虾类抗菌肽基因在益生菌中的重组表达和应用制造技术

技术编号:1738984 阅读:287 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术的提供了虾类抗菌肽在益生菌中的重组表达及应用,包括虾类抗菌肽基因的克隆,虾类抗菌肽基因的重组载体的构建,抗菌肽基因重组载体的转化与筛选,发酵培养表达抗菌肽的工程菌,表达产物的鉴定、纯化。本发明专利技术还提供了重组有上述虾类抗菌肽基因的益生菌的应用,用于水产养殖的饲料,优选为虾用饲料。重组益生菌可以在机体内不断繁殖,在一定时期内持续表达并提供给机体抗菌肽,具有很好的特异性和有效性。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
虾类抗菌肽在益生菌中的重组表达,包括虾类抗菌肽基因的克隆,虾类抗菌肽基因的重组载体的构建,抗菌肽基因重组载体的转化与筛选,发酵培养表达抗菌肽的工程菌,表达产物的鉴定、纯化;其中:所述的重组载体的构建是:根据已克隆到的虾类抗菌肽cDNA序列,利用特异引物在其两端加入两个不同的限制性内切酶的酶切位点,PCR扩增抗菌肽基因;将其克隆到益生菌表达载体上,所述的表达载体包括pPIC系列或pLA系列;所述的转化与筛选是将上述构建得到的载体分别转化获得工程菌株,筛选出所需的重组工程菌;所述的表达产物的鉴定、纯化是采用诱导剂诱导工程菌株,破细胞收集上清液,分泌型表达的细胞直接收集上清液,采用超滤、层析等方法纯化抗菌肽,并测定其抗菌谱。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:范立强江帆袁勤生
申请(专利权)人:上海汉德食品有限公司
类型:发明
国别省市:31[中国|上海]

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