24(2):186
‑
193(2018))。已经开发临床级UBA1抑制剂TAK243/MLN7243，并且其展示在实体肿瘤和多发性骨髓瘤的临床前小鼠模型中高度有效(Hyer等人，《自然
·
医学》，24(2):186
‑
193(2018))，并且最近已完成晚期实体肿瘤的1期临床试验(NCT02045095)。然而，极新近的研究识别了针对药物作用机制的基于点突变的抗性机制(Barghout等人，《白血病(Leukemia)》,2018年6月8日.doi：10.1038/s41375
‑
018
‑
0167
‑
0)，强调针对E1酶的靶向抑制的潜在替代模式的需要和新颖性。
[0010]平行于泛素系统，许多其它泛素样蛋白质(UBL)与底物蛋白质共价连接以传导多
种目标的信号。这些UBL具有其自身的活化和缀合酶。展现与泛素缀合系统的最高同源性的UBL包括NEDD8和SUMO(Hochstrasser,《自然》,458:422
‑
429(2009))。NEDD8和SUMO的E1分别为异二聚复合体UBA3
‑
NAE1和UBA2
‑
SAE1。已开发具有类似于MLN7243的机制的UBA3
‑
NAE1抑制剂(MLN4924/培沃尼司他(pevonedistat))和UBA2
‑
SAE1抑制剂(ML
‑
792)(Soucy等人，《自然》,458(7239):732
‑
736(2009)；He等人，《自然
‑
化学生物学(Nat Chem Biol.)》,13(11):1164
‑
1171(2017))。NEDD8控制cullin
‑
RING泛素E3连接酶的活性，且相应地MLN4924通过抑制cullin
‑
RING介导的蛋白质周转而发挥其治疗效果。SUMO具有多种细胞作用，包括有丝分裂调节，并且实际上ML
‑
792造成有丝分裂破坏。两种分子都展现体外强效的抗癌活性，且MLN4924当前处于实体肿瘤和恶性血液病的多个2期和3期试验(NCT03268954、NCT02610777、NCT03228186、NCT03238248、NCT03330821、NCT03319537)中。
[0011]MLN7243、MLN4924和ML
‑
792为分别与UBA1、UBA3和UBA2上的ATP结合位点结合的腺苷氨磺酸酯。对ATP竞争性抑制剂的癌细胞抗性通常由目标酶ATP结合位点处或周围的突变产生(Krishnamurty和Maly,《ACS化学生物学(ACS Chem Biol.)》,5(1):121
‑
138(2010))；实际上，已充分证实癌细胞中的选择性压力通过正向选择表达UBA3的突变形式的克隆群体而产生随时间推移降低的MLN4924敏感性，所述突变形式包括UBA3
A171T
、UBA3
A171D
、UBA3
I310N
和UBA3
Y352H
(Milhollen等人，《癌细胞(Cancer Cell)》,21(3):388
‑
401(2012)；Toth等人，《细胞报告(Cell Rep.)》,1(4):309
‑
316(2012)；Xu等人，公共科学图书馆
·
综合(PLoS One),9(4):e93530(2014))。UBA1
A580T
、UBA1
A580S
和UBA1
Y583C
同样对MLN7243具有抗性(Misra等人，《结构(Structure)》,25(7):1120
‑
1129(2017),Barghout等人，《白血病》,2018年6月8日.doi：10.1038/s41375
‑
018
‑
0167
‑
0)且UBA2
S95N,M97T
对ML
‑
792具有抗性(He等人，《自然
‑
化学生物学》,13(11):本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种肽，其包含SEQ ID NO:132的序列中至少8个连续氨基酸的氨基酸序列且具有0到10个氨基酸取代，其中所述取代如果存在不位于SEQ ID NO:132的位置5和12处，并且其中所述肽抑制人E1介导的硫酯转移到人E2，并且任选地其中位置5为S
‑
戊烯基丙氨酸并且位置12为R
‑
辛烯基丙氨酸，或其中位置5为R
‑
辛烯基丙氨酸并且位置12为S
‑
戊烯基丙氨酸；或其盐。2.根据权利要求1所述的肽或其盐，其中所述肽具有1到10个氨基酸取代，并且其中所述取代不位于SEQ ID NO:132的位置7和/或9处。3.根据权利要求1所述的肽或其盐，其中所述肽具有1到10个氨基酸取代，并且其中所述取代不位于SEQ ID NO:132的位置7、9、10、13和16中的一处或多处。4.根据权利要求1所述的肽或其盐，其中所述肽具有1到10个氨基酸取代，并且其中所述取代位于SEQ ID NO:132的位置7、9、10、13和16中的一处或多处，并且其中所述取代在这些位置中的一处或多处是取代为丙氨酸。5.根据权利要求1所述的肽或其盐，其中所述肽具有1到10个氨基酸取代，并且其中所述取代位于SEQ ID NO:132的位置1、2、3、4、6、8、11、13、14、15、16或17中的一处或多处，并且任选地其中这些位置被取代为丙氨酸，并且如果位置6和/或8被取代，那么这些位置也可以被取代为谷氨酸。6.根据权利要求1所述的肽或其盐，其中所述肽具有1到10个氨基酸取代，并且其中所述取代包括SEQ ID NO:132的位置6或8中的一处或多处，并且任选地其中这些位置被取代为谷氨酸。7.根据权利要求1到6中任一项所述的肽或其盐，其进一步包含可与所述人E1内的半胱氨酸残基形成共价键的反应性基团，任选地其中所述反应性基团为具有亲电子基团的非天然氨基酸或N端处的亲电子化学帽。8.一种肽或其盐，所述肽包含从N端到C端具有以下残基的序列的至少8个连续氨基酸：Xaa1＝B、A，其中B为正亮氨酸，或不存在；Xaa2＝S、A或不存在；Xaa3＝T、A或不存在；Xaa4＝P、A或不存在；Xaa5＝装钉氨基酸Xaa6＝R、E或A；Xaa7＝R或A；Xaa8＝R、E或A；Xaa9＝L、A或可与所述人E1内的半胱氨酸残基形成共价键的反应性基团，任选地其中所述反应性基团为具有亲电子基团的非天然氨基酸或N端处的亲电子化学帽；Xaa10＝B或A，其中B为正亮氨酸；Xaa11＝R或A；Xaa12＝装钉氨基酸；Xaa13＝F、A、可与所述人E1内的半胱氨酸残基形成共价键的反应性基团，任选地其中所述反应性基团为具有亲电子基团的非天然氨基酸或N端处的亲电子化学帽，或不存在；Xaa14＝K、R、A或不存在；
Xaa15＝R、A或不存在Xaa16＝L、A或不存在；和Xaa17＝Q、A或不存在，其中所述肽抑制人E1人E2之间的相互作用，并且任选地其中所述肽抑制人E1介导的硫酯转移到人E2。9.根据权利要求8所述的肽或其盐，其中所述肽的长度为8到50、8到40、8到30、8到25、8到20或8到17个氨基酸。10.根据权利要求1到9中任一项所述的肽或其盐，其中所述肽内部交联。11.一种制造结构稳定化肽的方法，所述方法包括：(a)提供根据权利要求1到9中任一项所述的肽；和(b)使所述肽交联；任选地，其中所述交联是通过RCM反应。12.根据权利要求11所述的方法，其进一步包括将所述交联的肽配制为药物组合物。13.一种药物组合物，其包含根据权利要求1到10中任一项所述的肽或其盐和药学上可接受的载体。14.一种治疗有需要的人类受试者的表达E1或依赖E1的疾病的方法，所述方法包括向所述人类受试者施用治疗有效量的根据权利要求1到10中任一项所述的肽或其盐或根据权利要求13所述的药物组合物。15.根据权利要求14所述的方法，其中所述表达E1或依赖E1的疾病为癌症。16.根据权利要求14所述的方法，其中所述表达E1或依赖E1的疾病为恶性血液病、实体肿瘤、抗体介导的移植排斥、自身免疫性病症或炎症性病症。17.根据权利要求14到16中任一项所述的方法，其中所述人类受试者尚未对治疗所述表达E1或依赖E1的疾病的先前疗法起反应或已对其产生抗性。18.根据权利要求1到10中任一项所述的肽或其盐，其中所述盐为乙酸盐、硫酸盐或氯化物。19.一种肽，其包含：SEQ ID NO:1
‑
33中任一个的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，其中所述A1到A
11
氨基酸中的一个或多个被另一氨基酸取代；其中所述经修饰氨基酸序列包括至少一个肽结构稳定化修饰；并且其中所述肽结合且抑制泛素活化酶1(UBA1)。20.根据权利要求19所述的肽，其中所述肽结构稳定化修饰包括用非天然氨基酸取代SEQ ID NO:1
‑
33中任一个的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的至少两个氨基酸，其中所述非天然氨基酸包括一个或多个烯烃侧链。21.根据权利要求19所述的肽，其中所述肽结构稳定化修饰为烃装钉/缝合、内酰胺装钉/缝合；UV
‑
环加成装钉/缝合；肟装钉/缝合；硫醚装钉/缝合；双击装钉/缝合；双内酰胺装钉/缝合；双芳基化装钉/缝合；或其中任何两种或更多种的组合。22.根据权利要求19所述的肽，其中所述肽结构稳定化修饰为缝合。23.根据权利要求19所述的肽，其中所述肽结构稳定化修饰为装钉。24.根据权利要求23所述的肽，其中所述装钉位于所述氨基酸序列中的两个位置中的一处或多处，其中所述两个位置是i和i+3；i和i+4；i和i+6；或i和i+7。25.根据权利要求23所述的肽，其中所述装钉位于所述氨基酸序列中的两个位置中的
一处或多处，其中所述两个位置选自由A2和A9、A5和A9、A8和A
12
、A9和A
13
、A1和A8、A4和A
11
，和A5和A
12
组成的群组。26.根据权利要求23所述的肽，其中所述装钉位于两个位置处，其中所述两个位置是A2和A9。27.根据权利要求23到26中任一项所述的肽，其中所述装钉包括位于所述两个位置中的每一处的氨基酸取代，其中所述每一处的氨基酸取代为非天然氨基取代，其中所述非天然氨基酸包含一个或多个烯烃侧链。28.根据权利要求20或27所述的肽，其中包含烯烃侧链的所述非天然氨基酸选自由以下组成的群组：S
‑
戊烯基丙氨酸、R
‑
辛烯基丙氨酸；R
‑
丙烯基丙氨酸、S
‑
戊烯基丙氨酸；R
‑
戊烯基丙氨酸、S
‑
戊烯基丙氨酸；双戊烯基甘氨酸、S
‑
戊烯基丙氨酸、R
‑
辛烯基丙氨酸；和双戊烯基甘氨酸、S
‑
辛烯基丙氨酸和R
‑
辛烯基丙氨酸。29.根据权利要求19到28中任一项所述的肽，其中：(a)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:4的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:4的A1、A2、A3、A5、A8、A9和A
11
组成的群组的氨基酸位置处的零、一、二、三、四或五个氨基酸取代；(b)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:6的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:6的A1、A2、A3、A5、A8、A9和A
11
组成的群组的氨基酸位置处的零、一、二、三、四或五个氨基酸取代；(c)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:1的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:1的A1、A2、A3、A5、A8、A9和A
11
组成的群组的氨基酸位置处的零、一、二、三、四或五个氨基酸取代；(d)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:2的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:2的A1、A2、A3、A5、A8、A9和A
11
组成的群组的氨基酸位置处的零、一、二、三、四或五个氨基酸取代；(e)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:3的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:3的A1、A2、A3、A5、A8、A9和A
11
组成的群组的氨基酸位置处的零、一、二、三、四或五个氨基酸取代；(f)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:5的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:5的A1、A2、A3、A5、A8、A9和A
11
组成的群组的氨基酸位置处的零、一、二、三、四或五个氨基酸取代；(g)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:7的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:7的A1、A2、A3、A5、A8、A9和A
11
组成的群组的氨基酸位置处的零、一、二、三、四或五个氨基酸取代；(h)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:8的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:8的A1、A2、A3、A5、A8、A9和A
11
组成的群组的氨基酸位置处的零、一、二、三、四或五个氨基酸取代；(i)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:9的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:9的A1、A2、A3、A5、A8、A9和A
11
组成的群组的氨基酸位置处的零、一、二、三、四或五个氨基酸取代；
(j)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:10的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:10的A1、A2、A3、A5、A8、A9和A
11
组成的群组的氨基酸位置处的零、一、二、三、四或五个氨基酸取代；(k)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:11的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:11的A1、A2、A3、A5、A8、A9和A
11
组成的群组的氨基酸位置处的零、一、二、三、四或五个氨基酸取代；(l)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:12的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:12的A1、A2、A3、A5、A8、A9和A
11
组成的群组的氨基酸位置处的零、一、二、三、四或五个氨基酸取代；(m)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:13的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:13的A1、A2、A3、A5、A8、A9和A
11
组成的群组的氨基酸位置处的零、一、二、三、四或五个氨基酸取代；(n)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:14的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:14的A1、A2、A3、A5、A8、A9和A
11
组成的群组的氨基酸位置处的零、一、二、三、四或五个氨基酸取代；(o)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:15的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:15的A1、A2、A3、A5、A8、A9和A
11
组成的群组的氨基酸位置处的零、一、二、三、四或五个氨基酸取代；(p)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:16的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:16的A1、A2、A3、A5、A8、A9和A
11
组成的群组的氨基酸位置处的零、一、二、三、四或五个氨基酸取代；(q)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:17的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:17的A1、A2、A3、A5、A8、A9和A
11
组成的群组的氨基酸位置处的零、一、二、三、四或五个氨基酸取代；(r)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:18的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:18的A1、A2、A3、A5、A8、A9和A
11
组成的群组的氨基酸位置处的零、一、二、三、四或五个氨基酸取代；(s)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:19的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:19的A1、A2、A3、A5、A8、A9和A
11
组成的群组的氨基酸位置处的零、一、二、三、四或五个氨基酸取代；(t)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:20的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:20的A1、A2、A3、A5、A8、A9和A
11
组成的群组的氨基酸位置处的零、一、二、三、四或五个氨基酸取代；(u)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:21的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:21的A1、A2、A3、A5、A8、A9和A
11
组成的群组的氨基酸位置处的零、一、二、三、四或五个氨基酸取代；(v)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:22的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:22的A1、A2、A3、A5、A8、A9和A
11
组成的群组的氨基酸位置处的零、一、二、三、四或五个氨基酸取代；
(w)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:23的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:23的A1、A2、A3、A5、A8、A9和A
11
组成的群组的氨基酸位置处的零、一、二、三、四或五个氨基酸取代；(x)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:24的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:24的A1、A2、A3、A5、A8、A9和A
11
组成的群组的氨基酸位置处的零、一、二、三、四或五个氨基酸取代；(y)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:25的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:25的A1、A2、A3、A5、A8、A9和A
11
组成的群组的氨基酸位置处的零、一、二、三、四或五个氨基酸取代；(z)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:26的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:26的A1、A2、A3、A5、A8、A9和A
11
组成的群组的氨基酸位置处的零、一、二、三、四或五个氨基酸取代；(aa)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:27的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:27的A1、A2、A3、A5、A8、A9和A
11
组成的群组的氨基酸位置处的零、一、二、三、四或五个氨基酸取代；(bb)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:28的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:28的A1、A2、A3、A5、A8、A9和A
11
组成的群组的氨基酸位置处的零、一、二、三、四或五个氨基酸取代；(cc)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:29的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:29的A1、A2、A3、A5、A8、A9和A
11
组成的群组的氨基酸位置处的零、一、二、三、四或五个氨基酸取代；(dd)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:30的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:30的A1、A2、A3、A5、A8、A9和A
11
组成的群组的氨基酸位置处的零、一、二、三、四或五个氨基酸取代；(ee)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:31的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:31的A1、A2、A3、A5、A8、A9和A
11
组成的群组的氨基酸位置处的零、一、二、三、四或五个氨基酸取代；(ff)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:32的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:32的A1、A2、A3、A5、A8、A9和A
11
组成的群组的氨基酸位置处的零、一、二、三、四或五个氨基酸取代；或(gg)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:33的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:33的A1、A2、A3、A5、A8、A9和A
11
组成的群组的氨基酸位置处的零、一、二、三、四或五个氨基酸取代。30.根据权利要求19到29中任一项所述的肽，其中：(a)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:4的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:4的A4、A6、A7和A
10
组成的群组的氨基酸位置处的零、一或两个保守氨基酸取代；(b)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:6的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:6的A4、A6、A7和A
10
组成的群组的氨基酸位置处的零、一或两个保守氨基酸取代；(c)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:1的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:1的A4、A6、A7和A
10
组成的群组的氨基酸位置处的零、一或两个保守氨基酸取代；(d)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:2的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:2的A4、A6、A7和A
10
组成的群组的氨基酸位置处的零、一或两个保守氨基酸取代；(e)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:3的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:3的A4、A6、A7和A
10
组成的群组的氨基酸位置处的零、一或两个保守氨基酸取代；(f)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:5的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:5的A4、A6、A7和A
10
组成的群组的氨基酸位置处的零、一或两个保守氨基酸取代；(g)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:7的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:7的A4、A6、A7和A
10
组成的群组的氨基酸位置处的零、一或两个保守氨基酸取代；(h)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:8的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:8的A4、A6、A7和A
10
组成的群组的氨基酸位置处的零、一或两个保守氨基酸取代；(i)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:9的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:9的A4、A6、A7和A
10
组成的群组的氨基酸位置处的零、一或两个保守氨基酸取代；(j)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:10的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:10的A4、A6、A7和A
10
组成的群组的氨基酸位置处的零、一或两个保守氨基酸取代；(k)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:11的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:11的A4、A6、A7和A
10
组成的群组的氨基酸位置处的零、一或两个保守氨基酸取代；(l)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:12的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:12的A4、A6、A7和A
10
组成的群组的氨基酸位置处的零、一或两个保守氨基酸取代；(m)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:13的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:13的A4、A6、A7和A
10
组成的群组的氨基酸位置处的零、一或两个保守氨基酸取代；(n)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:14的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:14的A4、A6、A7和A
10
组成的群组的氨基酸位置处的零、一或两个保守氨基酸取代；(o)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:15的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:15的A4、A6、A7和
和A
10
组成的群组的氨基酸位置处的零、一或两个保守氨基酸取代；(cc)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:29的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:29的A4、A6、A7和A
10
组成的群组的氨基酸位置处的零、一或两个保守氨基酸取代；(dd)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:30的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:30的A4、A6、A7和A
10
组成的群组的氨基酸位置处的零、一或两个保守氨基酸取代；(ee)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:31的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:31的A4、A6、A7和A
10
组成的群组的氨基酸位置处的零、一或两个保守氨基酸取代；(ff)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:32的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:32的A4、A6、A7和A
10
组成的群组的氨基酸位置处的零、一或两个保守氨基酸取代；或(gg)所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:33的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列，并且其中所述经修饰氨基酸序列包括位于选自由SEQ ID NO:33的A4、A6、A7和A
10
组成的群组的氨基酸位置处的零、一或两个保守氨基酸取代。31.根据权利要求19到30中任一项所述的肽，其中所述被另一氨基酸取代的氨基酸A1‑
A
11
中的一个或多个位于SEQ ID NO:1
‑
33的氨基酸A1‑
A
11
的E1非相互作用面上。32.根据权利要求31所述的肽，其中SEQ ID NO:1
‑
33的所述非相互作用面包括氨基酸A1、A2、A5、A8、A9和A
12
。33.根据权利要求19到32中任一项所述的肽，其中SEQ ID NO:1
‑
33中任一个的氨基酸A1‑
A
11
的所述非相互作用面上的0到6个氨基酸被选自由以下组成的群组的氨基酸取代：丙氨酸、D
‑
丙氨酸、α
‑
氨基异丁酸、N
‑
甲基甘氨酸、丝氨酸、经取代的丙氨酸和甘氨酸衍生物。34.根据权利要求19到33中任一项所述的肽，其中氨基酸A4、A6、A7和A
10
中的一个或多个被α
‑
甲基化或α
‑
乙基化天然氨基酸取代。35.根据权利要求19到33中任一项所述的肽，其中氨基酸A4、A6、A7和A
10
中的一个或多个被选自由以下组成的群组的氨基酸取代：L
‑
丙氨酸、D
‑
丙氨酸、α
‑
氨基异丁酸、N
‑
甲基甘氨酸、丝氨酸、经取代的丙氨酸和甘氨酸衍生物。36.根据权利要求19到35中任一项所述的肽，其中氨基酸A1、A2、A3、A5、A8、A9和A
11
中的一个或多个被α
‑
甲基化或α
‑
乙基化天然氨基酸取代。37.根据权利要求19到35中任一项所述的肽，其中氨基酸A1、A2、A3、A5、A8、A9和A
11
中的一个或多个被选自由以下组成的群组的氨基酸取代：L
‑
丙氨酸、D
‑
丙氨酸、α
‑
氨基异丁酸、N
‑
甲基甘氨酸、丝氨酸、经取代的丙氨酸和甘氨酸衍生物。38.根据权利要求19到37中任一项所述的肽，其中所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:4的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列。39.根据权利要求19到37中任一项所述的肽，其中所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:6的氨基酸A1到A
11
中所示的序列的经修饰氨基酸序列。40.根据权利要求19到37中任一项所述的肽，其中所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:1
‑
33中任一个中所示的序列的经修饰氨基酸序列。
41.根据权利要求40所述的肽，其中SEQ ID NO:1
‑
33的一个或多个氨基酸被一个或多个选自由以下组成的群组的氨基酸取代：L
‑
丙氨酸、D
‑
丙氨酸、α
‑
氨基异丁酸、N
‑
甲基甘氨酸、丝氨酸、经取代的丙氨酸和甘氨酸衍生物。42.根据权利要求40或41所述的肽，其中将SEQ ID NO:1
‑
33中的0到5个氨基酸从C端去除，或去除并且用1到6个来自由以下组成的群组的氨基酸替换：丙氨酸、D
‑
丙氨酸、α
‑
氨基异丁酸、N
‑
甲基甘氨酸、丝氨酸、经取代的丙氨酸和甘氨酸衍生物。43.根据权利要求40到42中任一项所述的肽，其中被另一氨基酸取代的SEQ ID NO:1
‑
33的所述一个或多个氨基酸位于SEQ ID NO:1
‑
33的氨基酸的E1非相互作用面上。44.根据权利要求40到43中任一项所述的肽，其中所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:4中所示的序列的经修饰氨基酸序列。45.根据权利要求40到43中任一项所述的肽，其中所述经修饰氨基酸序列包含SEQ ID NO:6中所示的序列的经修饰氨基酸序列。46.根据权利要求19到45中任一项所述的肽，其中：(i)所述肽的总疏水性相对于SEQ ID NO:1
‑
33的肽降低；(ii)所述肽的总正电荷相对于SEQ ID NO:1
‑
33的肽降低；或(iii)(i)和(ii)的组合。47.根据权利要求19所述的肽，其包含SEQ ID NO:132中所示的序列。48.根据权利要求19所述的肽，其包含SEQ I...

【专利技术属性】
技术研发人员：L，
申请(专利权)人：丹娜法伯癌症研究院，
类型：发明
国别省市：