一种分子信标探针法检测人类MTHFR基因多态性的试剂盒、方法及其应用技术

本发明专利技术提供了一种采用分子信标探针法检测人类MTHFR基因多态性的引物，包含以下核酸序列：扩增MTHFR基因rs1801133(c.677C>T)多态性位点的引物对和检测用的探针。本发明专利技术还公开了上述引物和探针在检测扩增MTHFR基因多态性的试剂盒、方法及其应用。本发明专利技术可以快速检测MTHFR基因rs1801133多态性，结果准确，易于判读。与测序法相比，该方法不需要对PCR产物进行一系列复杂的后续处理，PCR扩增和检测同步进行，整个检测过程无需开盖操作，降低了PCR产物造成污染的风险，大大缩短了检测时间，降低了检测成本。

A kit, method and application of a molecular beacon probe for detecting the polymorphism of human MTHFR gene

The invention provides a primer for detecting the polymorphism of human MTHFR gene by using the molecular beacon probe. It contains the following nucleotide sequences: primer pairs for amplification of MTHFR gene rs1801133 (c.677C>, T) polymorphic loci and probes for detection. The invention also discloses a kit, method and application of the primers and probes in detecting the polymorphism of MTHFR gene. The invention can quickly detect the polymorphism of the MTHFR gene rs1801133, and the result is accurate and easy to read. Compared with the sequencing method, this method does not require a complex series of subsequent processing of PCR products, PCR amplification and detection of synchronization, the whole detection process without opening the cap, reducing the risk of PCR product pollution, shorten testing time, reduce the detection cost.

【技术实现步骤摘要】
一种分子信标探针法检测人类MTHFR基因多态性的试剂盒、方法及其应用
本专利技术属于基因检测
，具体涉及一种分子信标检测人类MTHFR基因多态性的试剂盒、方法及其应用。
技术介绍
MTHFR基因是亚甲基四氢叶酸还原酶蛋白编码基因，是叶酸代谢与甲硫氨酸代谢中的关键酶。MTHFR蛋白可以使5,10-亚甲基四氢叶酸还原为5-甲基四氢叶酸，从而作为甲基的间接供体参与体内嘌呤、嘧啶的合成及DNA、RNA、蛋白质的甲基化，同时维持体内正常的同型半胱氨酸水平。正常的MTHFR活性才能维持叶酸甲硫氨酸循环的有效性，保证DNA的合成和甲基化的正常进行。若MTHFR酶活性发生变化，则导致5-甲基四氢叶酸生成障碍，引起DNA合成和甲基化异常、高同型半胱氨酸血症而导致多种遗传性疾病的发生。研究发现，MTHFR677位点的多态性是影响该酶活性的一个重要因素，导致酶活性和热稳定性下降。MTHFRC677T是一个常见的不耐热错义突变，其第677号密码子中的胞嘧啶(C)被胸腺嘧啶(T)代替。若以个体携带677CC基因型时其MTHFR活性为100％，携带CT基因型的活性则为CC的71％，基因型为TT型的只有34本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分子信标探针法检测人类MTHFR基因多态性的引物，其特征在于，包括如下核酸序列：(1)扩增MTHFR基因rs1801133多态性位点的引物对，其核苷酸序列如SEQ ID NO.：1和SEQ ID NO.：2所示；(2)用于检测MTHFR基因rs1801133多态性位点的探针序列，其核苷酸序列如SEQ ID NO.：3所示，其中探针的5末端标记FAM，3末端标记DABSYL。上述引物对和荧光探针对在一次检测中共同使用。

【技术特征摘要】
1.一种分子信标探针法检测人类MTHFR基因多态性的引物，其特征在于，包括如下核酸序列：(1)扩增MTHFR基因rs1801133多态性位点的引物对，其核苷酸序列如SEQIDNO.：1和SEQIDNO.：2所示；(2)用于检测MTHFR基因rs1801133多态性位点的探针序列，其核苷酸序列如SEQIDNO.：3所示，其中探针的5末端标记FAM，3末端标记DABSYL。上述引物对和荧光探针对在一次检测中共同使用。2.一种分子信标探针法检测人类MTHFR基因多态性的引物在检测MTHFR基因多态性中的应用。3.一种分子信标探针法用于检测人类MTHFR基因多态性的试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括权利要求1所述的引物和探针，以及2xPCR反应混合液，阳性标准品。4.一种分子信标探针法用于检测人类MTHFR基因多态性的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)提取人外周血基因组DNA；(2)分别以提取的人外周血基因...

【专利技术属性】
技术研发人员：任绪义，张锋，曹子豪，
申请(专利权)人：北京迪安医学检验实验室有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11