一种猪肉功能性多肽及其制备方法技术

本发明专利技术公开了猪肉功能性多肽的制备方法，包括猪肉的预处理，猪肉的酶解以及多肽的制备。本发明专利技术也公开了该方法所制备的猪肉功能性多肽。有益效果为：本发明专利技术制备方法快速简单，且底物中所含的抑制剂与酶的结合程度小，酶解反应速率快，大大缩短了酶解的时间，同时酶解反应充分，使猪肉资源得到了充分利用；所制备的多肽能够清除自由基、抑制脂质过氧化和保护细胞免受氧化损伤。 1

A functional polypeptide of pork and its preparation method

The invention discloses a preparation method of pork functional polypeptide, which includes pretreatment of pork, enzymatic hydrolysis of pork and preparation of polypeptide. The invention also discloses a pork functional polypeptide prepared by the method. The beneficial effect is: the preparation method of the invention is fast and simple, and the binding degree of the inhibitor and enzyme contained in the substrate is small, the reaction rate of enzymatic hydrolysis is fast, the time of enzymatic hydrolysis is shortened, and the enzymatic hydrolysis reaction is sufficient, and the pork resources are fully utilized; the prepared peptides can scavenge free radicals and inhibit lipid peroxidation. And protect the cells from oxidative damage. One

【技术实现步骤摘要】
一种猪肉功能性多肽及其制备方法
本专利技术涉及到生物活性肽领域，尤其是涉及一种猪肉功能性多肽及其制备方法。
技术介绍
生物活性肽是氨基酸以不同排列方式和组合构成的包括二肽和复杂的环形、线形结构的不同肽类的总称。不同的生物肽具有不同的结构和生理功能，如抗病毒、抗癌、抗血栓、抗高血压、免疫调节、激素调节、抑菌、降胆固醇等作用。猪肉是日常生活的主要副食品，具有补虚强身，滋阴润燥、丰肌泽肤的作用。现阶段，对于猪肉多肽的研究较少。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供猪肉功能性多肽的制备方法，该多肽制备效率高，酶解时间少，且酶解充分，使猪肉资源得到了充分利用。本专利技术的另一目的在于提供一种猪肉功能性多肽，该多肽能够清除自由基、抑制脂质过氧化和保护细胞免受氧化损伤。本专利技术为实现上述目的所采取的技术方案为：猪肉功能性多肽的制备方法，该多肽的制备方法包括以下步骤：猪肉预处理：将新鲜宰杀猪肉在温度-25～-30℃下冷冻25～30h，该冷冻步骤能够延长猪肉的保质期，为酶解过程提供了高品质的原料；猪肉的酶解：取冷冻猪肉解冻，向解冻的猪肉中加入蒸馏水，料液比为1g:3～7mL，调pH为6.5～7.5，加入猪肉质量1.0%～1.5%的木瓜蛋白酶，在50～55℃酶解4～6h，加热到90℃灭酶活10min，调pH为9～10，加入猪肉质量0.8%～1.2%的碱性蛋白酶，在42～50℃酶解3～6h，加热到90℃灭酶活10min，冷却至常温，10000r/min离心15min，收集上清液，得猪肉酶解液，该条件下，底物中所含的抑制剂与酶的结合程度小，酶解反应速率快，大大缩短了酶解的时间，同时酶解反应充分，使猪肉资源得到了充分利用；多肽的制备：将猪肉酶解液经截留分子量为1kDa的超滤膜进行过滤，收集截留液，将截留液按照体积比加入到装有8～10倍D101大孔树脂的层析柱中，用3～5倍柱体积水洗脱除去杂质，然后用5～8倍柱体积的质量分数为60%～62%乙醇水溶液进行洗脱，乙醇洗脱液在50℃旋蒸除去乙醇、冷冻干燥得多肽。该过程操作简单，重复性好，且洗脱范围广，可根据实际情况进行放大条件实现工业化生产。与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：本专利技术通过猪肉的预处理、酶解等步骤制得猪肉功能性多肽，制备方法简单快速，且底物中所含的抑制剂与酶的结合程度小，酶解反应速率快，大大缩短了酶解的时间，同时酶解反应充分，使猪肉资源得到了充分利用；所制备的多肽能够清除自由基、抑制脂质过氧化和保护细胞免受氧化损伤。具体实施方式以下结合实施例作进一步详细描述：实施例1：猪肉功能性多肽的制备方法，包括以下步骤：1)猪肉预处理：将新鲜宰杀猪肉在温度-25℃下冷冻25h，该冷冻步骤能够延长猪肉的保质期，为酶解过程提供了高品质的原料；2)猪肉的酶解：取冷冻猪肉解冻，向解冻的猪肉中加入蒸馏水，料液比为1g:3mL，调pH为6.5，加入猪肉质量1.0%的木瓜蛋白酶，在50℃酶解4h，加热到90℃灭酶活10min，调pH为9，加入猪肉质量0.8%的碱性蛋白酶，在42℃酶解3h，加热到90℃灭酶活10min，冷却至常温，10000r/min离心15min，收集上清液，得猪肉酶解液，该条件下，底物中所含的抑制剂与酶的结合程度小，酶解反应速率快，大大缩短了酶解的时间，同时酶解反应充分，使猪肉资源得到了充分利用；3)多肽的制备：将猪肉酶解液经截留分子量为1kDa的超滤膜进行过滤，收集截留液，将截留液按照体积比加入到装有8倍D101大孔树脂的层析柱中，用3倍柱体积水洗脱除去杂质，然后用5倍柱体积的质量分数为60%乙醇水溶液进行洗脱，乙醇洗脱液在50℃旋蒸除去乙醇、冷冻干燥得多肽。该过程操作简单，重复性好，且洗脱范围广，可根据实际情况进行放大条件实现工业化生产。实施例2：猪肉功能性多肽的制备方法，包括以下步骤：首先是猪肉预处理：将新鲜宰杀猪肉在温度-30℃下冷冻30h；接着是猪肉的酶解：取冷冻猪肉解冻，向解冻的猪肉中加入蒸馏水，料液比为1g:7mL，调pH为7.5，加入猪肉质量1.5%的木瓜蛋白酶，在55℃酶解6h，加热到90℃灭酶活10min，调pH为10，加入猪肉质量1.2%的碱性蛋白酶，在50℃酶解6h，加热到90℃灭酶活10min，冷却至常温，10000r/min离心15min，收集上清液，得猪肉酶解液；最后是多肽的制备：将猪肉酶解液经截留分子量为1kDa的超滤膜进行过滤，收集截留液，将截留液按照体积比加入到装有10倍D101大孔树脂的层析柱中，用5倍柱体积水洗脱除去杂质，然后用8倍柱体积的质量分数为62%乙醇水溶液进行洗脱，乙醇洗脱液在50℃旋蒸除去乙醇、冷冻干燥得多肽。该过程操作简单，重复性好，且洗脱范围广，可根据实际情况进行放大条件实现工业化生产。实施例3：猪肉功能性多肽的制备方法，包括以下步骤：1)猪肉酶解：取冷冻猪肉解冻，向解冻的猪肉中加入蒸馏水，料液比为1g:7mL，调pH为7.5，加入猪肉质量1.5%的木瓜蛋白酶，再加入猪肉质量0.01％的3,5-二羟基苯乙酮和猪肉质量0.008％的乙烯亚胺，在55℃酶解2h，加热到90℃灭酶活10min，调pH为10，加入猪肉质量1.2%的碱性蛋白酶，在50℃酶解6h，加热到90℃灭酶活10min，冷却至常温，10000r/min离心15min，收集上清液，得猪肉酶解液；所加入的3,5-二羟基苯乙酮、乙烯亚胺与木瓜蛋白酶中的氨基酸残基His-159具有协同作用，极大地促进了Cys-25的去质子化，使Cys-25更易攻击肽主链上的羰基碳，显著地提供了酶解效率，缩短了猪肉功能性多肽的制备周期。2)多肽的制备：将猪肉酶解液经截留分子量为1kDa的超滤膜进行过滤，收集截留液，将截留液按照体积比加入到装有10倍D101大孔树脂的层析柱中，用5倍柱体积水洗脱除去杂质，然后用8倍柱体积的质量分数为62%乙醇水溶液进行洗脱，乙醇洗脱液在50℃旋蒸除去乙醇、冷冻干燥得多肽。以上实施方式仅用于说明本专利技术，而并非对本专利技术的限制，本领域的普通技术人员，在不脱离本专利技术的精神和范围的情况下，还可以做出各种变化和变型。因此，所有等同的技术方案也属于本专利技术的范畴，本专利技术的专利保护范围应由权利要求限定。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.猪肉功能性多肽的制备方法，包括猪肉的预处理，猪肉的酶解，多肽的制备，

【技术特征摘要】
1.猪肉功能性多肽的制备方法，包括猪肉的预处理，猪肉的酶解，多肽的制备，其特征在于：所述猪肉的酶解过程为：取冷冻猪肉解冻，向解冻的猪肉中加入蒸馏水，料液比为1g:3～7mL，调pH为6.5～7.5，加入木瓜蛋白酶，酶解，灭酶活，调pH为9～10，加入碱性蛋白酶，酶解，灭酶活，冷却至常温，10000r/min离心15min，收集上清液，得猪肉酶解液。2.根据权利要求1所述的猪肉功能性多肽的制备方法，其特征在于：所述木瓜蛋白酶的加入量为猪肉重量的1.0%～1.5%，酶解温度是50～55℃，酶解时间为4～6h。3.根据权利要求1所述的猪肉功能性多肽的制备方法，其特征在于：所述碱性蛋白酶的加入量为猪肉重量的0.8%～1.2%，酶解温度是42～50℃，酶解时间为3～6h。4.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈建军，许维仙，胡旭嵘，陈立平，姜亮，於庆雄，
申请(专利权)人：浙江大飞龙动物保健品股份有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33