一种稳定的贝伐单抗制剂制造技术

本发明专利技术公开了一种稳定的贝伐单抗制剂，包括：a)治疗有效量的贝伐单抗；b)20～100mg/mL的海藻糖；c)4～8mg/mL的一水合磷酸二氢钠；d)2～5mg/mL的十二水磷酸氢二钠；e)0.2～0.6mg/mL的聚山梨醇酯80；其中，所述制剂的pH值为5～7。本发明专利技术提供的贝伐单抗制剂，能有效减低制剂中抗体的聚集物的生成速率，提高抗体的物理稳定性，降低潜在的安全性风险；另外，本发明专利技术提供的贝伐单抗制剂，具有制备工艺简单，成本低廉，无需特殊设备和苛刻条件，易于实现规模化生产等优点，具有极强的实用价值，相对于现有技术具有显著性进步。

A stable bevacizumab preparation

The present invention discloses a stable bevacizumab preparation, including: a) to treat the effective bevacizumab; b) 20 to 100mg/mL trehalose; c) 4 to 8mg/mL monohydrate phosphate dihydrogen phosphate; d) 2 to 5mg/mL, twelve water phosphate hydrogen phosphate two; E) 0.2 to 0.6mg/mL polysorbate 80; the pH value of the preparation is 5~7. The bevacizumab preparation provided by the invention can effectively reduce the formation rate of the aggregation of antibodies in the preparation, improve the physical stability of the antibody, and reduce the potential safety risk. In addition, the bevacizumab preparation provided by the invention has simple preparation process, low cost, no special equipment and harsh conditions, and easy to be used. Realizing the advantages of scale production and so on, it has strong practical value, and has significant progress compared with the existing technology.

【技术实现步骤摘要】
一种稳定的贝伐单抗制剂
本专利技术是涉及一种稳定的贝伐单抗制剂，属于医药制剂

技术介绍
近年来，国内外对于治疗性抗体的研究越来越深入，广泛应用于炎症疾病、免疫疾病、传染病以及癌症的治疗，并且进展迅速，涉及到发病机理，临床诊断，临床治疗，预后，遗传，并逐渐发展到对相关药物给药过程中产生的抗体即抗药抗体(ADA)的研究。血管内皮生长因子(VEGF)在肿瘤发生、发展过程中发挥重要作用。VEGF通过血管内皮细胞表面VEGFR2受体激活下游信号，可诱导内皮细胞的生长、迁移和管状形成，促进新生血管形成、提高血管通透性，满足肿瘤细胞对氧和营养的需求。贝伐单抗(Bevacizumab，商品名Avastin)是FDA批准上市的一种重组的人源化单克隆IgG1抗体，分子量为149kDa，由两条重链和两条轻链组成，能够结合VEGF-A全部亚型的作用，阻断VEGF与VEGFR2受体相互作用介导的信号通路，阻断肿瘤血管生成。经临床验证，Bevacizumab能够有效延长癌症患者的生存期，在临床肿瘤的治疗中具有重大意义，例如中国专利CN201180044879.4中提到贝伐单抗可以治疗胰腺癌，中国专利CN201180044840.2中提到贝伐单抗可以治疗乳腺癌。贝伐单抗本身是一个无色透明、浅乳白色或灰棕色、pH值6.2的无菌液体，目前市售的贝伐单抗制剂通常采用液体药物制剂形式。液体药物制剂是制造者制备稳定、安全且有效的治疗用抗体药物制备物的主要选择。液体药物制备物还被认为对于患者来说容易操作。然而，蛋白质治疗液体制剂长期存在的问题是聚集问题，其中蛋白质分子以物理方式粘在一起，例如，导致形成可溶性高分子量蛋白质聚集体，或不溶性蛋白质聚集体，这可在施用后在患者中引起不期望的免疫反应。此外，由聚集体形成导致的主要问题是在施用期间，该制剂可阻塞注射器或泵，使其对患者而言不安全。目前的贝伐单抗制剂也存在上述问题，因此，有必要研发出一种液体稳定的贝伐单抗制剂。
技术实现思路
针对现有技术存在的上述问题，本专利技术的目的是提供一种稳定的贝伐单抗制剂。为实现上述专利技术目的，本专利技术采用的技术方案如下：一种稳定的贝伐单抗制剂，包括：a)治疗有效量的贝伐单抗；b)20～100mg/mL的海藻糖；c)4～8mg/mL的一水合磷酸二氢钠；d)2～5mg/mL的十二水磷酸氢二钠；e)0.2～0.6mg/mL的聚山梨醇酯80；其中，所述制剂的pH值为5～7。作为优选方案，所述贝伐单抗的浓度为15～35mg/mL，进一步优选为20～30mg/mL。作为优选方案，所述海藻糖为α,α-海藻糖。作为优选方案，所述海藻糖的浓度优选为50～70mg/mL。作为优选方案，所述制剂的pH值为5.5～6.5。所述制剂的制备是首先将贝伐单抗、海藻糖、一水合磷酸二氢钠、十二水磷酸氢二钠、聚山梨醇酯80混合均匀，最后将混合后的混合物pH值调整至pH为5～7。本专利技术所述贝伐单抗来源于可来源以下文献：Presta.Etal.Canceres.1997.57:4593-4599，CN1191276C，通过本领域所公知的方法进行制备，也可以选用其它基因工程技术获得的贝伐单抗。与现有技术相比，本专利技术具有如下显著性有益效果：实验证明：本专利技术提供的贝伐单抗制剂，能有效减低制剂中抗体的聚集物的生成速率，提高抗体的物理稳定性，降低潜在的安全性风险；另外，本专利技术提供的贝伐单抗制剂，具有制备工艺简单，成本低廉，无需特殊设备和苛刻条件，易于实现规模化生产等优点，具有极强的实用价值，相对于现有技术具有显著性进步。具体实施方式下面结合实施例和对比例对本专利技术技术方案做进一步详细、完整地说明。实施例1配方：a)20mg/mL的贝伐单抗；b)50mg/mL的α,α-海藻糖；c)5.4mg/mL的一水合磷酸二氢钠；d)2.5mg/mL的十二水磷酸氢二钠；e)0.3mg/mL的聚山梨醇酯80；首先将贝伐单抗、海藻糖、一水合磷酸二氢钠、十二水磷酸氢二钠、聚山梨醇酯80混合均匀，最后采用ThermoOrion缓冲液将混合后的混合物pH值标准校准至pH为6.0，即得本专利技术所述贝伐单抗制剂。实施例2配方：a)25mg/mL的贝伐单抗；b)60mg/mL的α,α-海藻糖；c)5.8mg/mL的一水合磷酸二氢钠；d)3mg/mL的十二水磷酸氢二钠；e)0.4mg/mL的聚山梨醇酯80；首先将贝伐单抗、海藻糖、一水合磷酸二氢钠、十二水磷酸氢二钠、聚山梨醇酯80混合均匀，最后采用ThermoOrion缓冲液将混合后的混合物pH值标准校准至pH为6.2，即得本专利技术所述贝伐单抗制剂。实施例3配方：a)30mg/mL的贝伐单抗；b)70mg/mL的α,α-海藻糖；c)6.2mg/mL的一水合磷酸二氢钠；d)3.5mg/mL的十二水磷酸氢二钠；e)0.5mg/mL的聚山梨醇酯80；首先将贝伐单抗、海藻糖、一水合磷酸二氢钠、十二水磷酸氢二钠、聚山梨醇酯80混合均匀，最后采用ThermoOrion缓冲液将混合后的混合物pH值标准校准至pH为6.4，即得本专利技术所述贝伐单抗制剂。稳定性测试：将实施例中制得的贝伐单抗制剂，各取1mL每种配制剂在3cc玻璃管形瓶中保存于40℃并于1、2、和4周时评估稳定性，通过大小排阻层析(SEC)法来定量总聚集物水平(注射原液)和缓慢解离聚集物水平(注射稀释液)，从而对其稳定性进行评估，方法为：稀释液注射用流动相缓冲液(0.20M磷酸钾、0.25M氯化钾、pH6.2)稀释至0.5mg/mL；将所有样品于30℃温育24小时，之后分析；使用Agilent1100HPLC系统将10μL每种原液样品和100μL每种稀释液样品注射到TSKG3000SWXL，7.8X300mm柱(TOSOHAAS，partno.08541)上。将自动采样器保持于30℃，而将柱保持于环境温度；流速为0.5mL/min，且每个样品的总运行时间为30分钟；使用HPChemstation用280nm吸光度分析数据。详细实验结果见表1和表2所示。表1制剂于40℃保存后的总聚集物含量样品％总聚集物(0周)％总聚集物(1周)％总聚集物(2周)％总聚集物(4周)实施例11.01.31.52.0实施例21.21.62.43.6实施例31.41.92.84.2表2制剂于40℃保存后的二聚集含量样品％二聚集物(0周)％二聚集物(1周)％二聚集物(2周)％二聚集物(4周)实施例10.91.11.31.8实施例21.01.42.03.1实施例31.21.62.33.8由表1和表2实验结果可见：本专利技术提供的贝伐单抗制剂，具有较低的聚集物含量，保持了优异的稳定性。最后需要在此指出的是：以上仅是本专利技术的部分优选实施例，不能理解为对本专利技术保护范围的限制，本领域的技术人员根据本专利技术的上述内容做出的一些非本质的改进和调整均属于本专利技术的保护范围。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种稳定的贝伐单抗制剂，其特征在于：包括：a)治疗有效量的贝伐单抗；b)20～100mg/mL的海藻糖；c)4～8mg/mL的一水合磷酸二氢钠；d)2～5mg/mL的十二水磷酸氢二钠；e)0.2～0.6mg/mL的聚山梨醇酯80；其中，所述制剂的pH值为5～7。

【技术特征摘要】
1.一种稳定的贝伐单抗制剂，其特征在于：包括：a)治疗有效量的贝伐单抗；b)20～100mg/mL的海藻糖；c)4～8mg/mL的一水合磷酸二氢钠；d)2～5mg/mL的十二水磷酸氢二钠；e)0.2～0.6mg/mL的聚山梨醇酯80；其中，所述制剂的pH值为5～7。2.根据权利要求1所述的贝伐单抗制剂，其特征在于：所述贝伐单抗的浓度为15～35mg/mL。3.根据权利要求1所述的贝伐单抗制剂，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：萨日娜，陈少雄，
申请(专利权)人：上海创诺医药集团有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31