一种三联卵黄抗体口服液的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种三联卵黄抗体口服液的制备方法，包括以下按照体积比的原料：卵黄抗体全蛋水溶液95‑105，辛酸0.2‑0.3，甲醛0.2‑0.3，硫柳汞0.01‑0.02。本发明专利技术通过对高免蛋卵黄提取、水稀释处理、辛酸处理后得到澄清的卵黄抗体制剂。水稀释－辛酸法适用于大型的卵黄抗体生产，并且可以很大程度上保证卵黄抗体的生物活性，对于新城疫、传染性支气管炎、禽流感（H9）特异性强，易于市场推广。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于抗体药物领域，特别是涉及一种新城疫、传染性支气管炎、禽流感（H9）三联卵黄抗体口服液的制备方法。
技术介绍
新城疫（Newcastledisease，ND）是由新城疫病毒（NewcastlediseaseVirus，NDV）引起的一种以呼吸道、消化道和神经系统损伤为主要特征的急性、热性、高度接触性传染病，呈全球性流行，可导致15日龄内雏鹅群100%发病和死亡，被国际动物卫生组织（OIE）列为A类传染病，严重危害世界各国的养殖业发展。近年来随着新城疫疫苗的广泛应用，新城疫的疫情得到一定的控制，但是伴随而来的是流行趋势的变化，主要表现为非典型性ND、新基因型出现、致病性宿主范围扩大等。禽流感(Avianinfluenza,AI)是由正粘病毒科正粘病毒属A型流感病毒(AIV)引起的禽类的一种感染综合征。家禽和野禽均可感染,部分哺乳动物也可感染，病禽可表现为严重的呼吸道症状、产蛋下降、多系统综合症、死亡或隐性感染等多种病型。禽流感的感染有近140年的历史，1878年，意大利爆发了全世界第一次高致病性禽流感，在此之后，许多国家和地区都曾先后报道禽流感的爆发和流行。根据禽流感病毒致病性的差异，可将禽流感病毒分为高致病性禽流感病毒（HPAIVs）和低致病性禽流感病毒。高致病性禽流感被世界动物卫生组织(OIE)和我国列为A类传染病，而低致病性禽流感既不是A类疫病，也不是B类疫病。高致病性禽流感一旦发生会造成家禽的大批死亡,甚至能够感染人，引起人的死亡，所以各国政府高度重视高致病性禽流感,采取了各种措施严密监控高致病性禽流感的发生和流行。而LPAIVs危害程度相对较轻，在某种程度上Ｈ９亚型低致病性禽流感往往被忽视。鸡传染性支气管炎(infectionbronchitis,IB)是由传染性支气管炎病毒引起的一种急性高度接触性呼吸道疾病。鸡是该病的惟一自然宿主。临床症状表现为气管啰音、咳嗽、打喷嚏,幼鸡流鼻涕,产蛋鸡产蛋量和质量下降。该病的高度传染性和病原的多血清型性,使免疫预防复杂化并费用增加。感染鸡生长受阻、饲料消耗增加、产蛋量和蛋的质量下降、死淘率增加,常并发感染产生气囊炎,导致肉鸡在加工过程中被废弃,因此该病常给养鸡业造成巨大的经济损失。目前该病是危害养鸡业的几种主要鸡病之一。新城疫－传染性支气管炎－禽流感（H9）是养禽业的大敌。目前应用于防止新城疫、传染性支气管炎、禽流感（H9）的抗感染药品有抗生素、化学合成药品、中药及其制剂、卵黄抗体和其他抗感染生物制剂。
技术实现思路
本专利技术的目的，提供一种适于生产的新城疫、传染性支气管炎、禽流感（H9）三联卵黄抗体口服液的制备方法，该制备方法简单，能够最大程度保留抗体活性。本专利技术的技术方案是：一种三联卵黄抗体口服液的制备方法，步骤如下：（1）选取无特定病原体蛋鸡在洁净养殖场隔离饲养，对蛋鸡进行3次免疫，每次给每只鸡注射新城疫、传染性支气管炎、禽流感（H9）三联疫苗注射剂量分别为0.5ml、1.5ml、2.0ml，每次间隔15天；（2）完成第3次免疫21天后，收集鸡蛋，对卵黄中的卵黄抗体进行免疫学检测，新城疫、禽流感（H9）的卵黄抗体血凝抑制效价达到1:512以上、同时传染性支气管炎病毒的卵黄抗体琼脂扩散效价达到1:32以上的鸡蛋为新城疫、传染性支气管炎、禽流感（H9）病毒高免鸡蛋，收集贮存在16℃条件下备用；（3）使用0.1-0.2%新洁尔灭对高免蛋进行消毒，晾干后打碎鸡蛋，取出卵黄，加入卵黄重量10倍的无菌去离子水，并调整pH值至6.00，搅拌5分钟，在4℃条件下，静置24小时，过滤取上清液，备用；（4）在室温条件下，向上清液中加入辛酸，搅拌30分钟，静置6小时，依次通过1.0mm、0.45mm、0.22mm的滤膜进行过滤；然后加入甲醛、硫柳汞，使卵黄抗体的水溶液：辛酸：甲醛：硫柳汞的体积比为（95-105）:（0.2-0.3）:（0.2-0.3）:（0.02-0.03），分装，保存，即得。本专利技术的优良效果还表现在：本专利技术通过对高免蛋卵黄提取、水稀释处理、辛酸处理后得到澄清的卵黄抗体制剂。水稀释－辛酸法适用于大型的卵黄抗体生产，并且可以很大程度上保证卵黄抗体的生物活性，对于新城疫、传染性支气管炎、禽流感（H9）特异性强，易于市场推广。具体实施方式下面结合实施例和实验例详细说明本专利技术的技术方案，但保护范围不限于此。实施例1：一种三联卵黄抗体口服液的制备方法，步骤如下：（1）选取无特定病原体蛋鸡在洁净养殖场隔离饲养，对蛋鸡进行3次免疫，每次给每只鸡注射新城疫、传染性支气管炎、禽流感（H9）三联疫苗注射剂量分别为0.5ml、1.5ml、2.0ml，每次间隔15天；（2）完成第3次免疫21天后，收集鸡蛋，对卵黄中的卵黄抗体进行免疫学检测，新城疫、禽流感（H9）的卵黄抗体血凝抑制效价达到1:512以上、同时传染性支气管炎病毒的卵黄抗体琼脂扩散效价达到1:32以上的鸡蛋为新城疫、传染性支气管炎、禽流感（H9）病毒高免鸡蛋，收集贮存在16℃条件下备用；（3）使用0.1-0.2%新洁尔灭对高免蛋进行消毒，晾干后打碎鸡蛋，取出卵黄，加入卵黄重量10倍的无菌去离子水，并调整pH值至6.00，搅拌5分钟，在4℃条件下，静置24小时，过滤取上清液，备用；（4）在室温条件下，向上清液中加入辛酸，搅拌30分钟，静置6小时，依次通过1.0mm、0.45mm、0.22mm的滤膜进行过滤；然后加入甲醛、硫柳汞，使卵黄抗体的水溶液：辛酸：甲醛：硫柳汞的体积比为95:0.2:0.2:0.02，分装，保存，即得。实施例2：一种三联卵黄抗体口服液的制备方法，步骤如下：（1）选取无特定病原体蛋鸡在洁净养殖场隔离饲养，对蛋鸡进行3次免疫，每次给每只鸡注射新城疫、传染性支气管炎、禽流感（H9）三联疫苗注射剂量分别为0.5ml、1.5ml、2.0ml，每次间隔15天；（2）完成第3次免疫21天后，收集鸡蛋，对卵黄中的卵黄抗体进行免疫学检测，新城疫、禽流感（H9）的卵黄抗体血凝抑制效价达到1:512以上、同时传染性支气管炎病毒的卵黄抗体琼脂扩散效价达到1:32以上的鸡蛋为新城疫、传染性支气管炎、禽流感（H9）病毒高免鸡蛋，收集贮存在16℃条件下备用；（3）使用0.1-0.2%新洁尔灭对高免蛋进行消毒，晾干后打碎鸡蛋，取出卵黄，加入卵黄重量10倍的无菌去离子水，并调整pH值至6.00，搅拌5分钟，在4℃条件下，静置24小时，过滤取上清液，备用；（4）在室温条件下，向上清液中加入辛酸，搅拌30分钟，静置6小时，依次通过1.0mm、0.45mm、0.22mm的滤膜进行过滤；然后加入甲醛、硫柳汞，使卵黄抗体的水溶液：辛酸：甲醛：硫柳汞的体积比为100:0.2:0.2:0.02，分装，保存，即得。实施例3：一种三联卵黄抗体口服液的制备方法，步骤如下：（1）选取无特定病原体蛋鸡在洁净养殖场隔离饲养，对蛋鸡进行3次免疫，每次给每只鸡注射新城疫、传染性支气管炎、禽流感（H9）三联疫苗注射剂量分别为0.5ml、1.5ml、2.0ml，每次间隔15天；（2）完成第3次免疫21天后，收集鸡蛋，对卵黄中的卵黄抗体进行免疫学检测，新城疫、禽流感（H9）的卵黄抗体血凝抑制效价达到1:512以上、同时传染性支气管炎病毒的卵黄抗体琼本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种三联卵黄抗体口服液的制备方法，其特征是，步骤如下：（1）选取无特定病原体蛋鸡在洁净养殖场隔离饲养，对蛋鸡进行3次免疫，每次给每只鸡注射新城疫、传染性支气管炎、禽流感（H9）三联疫苗注射剂量分别为0.5ml、1.5ml、2.0ml，每次间隔15天；（2）完成第3次免疫21天后，收集鸡蛋，对卵黄中的卵黄抗体进行免疫学检测，新城疫、禽流感（H9）的卵黄抗体血凝抑制效价达到1:512以上、同时传染性支气管炎病毒的卵黄抗体琼脂扩散效价达到1:32以上的鸡蛋为新城疫、传染性支气管炎、禽流感（H9）病毒高免鸡蛋，收集贮存在16℃条件下备用；（3）使用0.1‑0.2%新洁尔灭对高免蛋进行消毒，晾干后打碎鸡蛋，取出卵黄，加入卵黄重量10倍的无菌去离子水，并调整pH值至6.00，搅拌5分钟，在4℃条件下，静置24小时，过滤取上清液，备用；（4）在室温条件下，向上清液中加入辛酸，搅拌30分钟，静置6小时，依次通过1.0mm、0.45mm、0.22mm的滤膜进行过滤；然后加入甲醛、硫柳汞，使卵黄抗体的水溶液：辛酸：甲醛：硫柳汞的体积比为（95‑105）:（0.2‑0.3）:（0.2‑0.3）:（0.02‑0.03），分装，保存，即得。...

【技术特征摘要】
1.一种三联卵黄抗体口服液的制备方法，其特征是，步骤如下：（1）选取无特定病原体蛋鸡在洁净养殖场隔离饲养，对蛋鸡进行3次免疫，每次给每只鸡注射新城疫、传染性支气管炎、禽流感（H9）三联疫苗注射剂量分别为0.5ml、1.5ml、2.0ml，每次间隔15天；（2）完成第3次免疫21天后，收集鸡蛋，对卵黄中的卵黄抗体进行免疫学检测，新城疫、禽流感（H9）的卵黄抗体血凝抑制效价达到1:512以上、同时传染性支气管炎病毒的卵黄抗体琼脂扩散效价达到1:32以上的鸡蛋为新城疫、传染性支气管炎、禽流感（H9）病毒高免鸡蛋，收集...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵立媛，王浩，赵丹丹，杜新永，刘军伟，刘长太，
申请(专利权)人：青岛润达生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37