具有整合可控功能的嵌合抗原受体制造技术

本发明专利技术涉及细胞免疫疗法领域，并且更具体地涉及新一代嵌合抗原受体(CAR)，其允许通过与小分子的相互作用来控制被赋予这种CAR的免疫细胞。更具体地，本发明专利技术涉及嵌合抗原受体，其在至少一个胞外域中包含将受体的抗原结合功能从关闭状态调整为打开状态的分子开关，反之亦然。因此，本发明专利技术提供赋予了更受控和潜在更安全的工程化的CAR的免疫细胞，如T淋巴细胞。

Chimeric antigen receptor with integrated and controllable function

The invention relates to the field of cellular immunotherapy, and more specifically to the new generation of chimeric antigen receptor (CAR), which allows the immune cells to be assigned to such CAR through interaction with small molecules. More specifically, the present invention relates to the chimeric antigen receptor, which contains at least one extracellular domain, including a molecular switch that switches the receptor's antigen binding function from the closed state to the open state, and vice versa. Thus, the invention provides a more controlled and potentially safer engineered CAR immune cell, such as a T lymphocyte.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】具有整合可控功能的嵌合抗原受体
本专利技术涉及细胞免疫治疗领域，更具体地，本专利技术涉及新一代嵌合抗原受体(CAR)，其允许通过与小分子的相互作用来控制被赋予这种CAR的免疫细胞。更具体地，本专利技术涉及嵌合抗原受体，其在至少一个胞外域中包含控制受体的抗原结合功能的分子开关。因此，本专利技术提供了被赋予更受控的和潜在更安全的工程化的CAR的免疫细胞，例如T淋巴细胞。
技术介绍
过继性免疫治疗涉及离体产生的自体抗原特异性T细胞的转移，是治疗病毒感染和癌症的有前景的策略。可以通过扩增抗原特异性T细胞或通过基因工程重定向T细胞而产生用于过继性免疫治疗的T细胞(Park,Rosenbergetal.2011)。病毒抗原特异性T细胞的转移是用于治疗移植相关病毒感染和罕见病毒相关恶性肿瘤的完善的程序。类似地，已证实肿瘤特异性T细胞的分离和转移在治疗黑素瘤方面是成功的。已通过转基因T细胞受体或嵌合抗原受体(CAR)的遗传转移成功地产生了T细胞中的新特异性(Jena,Dottietal.2010)。CAR是由与单个融合分子中的一个或多个信号结构域关联的靶向部分组成的合成受体。通常，CAR的结合部分由本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种嵌合抗原受体(CAR)，其特征在于它包含：a)至少一个胞外域，其包含：i)细胞外抗原结合结构域；和ii)开关结构域，其包含至少第一多聚化配体结合结构域和第二多聚化配体结合结构域，所述第一多聚化配体结合结构域和第二多聚化配体结合结构域能够结合预定的多价配体以形成包含上述两个结合结构域和它们能够与其结合的多价配体的多聚体；b)至少一个跨膜结构域；和c)至少一个包含信号转导结构域和可选的共刺激结构域的胞内域；其中，所述开关结构域位于细胞外抗原结合结构域和跨膜结构域之间。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.08.24 DK PA201570545;2015.12.23 EP 15202592.01.一种嵌合抗原受体(CAR)，其特征在于它包含：a)至少一个胞外域，其包含：i)细胞外抗原结合结构域；和ii)开关结构域，其包含至少第一多聚化配体结合结构域和第二多聚化配体结合结构域，所述第一多聚化配体结合结构域和第二多聚化配体结合结构域能够结合预定的多价配体以形成包含上述两个结合结构域和它们能够与其结合的多价配体的多聚体；b)至少一个跨膜结构域；和c)至少一个包含信号转导结构域和可选的共刺激结构域的胞内域；其中，所述开关结构域位于细胞外抗原结合结构域和跨膜结构域之间。2.根据权利要求1所述的嵌合抗原受体，其中，所述第一多聚化配体结合结构域和所述第二多聚化配体结合结构域来源于化学诱导二聚化(CID)系统。3.根据权利要求1或2所述的嵌合抗原受体，其中，所述第一多聚化配体结合结构域和所述第二多聚化配体结合结构域是相同或不同的。4.根据权利要求1至3中任一项所述的嵌合抗原受体，其中，所述第一多聚化配体结合结构域和所述第二多聚化配体结合结构域选自由以下组成的多聚化配体结合结构域的对：Fk506结合蛋白(FKBP12):mTOR的FKBP-雷帕霉素结合结构域(FRB)、FKBP12:FKBP12、FKBP(F36V):FKBP(F36V)、FKBP12:FRB(T2098L)、FKBP12:钙调磷酸酶A(CnA)、FKBP12:亲环素(CyP)、GyrB:GyrB、GAI:GID1A、GAI:GID1B、GAI:GID1C、Snap标签:Halo标签、Snap标签:CLIP标签、DHFR:DHFR、糖皮质激素受体配体结合结构域:DHFR和PYL1:ABI1。5.根据权利要求1至3中任一项所述的嵌合抗原受体，其中，所述第一多聚化配体结合结构域是FKBP12(SEQIDNO:1)或其与FKBP12(SEQIDNO:1)具有至少80％如至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或至少99％序列同一性的变体。6.根据权利要求1至3中任一项所述的嵌合抗原受体，其中，所述第二多聚化配体结合结构域是FKBP12(SEQIDNO:1)或其与FKBP12(SEQIDNO:1)具有至少80％如至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或至少99％序列同一性的变体。7.根据权利要求5所述的嵌合抗原受体，其中，所述第二多聚化配体结合结构域是FRB(SEQIDNO:2)或其与FRB(SEQIDNO:2)具有至少80％如至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或至少99％序列同一性的变体。8.根据权利要求5所述的嵌合抗原受体，其中，所述第二多聚化配体结合结构域是包含在T2098处的氨基酸替换的FRB的变体，其中，T2098被亮氨酸替换(SEQIDNO:4)。9.根据权利要求1至3中任一项所述的嵌合抗原受体，其中，所述第一多聚化配体结合结构域是具有SEQIDNO:3所示的氨基酸序列的FKBP12(F36V)，并且所述第二多聚化配体结合结构域是具有如SEQIDNO:3所示的氨基酸序列的FKBP12(F36V)。10.根据权利要求1至3中任一项所述的嵌合抗原受体，其中，所述第一多聚化配体结合结构域是FKBP12(SEQIDNO:1)或其与FKBP12(SEQIDNO:1)具有至少80％如至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或至少99％序列同一性的变体，并且所述第二多聚化配体结合结构域是钙调磷酸酶A(CnA)(SEQIDNO:5)或其与CnA(SEQIDNO:5)具有至少80％如至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或至少99％序列同一性的变体。11.根据权利要求1至3中任一项所述的嵌合抗原受体，其中，所述第一多聚化配体结合结构域是FKBP12(SEQIDNO:1)或其与FKBP12(SEQIDNO:1)具有至少80％如至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或至少99％序列同一性的变体，并且所述第二多聚化配体结合结构域是亲环素(CyP)(SEQIDNO:6)或其与CyP(SEQIDNO:6)具有至少80％如至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或至少99％序列同一性的变体。12.根据权利要求1至3中任一项所述的嵌合抗原受体，其中，所述第一多聚化配体结合结构域和所述第二多聚化配体结合结构域选自GyrB(SEQIDNO:7)、其香豆霉素结合片段，或其与GyrB(SEQIDNO:7)或其香豆霉素结合片段具有至少80％如至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或至少99％序列同一性的变体。13.根据权利要求12所述的嵌合抗原受体，其中，所述香豆霉素结合片段是GyrB的24KDa氨基末端亚结构域。14.根据权利要求1至3中任一项所述的嵌合抗原受体，其中，所述第一多聚化配体结合结构域是GAI(SEQIDNO:8)或其与GAI(SEQIDNO:8)具有至少80％如至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或至少99％序列同一性的变体，并且所述第二多聚化配体结合结构域是GID1A(SEQIDNO:9)或其与GID1A(SEQIDNO:9)具有至少80％如至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或至少99％序列同一性的变体。15.根据权利要求1至3中任一项所述的嵌合抗原受体，其中，所述第一多聚化配体结合结构域是GAI(SEQIDNO:8)或其与GAI(SEQIDNO:8)具有至少80％如至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或至少99％序列同一性的变体，并且所述第二多聚化配体结合结构域是GID1B(SEQIDNO:10)或其与GID1B(SEQIDNO:10)具有至少80％如至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或至少99％序列同一性的变体。16.根据权利要求1至3中任一项所述的嵌合抗原受体，其中，所述第一多聚化配体结合结构域是GAI(SEQIDNO:8)或其与GAI(SEQIDNO:8)具有至少80％如至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或至少99％序列同一性的变体，并且所述第二多聚化配体结合结构域是GID1C(SEQIDNO:11)或其与GID1C(SEQIDNO:11)具有至少80％如至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或至少99％序列同一性的变体。17.根据权利要求1至3中任一项所述的嵌合抗原受体，其中，所述第一多聚化配体结合结构域是Snap标签(SEQIDNO:12)或其与Snap标签(SEQIDNO:12)具有至少80％如至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或至少99％序列同一性的变体，并且所述第二多聚化配体结合结构域是Halo标签(SEQIDNO:13)或其与Halo标签(SEQIDNO:13)具有至少80％如至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或至少99％序列同一性的变体。18.根据权利要求1至3中任一项所述的嵌合抗原受体，其中，所述第一多聚化配体结合结构域是Snap标签(SEQIDNO:12)或其与Snap标签(SEQIDNO:12)具有至少80％如至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或至少99％序列同一性的变体，并且所述第二多聚化配体结合结构域是CLIP标签(SEQIDNO:14)或其与CLIP标签(SEQIDNO:14)具有至少80％如至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或至少99％序列同一性的变体。19.根据权利要求1至3中任一项所述的嵌合抗原受体，其中，所述第一多聚化配体结合结构域是DHFR(SEQIDNO:15)或其与DHFR(SEQIDNO:15)具有至少80％如至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或至少99％序列同一性的变体，并且所述第二多聚化配体结合结构域是DHFR(SEQIDNO:15)或其与DHFR(SEQIDNO:15)具有至少80％如至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或至少99％序列同一性的变体。20.根据权利要求1至3中任一项所述的嵌合抗原受体，其中，所述第一多聚化配体结合结构域是糖皮质激素受体配体结合域(SEQIDNO:16)或其与所述糖皮质激素受体配体结合结构域(SEQIDNO:16)具有至少80％如至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或至少99％序列同一性的变体，并且所述第二多聚化配体结合结构域是DHFR(SEQIDNO:15)或其与...

【专利技术属性】
技术研发人员：亚历山大·朱耶拉特，菲利普·迪沙泰奥，劳伦特·普瓦罗，
申请(专利权)人：塞勒克提斯公司，
类型：发明
国别省市：法国,FR