用于鉴别沙门氏菌和单增李斯特菌的检测分析方法技术

本发明专利技术公开了一种用于鉴别沙门氏菌和单增李斯特菌的检测分析方法，其包括以下步骤：(1)样品的制备；(2)样品的测定：采用近红外光谱仪对沙门氏菌、单增李斯特菌的各组分进行近红外光谱透射扫描；(3)数据处理：将处理后的光谱数据利用主成分分析法PCA法进行数据的处理，选取前两个主成分的得分值，并采用分析软件OPUS 6.5中主成分分析法对光谱数据进行分析。本发明专利技术通过测定沙门氏菌、单增李斯特菌等致病菌的近红外光谱图，利用基于主成分分析技术的投影判别对光谱数据进行分析，结果表明，不论是利用全细胞、细胞壁还是细胞质的近红外光谱分析，都可以通过本发明专利技术的方法将沙门氏菌和单增李斯特菌区分开来。

Detection and identification of Salmonella and monocytogenes Lester

The present invention discloses a detection and analysis method for identifying Salmonella and mono Lester bacteria, which includes the following steps: (1) preparation of samples; (2) determination of samples: near infrared transmission scanning for each component of Salmonella and monocytogenes by near infrared spectrometer; (3) data processing: after processing The spectral data are processed by the principal component analysis (PCA) method, and the score of the first two main components is selected, and the analysis software OPUS 6.5 principal component analysis is used to analyze the spectral data. By measuring the near infrared spectrum of pathogenic bacteria such as Salmonella and Lester bacteria and using the projection discrimination based on the principal component analysis technique, the spectral data are analyzed. The results show that the near infrared spectroscopic analysis of all cells, cell walls and cytoplasm can be used by the method of the invention. Salmonella is distinguished from the single increase of Lester bacteria.

【技术实现步骤摘要】
用于鉴别沙门氏菌和单增李斯特菌的检测分析方法
本专利技术属于食品检测
，具体涉及一种用于鉴别沙门氏菌和单增李斯特菌的检测分析方法。
技术介绍
沙门氏菌是一种人畜共患和食源性疾病的致病菌。人畜感染后可呈无症状带菌状态，也可表现为有临床症状的致死疾，它可能加重病态或死亡率，或者降低动物的繁殖生产力。自19世纪后期，沙门氏菌首次被鉴定为人类的一种病原以来，检测方法都是建立在采取感染病人的粪便或血液作为临床病料的基础上。此后的60年间，用于从食品中分离沙门氏菌的方法实质上与那些用于从临床病料中分离沙门氏菌的方法是相同的。虽然这些方法本身证明是可靠的，但却很费力、耗时，需要4～7d才能完成。单核细胞增生李斯特菌也是一种人畜共患病的病原菌。感染后主要表现为败血症、脑膜炎和单核细胞增多。单增李斯特菌在各年龄段人群中均可发病，尤其免疫机能低下者和新生儿、孕妇、老年人等，病死率为20％～30％。应用常规方法检验耗时费力，程序复杂。采用聚合酶链反应(PCR)法检测，也需要24h才能完成检测过程，但仍然满足不了实时检测的需要。进入90年代，近红外分析技术逐步受到分析化学家的重视，应用逐步扩展到石油化本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于鉴别沙门氏菌和单增李斯特菌的检测分析方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)样品的制备：选择对数期的沙门氏菌全细胞制备悬液，以转速3 000r.min

【技术特征摘要】
1.用于鉴别沙门氏菌和单增李斯特菌的检测分析方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)样品的制备：选择对数期的沙门氏菌全细胞制备悬液，以转速3000r.min-1离心分离湿菌体，以无菌水分三次洗涤沉淀部分，充分振荡摇匀使菌体分散开来，平板菌落计数法进行菌落计数，另用移液枪移取1mL菌液于大试管中，加入9mL无菌水，充分振荡摇匀形成10倍稀释菌悬液，然后逐级进行19次10倍稀释，制成一组20个浓度梯度的沙门氏菌全细胞悬液，浓度梯度值呈比差为10的等差序列，备用；一组20个浓度梯度的单增李斯特氏菌全细胞悬液的制备同沙门氏菌全细胞悬液制备过程；用超声波细胞粉碎仪破碎沙门氏菌的全细胞，以转速15000r.min-1离心分离，沉淀部分为细胞壁、上清液为细胞质，将细胞质悬液充分振荡摇匀，用移液枪移取1mL菌液于大试管中，加入9mL无菌水，充分振荡摇匀形成10倍稀释菌悬液，然后逐级进行19次10倍稀释过程，制成一组浓度梯度的沙门氏菌细胞质悬液，20个浓度梯度值呈比差为10的等差序列，备用；一组20个浓度梯度的单增李斯特氏菌细胞质悬液的制备同沙门氏菌细胞质悬液制备过程；一组20个浓度梯度的沙门氏菌细胞壁悬液的制备同沙门氏菌细胞质悬液制备过程；一组20个浓度梯度的单增李斯特氏菌细胞壁悬液的制备同单增李斯特氏菌细胞质悬液制备过程；(2)样品的测定：采用近红外光谱仪对沙门氏菌、单增李斯特菌的各组分进行近红外光谱透射扫描；(3)数据处理：将处理后的光谱数据利用主成分分析法PCA法进行数据的处理，选取前两个主成分的得分值，并采用分析软件OPUS6.5中主成分分析法对光谱数据进行分析。2.根据权利要求1所述的检测分析方法，其特征在于：步骤(1)中，沙门氏菌的平板菌落计数法进行菌落计数结果为80亿.mL-1；单增李斯特氏菌的平板菌落计数法进行菌落计数结果为175亿.mL-1。3.根据权利要求1所...

【专利技术属性】
技术研发人员：姜川，
申请(专利权)人：丽水市食品药品与质量技术检验检测院，
类型：发明
国别省市：浙江,33