新型多肽制造技术

本发明专利技术涉及一种分离的多肽、编码该多肽的核酸、载体和宿主细胞，以及基于其的治疗性处理。其中，该多肽包括：(a)如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列；或(b)与SEQ ID NO:1具有至少95％的相似度的氨基酸序列。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及一类新型多肽、编码该多肽的核酸和包括该多肽的组合物，以及它们在治疗方法中的应用。
技术介绍
碳水化合物代谢紊乱以多种形式发生，最常见的紊乱是获得性的。碳水化合物代谢的获得性或继发性紊乱，例如糖尿病酮症酸中毒、高渗性昏迷和低血糖症，都影响中枢神经系统。在糖尿病中同样可见外周神经疾病的许多形式和变种。碳水化合物代谢的其余紊乱是罕见的先天性代谢缺陷(即遗传缺陷)。碳水化合物代谢的获得性紊乱在美国和国际上均相当普遍。在酗酒者和经胰岛素治疗的糖尿病患者中，低血糖症是神经疾病，特别是急性精神衰退、失忆、定向障碍、迟钝以及昏迷的常见原因。高胰岛素血症很少由其它原因造成，但胰腺肿瘤可能是其原因。糖尿病及其各种神经并发症是成年病患中最常见的紊乱之一。糖尿病是最常见的内分泌疾病，其特征是葡萄糖代谢异常。与这种疾病相关的葡萄糖代谢异常导致高血糖症(高的血糖水平)，并最终导致包括眼睛、肾脏、神经和血管的多器官系统的并发症。持续高血糖或葡萄糖耐量异常的患者通常被诊断为患有这种疾病，虽然最常见的患者起初存在过度排尿(多尿症)和常因极度口渴(烦渴)而频繁饮水的情形。这些典型的起始症状是由高血糖的渗透作用所导致的。糖尿病的发病机理通常与胰腺机能障碍相关，特别是与朗格汉斯胰岛β细胞相关。这种机能障碍可以导致产生胰岛素(一种葡萄糖调节肽激素)的胰岛β细胞被破坏，胰岛素则是一种调节葡萄糖的肽激素。通常，将糖尿病分类为胰岛素依赖型或I型、以及与之相对的非胰岛素依赖型或II型。糖尿病的三种主要形式是：-I型：因身体不能产生胰岛素所导致，其治疗通常涉及施用胰岛素。-II型：因身体不能正确使用胰岛素的健康状况所导致，并伴有相关胰岛素的缺乏。许多最终发展为II型糖尿病的人会经历多年的糖尿病前期状态，该前期状态是人的血糖水平高于正常水平、但并未高至足以诊断为II型糖尿病时的健康状况。-妊娠糖尿病：之前从未得过糖尿病但是孕期具有高血糖(葡萄糖)水平的孕妇被认为具有妊娠糖尿病。妊娠糖尿病影响全部孕妇中的大约4％，其可继续发展为II型(或罕见地为I型)糖尿病。-从上述形式分开归类的许多其它形式的糖尿病。其实例包括因胰岛素分泌的遗传缺陷所导致的先天性糖尿病、与囊性纤维化相关的糖尿病、由高剂量糖皮质激素诱导的类固醇糖尿病、以及几种形式的单基因糖尿病。然而，随着人们对于该类疾病的更深入地理解，上述术语的定义也在变化。例如，已发现在某些患有非胰岛素依赖型糖尿病的患者中，疾病进展为胰岛素依赖型，而在其它患者中胰岛素依赖并未发展。因此，经常依据胰岛破坏的病理学机制对患者进行分类，且I型的指定现在用于指自身免疫性岛发病机理，即指由胰岛特异的自身免疫性攻击所导致的糖尿病，并在本文中如此使用。术语胰岛素依赖型糖尿病(IDDM)指已经进展到这种阶段的I型糖尿病，其中已发生的胰β细胞的自身免疫性破坏足以产生明显症状。术语前IDDM指可通过活检或者自身免疫反应分析所检测到的自身免疫状态，在该状态下胰岛β细胞受到特异性自身免疫攻击，该攻击具有致使其中一些细胞可能受到破坏的程度。然而，在前IDDM中，该破坏(如果存在的话)还未进展到足以需要施用胰岛素的程度。由于在I型糖尿病的早期可以有一个点，其中虽然观察到明显症状，但是某些胰岛功能依然保持(已知为“蜜月期”)，因而不是所有I型糖尿病都被分类为IDDM，也不是所有前IDDM都没有明显症状存在。与由胰岛素不足所导致的代谢异常相关的代谢并发症可以影响很多器官系统。最常见的急性代谢并发症是糖尿病酮症酸中毒，其特征是严重的高血糖(并产生由渗透性利尿所导致的血容量减少)以及由过度的游离脂肪酸释放和酮体产生所引发的代谢性酸中毒。除了酮症酸中毒的急性代谢并发症，糖尿病患者易患一系列导致相当高发病率和过早死亡率的晚期并发症。由于葡萄糖代谢和脂质代谢的异常，动脉粥样化病在糖尿病患者中比一般群体更广泛且更早地发生。这种血管病理尤其是可以导致冠状动脉疾病、中风、以及带有坏疽的外周血管疾病。视网膜病是糖尿病的另一种血管并发症。糖尿病视网膜病是导致失明的主要原因，其通过增加视网膜毛细血管的渗透性而引发，这种渗透性增加可进展为堵塞、出血、形成动脉瘤和已知作为增殖性视网膜病的新血管形成。如上所述，谨慎控制血糖与改善I型糖尿病的晚期并发症相关，这表明保留或恢复β细胞的功能可以减少或消除该疾病的大部分病理性并发症。碳水化合物代谢的遗传性紊乱相当罕见。已在很少的患者(2-6例)中报告丙酮酸脱氢酶(PDH)复合物的严重缺陷以及称为戊糖尿的良性化学异常。低血糖症、糖尿病酮症酸中毒和高渗性昏迷都是有可能致命，但又有可能治愈的疾病。在WO 2011/016026中，本专利技术人已经发现了多种新型的分泌蛋白，即PRT5、PRT6、PRT7和PRT8。特别地，已经显示出PRT8能够显著地降低血液中的葡萄糖水平。然而，专利技术人现在令人惊讶地发现，缩短的PRT8肽，即sbPRT8具有比完整长度的PRT8肽改进的生物活性，并且能够更加显著地降低血糖水平，而其它的PRT8片段并没有显示出任何实质活性。因此，本专利技术的一个目的是提供与PRT8相比具有改进的活性的多肽，以及编码该多肽的核酸、载体和细胞。本专利技术的另一目的是提供sbPRT8用于治疗与血液中葡萄糖过量(即高血糖症)相关的疾病或紊乱的方法和用途。本专利技术的这些和其它用途、以及其目的将随着以下描述而变得清楚明显。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种分离的多肽，其包括：(a)如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列；或(b)与SEQ ID NO:1具有至少95％相似度的氨基酸序列；其中，所说的多肽能够降低血液中的葡萄糖水平。在一个具体实施方式中，分离的多肽由如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列组成。在另一具体实施方式中，多肽在其N-端通过乙酰基团修饰，在其C-端通过酰胺基团修饰。本专利技术进一步提供了一种药物组合物，其包括如上所定义的分离的多肽以及至少一种药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。本专利技术还提供了一种在治疗上为有效量的上述多肽在降低受试者血糖水平方面的用途。在某些具体实施方式中，所说的受试者患有与高血糖症相关的疾病或紊乱，这种疾病或紊乱可以选自但不限于：1型糖尿病、2型糖尿病、代谢综合征、肥胖症、肾病、视网膜病、心血管疾病、腺功能障碍、胰脏疾病、脓毒症、颅内疾病和术后压力。本专利技术还进一步提供了一种在治疗上为有效量的上述多肽在降低受试者血浆甘油三酯(TG)水平方面的用途。本专利技术进一步提供了一种在治疗上为有效量的上述多肽在降低受试者血液中糖化血红蛋白(HbA1c)水平方面的用途。本专利技术进一步提供了编码多肽的分离的核酸分子、包括该核酸分子的表达载体、以及包括该表达载体的宿主细胞；其中，该多肽包括：(a)如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列；或(b)与SEQ ID NO:1具有至少95％相似度的氨基酸序列。附图说明图1A-1B：sbPRT8对经链脲佐菌素(streptozotocyn，STZ)处理的C57Bl/6小鼠的效果；图1A：该图示出注射了STZ(按50mg/kg的剂量腹腔注射4天)的C57Bl/6小鼠在采用PRT8或sbPRT8治疗5周、并按1mg/kg的剂量腹腔注射葡萄糖(IPGTT)后的葡萄糖水平；本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽，其包括：(a)如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列；或(b)与SEQ ID NO:1具有至少95％的相似度的氨基酸序列；其中，所述的多肽能降低血液中的葡萄糖浓度。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.01.02 US 14/146,2371.一种分离的多肽，其包括：(a)如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列；或(b)与SEQ ID NO:1具有至少95％的相似度的氨基酸序列；其中，所述的多肽能降低血液中的葡萄糖浓度。2.如权利要求1所述的分离的多肽，其由如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列组成。3.如权利要求1或2所述的分离的多肽，其中，所述的多肽在其N-端通过乙酰基团修饰，在其C-端通过酰胺基团修饰。4.一种药物组合物，其包括如权利要求1至3之一所述的分离的多肽、以及至少一种药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。5.一种如权利要求1至3之一所述的分离的多肽或者如权利要求4所述的药物组合物在治疗与高血糖症相关的疾病...

【专利技术属性】
技术研发人员：塔马蕾·桑德勒，奥利·迪瓦里，
申请(专利权)人：两合生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：以色列;IL