The invention discloses a method for the preservation of Streptococcus suis type 2 MRP gene engineering bacteria, which relates to the technical field of transgenic engineering. The invention discloses a method of preserving transgenic MRP gene of Streptococcus suis type 2 engineering bacteria that saline containing glycerol as preservation reagent, save reagent added to the bacteria containing target bacteria, packed in sterilized EP tube, and immediately placed in 80 ~ under 20 DEG C for cryopreservation; the method has the advantages of simple operation, long storage, small occupied space, low cost, a small amount of frozen tube packaging, easy management, prevent repeated freezing and thawing caused the death of the cell and bacteria pollution, improve the survival rate of bacteria; and after a long time preservation still remain the same with the primary bacterial viability and purity. To hold an important role in maintaining the stability of the strains and plasmids.
【技术实现步骤摘要】
一种转猪链球菌2型MRP基因工程菌的保存方法
本专利技术涉及转基因工程
,具体而言,涉及一种转猪链球菌2型MRP基因工程菌的保存方法。
技术介绍
猪链球菌是具有荚膜的一种革兰氏阳性球菌。可根据其细胞壁抗原成分将其大致归类为兰氏分群(LancefieldgroupD)D群链球菌。根据其荚膜抗原(CPS)的不同,猪链球菌被分为35(1~34型,1/2型)种血清型,其中1,2,7,9型是猪的致病菌。猪链球菌的定植部位为猪的上呼吸道,尤其是扁桃体和鼻腔。部分血清型的猪链球菌具有致病性,主要通过伤口感染。可引起猪的急性败血症(septicemiawithsuddendeath)、脑膜炎(meningitis)、关节炎(arthritis)、心内膜炎(endocarditis)、肺炎(pneumonia)等疾病。部分菌株可引起人类感染,造成细菌性脑炎(bacterialmeningitis)或引起中毒样休克综合征(toxicshock-likesyndrome)。因此,对猪链球菌的深入研究和防制在公共卫生方面具有重要意义。在研究猪链球菌的过程中,通常需要利用转基因工程技术对猪链球菌2型的各种基因进行深入研究。需要将导入有外源猪链球菌2型基因的基因工程菌进行保存,以供后期研究、交换和使用等需求。而菌种在保存过程中,必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态,这样才能在一定的时间内不发生变异而又保持生物活性。目前比较常用的菌种保存方法包括真空冷冻干燥法、琼脂斜面低温保存法、脱纤维羊血冷冻保存法,液体石蜡保存法。其中真空冷冻保存法效果最好,但对于设备要求高,成本高 ...
【技术保护点】
一种转猪链球菌2型MRP基因工程菌的保存方法,其特征在于,其包括:将保存试剂加入至含目标菌的菌液中,得到目标菌保存液;将所述目标菌保存液分装于已灭菌的EP管中,并立即置于‑80℃~‑20℃条件下进行低温保存;其中,所述目标菌为转化有外源质粒的转基因工程菌,所述外源质粒含有猪链球菌2型MRP基因序列;所述保存试剂为含有甘油的生理盐水。
【技术特征摘要】
1.一种转猪链球菌2型MRP基因工程菌的保存方法,其特征在于,其包括:将保存试剂加入至含目标菌的菌液中,得到目标菌保存液;将所述目标菌保存液分装于已灭菌的EP管中,并立即置于-80℃~-20℃条件下进行低温保存;其中,所述目标菌为转化有外源质粒的转基因工程菌,所述外源质粒含有猪链球菌2型MRP基因序列;所述保存试剂为含有甘油的生理盐水。2.根据权利要求1所述的转猪链球菌2型MRP基因工程菌的保存方法,其特征在于,在所述保存试剂中,甘油的浓度为20%~60%。3.根据权利要求2所述的转猪链球菌2型MRP基因工程菌的保存方法,其特征在于,在所述目标菌保存液中,甘油的浓度为10%~30%。4.根据权利要求3所述的转猪链球菌2型M...
【专利技术属性】
技术研发人员:余美伦,李影,秦香芹,孟庆雪,韩伟丽,何佳,苑玉凤,王宁,王春东,闫增福,刘庆宇,
申请(专利权)人:哈尔滨瀚邦医疗科技有限公司,
类型:发明
国别省市:黑龙江,23
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。