体外筛选2′-取代核酸的方法技术

对应靶分子识别含有修饰核苷酸的核酸配体的方法，其中包括：　　　　ａ）制备转录反应混合物，其中包括变异聚合酶、一种或者多种２’－修饰三磷酸核苷（ＮＴＰｓ）、镁离子、和一种或者多种低核苷酸转录模板；　　　　ｂ）通过在一定条件下转录一种或者多种低核苷酸转录模板，制备单链核酸的候选混合物，由此变异聚合酶将至少一种或者多种核苷酸嵌入所述候选混合物的每一种核酸，其中所述候选混合物的每种核酸包括选自２’－位置修饰嘧啶与２’－位置修饰嘌呤的２’－修饰核苷酸；　　　　ｃ）将候选混合物与所述的靶分子相接触；　　　　ｄ）从剩余的候选混合物分离出相对于候选混合物与靶分子亲合性增强的核酸；　　　　ｅ）在生命体外扩增亲合性增强的核酸，产生富含配体的核酸混合物，由此识别出靶分子的核酸配体。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及核酸领域，更具体地讲，本专利技术涉及适体、以及筛选嵌入修饰核苷酸适体的方法。本专利技术还涉及酶促生成含有修饰核苷酸的随机低核苷酸库的材料与方法，例如从上述库中筛选出对应特定靶的适体。
技术介绍
适体是通过相互作用而不是经典的沃森-克里克碱基配对、对于分子具有特异性结合亲合性的核酸分子。适体，如噬菌体展示或者单克隆抗体(MAbs)生成的胎，能够特异性结合选择靶，并且通过结合阻止靶自身作用的发挥。采用从随机序列低核苷酸库中(附图说明图1)生命体外筛选方法，已经生成了对应超过100种蛋白的适体，其中包括生长因子、转录因子、酶、免疫球蛋白、和受体。常规的适体尺寸在10-15KDa(30-45个核苷酸)，利用亚纳摩尔亲合性结合靶，并排斥相近的靶(例如，通常不与相同基因族的其它蛋白结合)。一系列的结构研究显示，适体可以利用在抗体-抗原复合体中产生亲合性与特异性的相同类型结合的相互作用(氢键结合、静电互补、疏水性连接、空间排斥等)。作为治疗剂(和诊断剂)使用时，适体具有许多令人满意的特性，其中包括强特异性与亲合性，生物学效能、和优秀的药物方法制备适体，允许迅速生成初始(治疗)前导物本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：安东尼·克费，查尔斯·威尔逊，波拉·伯梅斯特，萨拉切斯沃思·克内，
申请(专利权)人：阿切埃米克斯有限公司，
类型：发明
国别省市：