调控免疫反应的方法及抗体技术

本发明专利技术提供抗CD11b抗体或其抗原结合部分，及所述抗体通过调节细胞上的CD11b表现从而用于调节免疫反应的用途及方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】调控免疫反应的方法及抗体
本专利技术涉及免疫疗法的领域。特定言之，本专利技术涉及通过调节细胞上的CD11b表现以调控免疫反应的方法及抗体。
技术介绍
普遍咸信表现免疫原性抗原的癌细胞可诱发抗肿瘤形成的有效免疫反应。另外，肿瘤微环境富含可触发TLR传讯以活化抗肿瘤反应的组分(StandifordTJ,KeshamouniVG(2012)Breakingthetolerancefortumor:TargetingnegativeregulatorsofTLRsignaling.Oncoimmunology1:340-345)。意谓，在疾病的初始阶段，癌细胞可有机会经免疫系统识别及排斥，所述免疫系统对发展中的肿瘤发挥宿主保护及肿瘤建模作用两者。然而，癌细胞亦具有许多负调节机制以逃避免疫监视，诸如MHC分子的下调或抗原处理及呈现机械；增加抑制细胞介素的分泌；及表现抑制分子以诱发对癌细胞的免疫耐受性。因此，通常认为癌症病患具有较差的免疫力。因此，仍需要开发用于逆转与免疫抑制相关的癌症的药剂或疗法。整合素αM(CD11b、CR3A及ITGAM)是形成表现于许多免疫细胞(包括单核细胞、颗粒细胞、巨噬细胞、树突状细胞、自然杀手细胞及骨髓衍生的抑制细胞)的表面上的异二聚整合素αMβ2分子的蛋白质次单元。整合素αMβ2通过通过其杂乱配体库调节细胞黏附、迁移、趋化作用及吞噬作用介导炎症。近期研究已指示通过调控TLR4反应用于炎症的关键作用(HanC、JinJ、XuS、LiuH、LiN等人，(2010)IntegrinCD11bnegativelyregulatesTLR-triggeredinflammatoryresponsesbyactivatingSykandpromotingdegradationofMyD88andTRIFviaCbl-b.NatImmunol11:734-742)。血管的腔侧内的各种内源性整合素αMβ2配体(诸如血纤维蛋白原)可触发TLR4传讯。与β2整合素偶合的ITAM的高结合性连接瞬时诱发TLR活化，但通过靶向MyD88及TRIF以进行Cbl-b介导的蛋白水解降解以迅速抑制TLR传讯。因此，整合素αMβ2可充当选择性抑制TLR传讯通道的组分以阻断TLR家族的效应的负调节剂(WangL、GordonRA、HuynhL、SuX、ParkMinKH等人，(2010)IndirectinhibitionofToll-likereceptorandtypeIinterferonresponsesbyITAM-coupledreceptorsandintegrins.Immunity32:518-530)。PD-L1是共抑制蛋白中的一者，其以变化的浓度表现于许多类型的免疫细胞上且组成性地表现于单核细胞、巨噬细胞及树突状细胞、T细胞、B细胞、上皮细胞及血管内皮细胞上。一经正诱发(诸如IFN-γ及有丝分裂刺激)，则PD-L1将经进一步上调。PD-L1结合至其受体PD-1(其发现于经活化的T细胞上)，通过于经活化的T细胞中诱发共抑制讯息(其促进T细胞凋亡及无反应性)以产生强效免疫抑制(ButteMJ、KeirME、PhamduyTB、SharpeAH、FreemanGJ(2007)Programmeddeath-1ligand1interactsspecificallywiththeB7-1costimulatorymoleculetoinhibitTcellresponses.Immunity27:111-122；FranciscoLM、SalinasVH、BrownKE、VanguriVK、FreemanGJ等人，(2009)PD-L1regulatesthedevelopment,maintenance,andfunctionofinducedregulatoryTcells.JExpMed206:3015-3029)。PD-L1/PD-1相互作用的完整性对避免过度免疫反应亦是重要的。PD-L1与PD-1之间的相互作用的缺陷可导致免疫反应的失控传播，从而导致诸如以下的病症：自体免疫疾病、超敏反应、移植排斥及移植物抗宿主疾病。US8,008,449提供经分离的特异性结合至PD-1的单株抗体(特定言之人类单株抗体)。US8,354,509涉及阻断人类程序化死亡受体1(hPD-1)与其配体(hPD-L1或hPD-L2)的结合的抗体。US8,900,587揭示阻断hPD-1与hPD-L1或hPD-L2的结合的抗体及通过PD-1路径增加(或减少下调)免疫细胞的活性的方法。US9,067,999及US9,073,994提供经由利用由PD-1、PD-L1或PD-L2诱发的免疫抑制讯息的抑制所引起的免疫增强作从而用于癌症或感染治疗的组合物及使用其等的疗法。然而，上文专利中提及的抗体对疗法具有低反应率。US20140099254A1提供诱发针对癌症或感染性疾病的免疫反应的方法，其包括向患有癌症或感染性疾病的个体投与选自由以下组成的群的两种或更多种药剂的组合：(i)白细胞复位向双特异性抗体，其包括ADAM17、CD2、CD3、CD4、CD5、CD6、CD8、CD11a、CD11b、CD14、CD16、CD16b、CD25、CD28、CD30、CD32a、CD40、CD40L、CD44、CD45、CD56、CD57、CD64、CD69、CD74、CD89、CD90、CD137、CD177、CEACAM6、CEACAM8、HLA-DRα链、KIR及SLC44A2；(ii)干扰素；(iii)查核点抑制剂抗体，其包括CTLA4、PD1、PD-L1、LAG3、B7-H3、B7-H4.KIR及TIM3；及(iv)抗体-药物结合物(ADC)。然而，此参考仅组合许多已知免疫相关成分，然而其对所述等成分间的相互影响毫无提示。
技术实现思路
本专利技术意外发现PD-L1的表现可通过使CD11b调节剂结合至免疫细胞及/或其他细胞上的CD11b来抑制。CD11b调节剂结合至CD11b将减少LPS致敏单核细胞上的PD-L1表现。在LPS诱发的免疫抑制单核细胞或来自患有败血性休克的病患的单核细胞中，当细胞受LPS激发时，CD11b调节剂结合至CD11b亦减少PD-L1表现。本专利技术提供用于抑制免疫细胞中PD-L1表现的方法，其包括使所述免疫细胞与结合至所述细胞上CD11b的CD11b调节剂接触，从而调节这些免疫细胞的PD-L1表现。本专利技术提供用于免疫细胞中逆转免疫抑制或免疫衰竭或诱发预存免疫力的方法，其包括使所述免疫细胞与结合至所述细胞上CD11b的CD11b调节剂接触。本专利技术提供用于判定对CD11b调节剂具有反应性的个体的方法，所述方法包括侦测生物样品或个体中的PD-L1是否被抑制，方式为通过使所述生物样品或所述个体中的免疫细胞与CD11b调节剂接触并侦测所述CD11b调节剂对免疫细胞上PD-L1的抑制，其中所述PD-L1抑制指示所述个体对CD11b调节剂具有反应性。在一些实施例中，本文描述的CD11b调节剂是抑制CD11b表现的RNAi剂、抗CD11b抗体或调控CD11b的小分子化合物。在一个实施例中，所述免疫细胞是T细胞或单核细胞或颗粒细胞或巨噬细本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于抑制免疫细胞中PD‑L1表现的方法，其包括使所述免疫细胞与结合至所述细胞上CD11b的CD11b调节剂接触，从而抑制所述免疫细胞的PD‑L1表现。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.06.12 US 62/174,681;2015.06.12 US 62/174,6731.一种用于抑制免疫细胞中PD-L1表现的方法，其包括使所述免疫细胞与结合至所述细胞上CD11b的CD11b调节剂接触，从而抑制所述免疫细胞的PD-L1表现。2.一种用于免疫细胞中逆转免疫抑制或免疫衰竭(immuneexhaustion)或诱发预存免疫力的方法，其包括使所述免疫细胞与结合至所述细胞上CD11b的CD11b调节剂接触。3.一种用于判定对CD11b调节剂具有反应性的个体的方法，所述方法包括侦测生物样品或个体中的PD-L1是否被抑制，方式为通过使所述生物样品或所述个体中的免疫细胞与CD11b调节剂接触并进一步侦测所述免疫细胞上PD-L1的抑制，其中所述PD-L1抑制指示所述个体对CD11b调节剂具有反应性。4.如权利要求1至3中任一项的方法，其中所述CD11b调节剂是RNAi剂、结合至CD11b的抗CD11b抗体或核苷酸类似物、结合至CD11b的小分子化合物。5.如权利要求4的方法，其中所述RNAi剂是抑制CD11b表现的微小RNA(miRNA)或短小干扰RNA(siRNA)。6.如权利要求4的方法，其中所述抗CD11b抗体是单株、嵌合、人类化、人类或双特异性抗CD11b抗体或其抗原结合片段。7.如权利要求4的方法，其中所述小分子化合物是：8.如权利要求1至3中任一项的方法，其中所述免疫细胞是单核细胞或颗粒细胞或巨噬细胞或骨髓衍生的抑制细胞或自然杀手细胞或T细胞。9.如权利要求1至3中任一项的方法，其中所述CD11b结合增加IFN-γ、IL-12或CD8T细胞。10.如权利要求1至3中任一项的方法，其中CD11b调节剂结合至细胞上的CD11b治疗及/或预防与免疫抑制相关的疾病。11.如权利要求10的方法，其中与免疫抑制或免疫衰竭相关的疾病是急性及/或慢性感染、败血症、癌症或老化中的免疫衰老。12.一种用于治疗或预防急性及/或慢性感染、败血症、癌症或老化中的免疫衰老的方法，其包括向个体投与有效量的CD11b调节剂。13.如权利要求11至12的方法，其中所述癌症是黑色素瘤、肺癌、肺鳞状细胞癌、头颈癌、乳癌、卵巢癌、子宫癌、前列腺癌、胃癌、子宫颈癌、食道癌、膀胱癌、肾癌、脑癌、肝癌、结肠癌、骨癌、胰脏癌、皮肤癌、皮肤或眼内恶性黑色素瘤、卵巢癌、直肠癌、肛门区癌、胃癌、睾丸癌、输卵管癌、子宫内膜癌、子宫颈癌、阴道癌、阴门癌、霍奇金氏病(Hodgkin’sDisease)、非霍奇金氏淋巴瘤(non-Hodgkin’slymphoma)、食道癌、小肠癌、内分泌系统癌、甲状腺癌、副甲状腺癌、肾上腺癌、软组织肉瘤、尿道癌、阴茎癌、慢性或急性白血病(包括急性骨髓性白血病、慢性骨髓性白血病、急性淋巴母细胞白血病、慢性淋巴球性白血病)、儿童的实体肿瘤、淋巴球性淋巴瘤、肾盂癌、中枢神经系统(CNS)的赘瘤、原发性CNS淋巴瘤、肿瘤血管生成、髓轴(spinalaxis)肿瘤、脑干神经胶瘤、垂体腺瘤、卡波西氏肉瘤(Kaposi’ssarcoma)、表皮样癌、鳞状细胞癌及T细胞淋巴瘤。14.如权利要求11至12的方法，其中所述癌症是转移癌、难治性癌症、复发性癌症或晚期癌症。15.如权利要求12的方法，其中癌症的预防及/或治疗包含投与额外的活性剂或疗法。16.如权利要求15的方法，其中所述额外的活性剂是免疫查核点疗法、放射疗法或化学疗法。17.如权利要求16的方法，其中所述CD11b调节剂及所述免疫查核点疗法、放射疗法或化学疗法是同时、循序或分别投与。18.如权利要求17的方法，其中所述免疫查核点疗法包含投与免疫查核点蛋白。19.如权利要求18的方法，其中所述免疫查核点蛋白是抗PD-1抗体或PD-1配体或抗CTLA-4抗体或CTLA-4配体或抗PD-L1抗体或PD-L1配体，或其抗原结合片段，或其任何组合。20.如权利要求19的方法，其中所述抗PD-1抗体是纳武单抗(nivolumab)或派姆单抗(pembrolizumab)，及所述抗CTLA-4抗体是易普利姆玛单抗(ipilimumab)，及所述抗PD-L1抗体是阿特珠单抗(atezolizu-mab)。21.如权利要求16至17的方法，其中所述化学疗法包含投与化学治疗剂。22.如权利要求21的方法，其中所述化学治疗剂是烷化剂、抗代谢物、抗微管剂、拓朴异构酶抑制剂或细胞毒性抗生素。23.如权利要求21的方法，其中所述化学治疗剂是顺铂、5-Fu、紫杉醇、多西他赛(docetaxel)、长春瑞滨(vinorelbine)、长春地辛(vindesine)、长春氟宁(vinflunine)、吉西他滨(gemcitabine)、胺甲喋呤(methotrexate)、吉非替尼(gefitinib)、拉帕替尼(lapatinib)或埃罗替尼(erlotinib)。24.一种抗CD11b抗体或其抗原结合部分，其包含以下中的至少一者：由NYWIN(SEQIDNO:1)或GFSLTSNSIS(SEQIDNO:2)的氨基酸残基或具有与SEQIDNO:1或2具有至少85％一致性的氨基酸序列的变体组成的重链互补决定区1(H-CDR1)；由NIYPSDTYINHNQKFKD(SEQIDNO:3)或AIWSGGGTDYNSDLKS(SEQIDNO:4)的氨基酸残基或具有与SEQIDNO:3或4具有至少85％一致性的氨基酸序列的变体组成的重链CDR2(H-CDR2)；及由SAYANYFDY(SEQIDNO:5)或RGGYPYYFDY(SEQIDNO:6)的氨基酸残基或具有与SEQIDNO:5或6具有至少85％一致性的氨基酸序列的变体组成的重链CDR3(H-CDR3)；且包含以下中的至少一者：由RASQNIGTSIH(SEQIDNO:7)或KSSQSLLYSENQENYLA(SEQIDNO:8)的氨基酸残基或具有与SEQIDNO:7或8具有85％一致性的氨基酸序列的变体组成的轻链CDR1(L-CDR1)；由YASESIS(SEQIDNO:9)或WASTRQS(SEQIDNO:10)的氨基酸残基或具有与SEQIDNO:9或10中的任一者具有85％一致性的氨基酸序列的变体组成的轻链CDR2(L-CDR2)；及由QQSDSWPTLT(SEQIDNO:11)或QQYYDTPLT(SEQIDNO:12)的氨基酸残基或具有与SEQIDNO:11或12中的任一者具有85％一致性的氨基酸序列的变体组成的轻链CDR3(L-CDR3)；使得所述经分离的抗体或其抗原结合部分结合至CD11b。25.如权利要求24的抗CD11b抗体或其抗原结合部分，其包含(i)重链可变区，其包括包含SEQIDNO:1的H-CDR1、包含SEQIDNO:3的H-CDR2及包含SEQIDNO:5的H-CDR3的重链可变区，及(ii)轻链可变区，其包括包含SEQIDNO:7的L-CDR1、包含SEQIDNO:9的L-CDR2及包含SEQIDNO:11的L-CDR3；或(iii)重链可变区，其包括包含SEQIDNO:2的H-CDR1、包含SEQIDNO:4的H-CDR2及包含SEQIDNO:6的H-CDR3的重链可变区，及(iv)轻链可变区，其包括包含SEQIDNO:8的L-CDR1、包含SEQIDNO:10的L-CDR2及包含SEQIDNO:12的L-CDR3。26.如权利要求24或25的抗CD11b抗体或其抗原结合部分，其是嵌合、人类化或人类抗体。27.一种重链可变区或其抗原结合部分，其包...

【专利技术属性】
技术研发人员：吕衍达，张家鸣，魏采音，蔡宜芳，吴凌巧，
申请(专利权)人：台湾基督长老教会马偕医疗财团法人马偕纪念医院，
类型：发明
国别省市：中国台湾,71