一种新的二萜化合物及其制备方法和医药用途技术

本发明专利技术公开了一种新的二萜化合物及其制备方法和医药用途，提供了该化合物结构，含其的药物组合物及其制备方法和应用。该化合物为首次报道，是一种结构新颖的二萜类化合物，可以从补骨脂干燥的成熟果实中提取、分离纯化得到。体外试验证明该化合物预处理能够减轻人肝细胞缺血再灌注损伤，起到肝细胞保护作用，可以用来开发成保护肝脏的药物。

A new two terpenoid compound and its preparation and pharmaceutical use

The invention discloses a new two terpene compound, a preparation method and a pharmaceutical application, and provides the structure of the compound, the pharmaceutical composition containing it, and the preparation method and application thereof. The compound is first reported, a novel two terpenoid compound, which can be extracted and purified from the mature fruit of psoralen. In vitro experiments proved that pretreatment of the compound could reduce the ischemia-reperfusion injury of human hepatocytes and protect hepatocytes, and it could be used as a drug to protect the liver.

【技术实现步骤摘要】
一种新的二萜化合物及其制备方法和医药用途
本专利技术属于药物
，具体涉及从补骨脂干燥成熟果实中分离得到的一种具有肝脏保护作用的二萜化合物及其制备方法。
技术介绍
补骨脂为豆科植物补骨脂PsoraleacorylifoliaL.的干燥成熟果实，始载于《雷公炮灸论》，具有补肾助阳、纳气、止泻的功效。历代中医用于肾虚、冷泻、遗滑精、小便频数、腰膝冷痛；外治用于皮肤病、白癜风等。补骨脂临床应用广泛，2010年版《中华人民共和国药典》收录含补骨脂的中成药有20余种。补骨脂化学化成分的研究最早见于1910年。自1933年从补骨脂中分离得到第一个纯品补骨脂(Psoralen)，至今已分离鉴定了四十余种成分。近年来，又从中分得许多新的香豆素、黄酮及其他成分。目前，国内外学者对其化学成分研究较多，主要成分为香豆素类，黄酮类和二萜类化合物。(1)香豆素类：有呋喃香豆素如补骨脂素(Psoralen)和异补骨脂素(Isopsoralen)。拟雌内酯类如补骨脂定(Psoralidin)和双轻异补骨脂定(Eorylidin)。(2)黄酮类化合物，如查尔酮类：补骨脂甲素(Ocrylioflni)和补骨脂乙素(Eorylioflinin)。二氢黄酮类：补骨脂二氢黄酮(Bavaehin)、补骨脂二氢甲醚(Bavaehinin)和异补骨脂二氢黄酮(Isobavaehin)。异黄酮类：补骨脂异黄酮(Eorylin)和补骨脂醇黄酮体化合物。(3)单萜酚类：补骨脂酚(Bakuehiol)。(4)二萜类。(5)其它类成分有豆甾醇、β-谷甾醇葡萄糖苷、三十烷、葡萄糖、棉子糖、对轻基苯甲酸、树酯、结构未定的补骨脂醛、两种葡萄糖苷等三十余种物质。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种从补骨脂干燥成熟果实中分离得到的一种具有肝脏保护作用的二萜化合物及其制备方法。本专利技术的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：具有下述结构式的化合物(Ⅰ)，所述的化合物(Ⅰ)的制备方法，包含以下操作步骤：(a)补骨脂干燥的成熟果实粉碎，用85％乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(b)步骤(a)中乙酸乙酯萃取物用大孔树脂除杂，依次用15％乙醇和75％乙醇洗脱，收集75％乙醇洗脱液，减压浓缩得75％乙醇洗脱物浸膏；(c)步骤(b)中75％乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为80:1、50:1、30:1、15:1和1:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到5个组分；(d)步骤(c)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为20:1、12:1和5:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；(e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为70％的甲醇水溶液等度洗脱，收集8-10个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物(Ⅰ)。进一步地，所述大孔树脂为AB-8型大孔吸附树脂。药物组合物，其中含有治疗有效量的所述的化合物(Ⅰ)和药学上可接受的载体。所述的化合物(Ⅰ)在制备肝脏保护的药物中的应用。所述的药物组合物在制备肝脏保护的药物中的应用。本专利技术化合物用作药物时，可以直接使用，或者以药物组合物的形式使用。该药物组合物含有治疗有效量的本专利技术化合物(Ⅰ)，其余为药物学上可接受的、对人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料以及药物制品辅剂。将本专利技术的药物组合物以单位体重服用量的形式使用。本专利技术药物可通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等；用于注射时，可制成灭菌的水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。说明书附图图1为化合物(Ⅰ)结构式；图2为化合物(Ⅰ)理论ECD值与实验ECD值比较；图3为化合物(Ⅰ)二维NOESY谱。具体实施方式下面结合实施例进一步说明本专利技术的实质性内容，但并不以此限定本专利技术保护范围。尽管参照较佳实施例对本专利技术作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本专利技术的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本专利技术技术方案的实质和范围。实施例1：化合物(Ⅰ)分离制备及结构确证试剂来源：乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷为分析纯，购自上海凌峰化学试剂有限公司，甲醇，分析纯，购自江苏汉邦化学试剂有限公司。制备方法：(a)补骨脂干燥的成熟果实(8kg)粉碎，用85％乙醇热回流提取(25L×3次)，合并提取液，浓缩至无醇味(6L)，依次用石油醚(6L×3次)、乙酸乙酯(6L×3次)和水饱和的正丁醇(6L×3次)萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物(355g)和正丁醇萃取物；(b)步骤(a)中乙酸乙酯萃取物用AB-8型大孔树脂除杂，依次用15％乙醇(8L)和75％(12L)乙醇洗脱，收集75％乙醇洗脱液，减压浓缩得75％乙醇洗脱物浸膏(136g)；(c)步骤(b)中75％乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为80:1(8个柱体积)、50:1(8个柱体积)、30:1(6个柱体积)、15:1(8个柱体积)和1:1(5个柱体积)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到5个组分；(d)步骤(c)中组分4(31g)用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为20:1(8个柱体积)、12:1(10个柱体积)和5:1(6个柱体积)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；(e)步骤(d)中组分2(11g)用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为70％的甲醇水溶液等度洗脱，收集8-10个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物(Ⅰ)(23mg)。结构确证：白色粉末，易溶于氯仿、乙酸乙酯、丙酮和甲醇；HR-ESIMS显示[M+Na]+为m/z377.1042，结合核磁特征可得分子式为C20H18O6，不饱和度为12。核磁共振氢谱数据δH(ppm,CDCl3,400MHz)：H-1(2.92，d，J＝11.8)，H-1(1.86，dd，J＝1.5,11.8),H-3(3.75，d，J＝11.0)，H-5(2.24，dd，J＝1.3,5.8)，H-6(5.17)，H-7(4.05，dd，J＝9.9,17.4)，H-7(2.98，dd,J＝4.8,17.4)，H-11(6.52，s)，H-15(6.84，d,J＝2.2)，H-16(7.52，d,J＝2.2)，H-18(1.60，s)，H-20(4.25，dd,J＝1.5,9.0)，H-20(3.76，dd,J＝1.5,9.0)，OMe(3.91，s)；核磁共振碳谱数据δC(ppm,CDCl3,100MHz)：40.3(CH2，1-C)，103.9(C，2-C)，81.3(CH，3-C)，44.2(C，4-C)，54.5(CH，5-C)，74.7(CH，6-C)，24.7(CH2，7-C)，109.2(C，8-C)，133.8(CH，9-C)，48.0(C，10-C)，98.7(CH，11-C)，152.5(C，12-C)，117.0(C，13-C)，154.1(C，14-C)，143.9(CH，16-C)，22.7(CH3，18-C)，18本文档来自技高网...

【技术保护点】
具有下述结构式的化合物(Ⅰ)，

【技术特征摘要】
1.具有下述结构式的化合物(Ⅰ)，2.权利要求1所述的化合物(Ⅰ)的制备方法，其特征在于包含以下操作步骤：(a)补骨脂干燥的成熟果实粉碎，用85％乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(b)步骤(a)中乙酸乙酯萃取物用大孔树脂除杂，依次用15％乙醇和75％乙醇洗脱，收集75％乙醇洗脱液，减压浓缩得75％乙醇洗脱物浸膏；(c)步骤(b)中75％乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为80:1、50:1、30:1、15:1和1:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到5个组分；(d)...

【专利技术属性】
技术研发人员：钟雪萍，
申请(专利权)人：成都宝科生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：四川,51