一种小鹅瘟病毒、番鸭细小病毒二联卵黄抗体的制备方法技术

本发明专利技术提供了一种小鹅瘟病毒、番鸭细小病毒二联卵黄抗体的制备方法，该技术方案首先利用由小鹅瘟病毒GPV‑HB株所制备的灭活疫苗和市售的小鹅瘟病毒活疫苗共同作为小鹅瘟病毒抗原，利用番鸭细小病毒MDPV‑FJ株所制备的灭活疫苗单独作为番鸭细小病毒抗原，免疫共分三次，小鹅瘟活疫苗和自制小鹅瘟灭活苗基础免疫一次，强化免疫两次，每次间隔三周，每次每种疫苗免疫1ml/只；番鸭细小病毒病免疫次数及间隔同上，但较小鹅瘟免疫时间推迟一周，免疫剂量为1ml/只。通过以上抗原及免疫手段，能使高免蛋中两种抗体的效价均达到较高水平。利用本发明专利技术所制备的卵黄抗体可对小鹅瘟和番鸭细小病毒病实现同时防治，而且具有极高的保护率。

【技术实现步骤摘要】
一种小鹅瘟病毒、番鸭细小病毒二联卵黄抗体的制备方法
本专利技术涉及禽用生物制品
，进一步涉及卵黄抗体制备技术，具体涉及一种小鹅瘟病毒、番鸭细小病毒二联卵黄抗体的制备方法。
技术介绍
小鹅瘟(Goslingplague)是由小鹅瘟病毒(Goslingplaguevirus,GPV)，也称为鹅细小病毒引起的雏鹅急性或亚急性的败血性传染病。本病主要侵害4～20日龄的易感雏鹅，具有传播快、发病率高和致死率高的特点。随着雏鹅日龄增长，其发病率和致死率下降。比较研究发现，国内不同地区分离株、国内与国外分离株间同源性均较高，无论是结构蛋白还是非结构蛋白，VP3基因核苷酸一致性95％以上；编码基因核苷酸序列一致性均达到92％以上。雏番鸭细小病毒病是由雏番鸭细小病毒(Muscovyduckparvovirus，MDPV)引起的雏番鸭以喘气、腹泻、脚发软及进行性消瘦为主要症状的一种急性、败血性传染病，其特点是传染性强和死亡率高。该病主要发生于3周龄以内的雏番鸭，因此又称雏番鸭“三周病”；发病率和死亡率可达40％以上，是目前番鸭饲养业中危害最严重的传染病之一，严重影响养鸭业的发展。雏番鸭是惟一自然感本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种小鹅瘟病毒、番鸭细小病毒二联卵黄抗体的制备方法，其特征在于包括以下步骤：1)取小鹅瘟病毒GPV‑HB株，制备得到小鹅瘟灭活疫苗；取番鸭细小病毒MDPV‑FJ株，制备得到番鸭细小病毒灭活疫苗；购买市售小鹅瘟活疫苗待用；2)取蛋鸡，分别注射所述小鹅瘟灭活疫苗和小鹅瘟活疫苗进行小鹅瘟疫苗的基础免疫，一周后注射所述番鸭细小病毒灭活疫苗进行番鸭细小病毒疫苗的基础免疫，两周后分别注射所述小鹅瘟灭活疫苗和小鹅瘟活疫苗进行小鹅瘟疫苗的首次强化免疫，一周后注射所述番鸭细小病毒灭活疫苗进行番鸭细小病毒疫苗的首次强化免疫，两周后分别注射所述小鹅瘟灭活疫苗和小鹅瘟活疫苗进行小鹅瘟疫苗的二次强化免疫，一周后注射所述...

【技术特征摘要】
1.一种小鹅瘟病毒、番鸭细小病毒二联卵黄抗体的制备方法，其特征在于包括以下步骤：1)取小鹅瘟病毒GPV-HB株，制备得到小鹅瘟灭活疫苗；取番鸭细小病毒MDPV-FJ株，制备得到番鸭细小病毒灭活疫苗；购买市售小鹅瘟活疫苗待用；2)取蛋鸡，分别注射所述小鹅瘟灭活疫苗和小鹅瘟活疫苗进行小鹅瘟疫苗的基础免疫，一周后注射所述番鸭细小病毒灭活疫苗进行番鸭细小病毒疫苗的基础免疫，两周后分别注射所述小鹅瘟灭活疫苗和小鹅瘟活疫苗进行小鹅瘟疫苗的首次强化免疫，一周后注射所述番鸭细小病毒灭活疫苗进行番鸭细小病毒疫苗的首次强化免疫，两周后分别注射所述小鹅瘟灭活疫苗和小鹅瘟活疫苗进行小鹅瘟疫苗的二次强化免疫，一周后注射所述番鸭细小病毒灭活疫苗进行番鸭细小病毒疫苗的二次强化免疫；上述注射行为的剂量均为1mL/只；3)当小鹅瘟病毒和番鸭细小病毒抗体琼扩效价均≥1:64时，收集高免蛋，浸入1％(v/v)的新洁尔灭溶液中浸泡10～15min，晾干，分离并收集卵黄，破碎得到卵黄匀浆，向其中加入4倍于卵黄匀浆体积的醋酸盐缓冲液，搅拌60min，过滤，向滤液中加入终浓度为2～4％(v/v)的辛酸，继续搅拌60min，过滤至滤液澄清，收集滤液，过滤除菌，即得到所述小鹅瘟病毒、番鸭细小病毒二联卵黄抗体。2.根据权利要求1所述的一种小鹅瘟病毒、番鸭细小病毒二联卵黄抗体的制备方法，其特征在于步骤3)中小鹅瘟病毒抗体琼扩效价＜1:64或番鸭细小病毒抗体琼扩效价＜1:64，此时先执行以下步骤再收集高免蛋：再次注射小鹅瘟...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘冠星，杨燚，付旭彬，郁宏伟，梁武，李守军，
申请(专利权)人：天津瑞普生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：天津,12