用于诊断和治疗肿瘤的病毒样颗粒缀合物制造技术

本公开内容涉及使用与光敏分子缀合的病毒样颗粒来诊断和/或治疗肿瘤(例如眼肿瘤)的方法和组合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】相关申请本申请依据35U.S.C.§119(e)要求于2013年9月18日提交的美国临时申请号61/879,627的权益，其通过引用整体并入本文。
本公开内容涉及肿瘤诊断和治疗的领域。
技术介绍
尽管有许多治疗可用于癌症，但是很多形式的癌症仍无法治愈、不可治疗或者变得对标准治疗具有抗性并且用于很多癌症的有效治疗具有不期望的副作用。眼癌(ocular cancer)(例如眼黑素瘤和成视网膜细胞瘤)的治疗特别具有挑战性。诊断为患有眼黑素瘤的患者根据肿瘤大小具有很少治疗选择，包括：(1)外科手术，例如切除术(resection)、摘出术(enucleation)或摘除术(exenteration)，其全部是高度侵入性的并且主要涉及移除眼和视神经部分(在外科手术后，患者通常安装人工眼)；和(2)斑块近程治疗(plaque brachytherapy)，其为一种放射治疗，其中将用放射性粒子(radioactive seed)覆盖一侧的薄金属(例如，金)片缝合到眼的外壁上且所述粒子以肿瘤为目标。在治疗结束时，将该薄金属片移除，所述治疗通常持续数天。放射性相关的严重并发症包括：最常见的白内障形成，继之为玻璃体出血。其他的并发症包括干眼、角膜炎、放射诱发性虹膜新血管形成(radiation-induced iris neovascularization)、新生血管性青光眼、放射诱发性视网膜病、放射诱发性视神经病变、巩膜外沉积(episcleral deposit)、巩膜坏死和/或眼外肌改变。已报道，在用斑块近程治疗进行治疗的10％至63％的患者中发生放射性视网膜病，并且从治疗到发生黄斑病变的平均时间为约25.6个月。专利技术概述本公开内容至少部分地提供了用于检测和/或选择性地靶向肿瘤细胞(例如用于诊断和/或治疗癌症(例如，眼癌))的方法和组合物。在一些情况下，本文中提供的方法和组合物可用于选择性地杀伤癌性肿瘤细胞而不损伤健康细胞。例如，可选择性地向肿瘤细胞递送包含光敏分子(例如，与光敏分子缀合)的病毒样纳米颗粒，并通过暴露于光来对其进行光活化。当光活化时，光敏分子吸收光子，并且所吸收的能量导致引起毒性(例如，细胞毒性)的分子改变。“光敏病毒样纳米颗粒”(在本文中还称为“光敏病毒样颗粒”)指与光敏分子缀合的病毒样纳米颗粒。令人惊奇的是，光敏分子与病毒样纳米颗粒的缀合不干扰该纳米颗粒的组织/肿瘤向性(tropism)(例如，病毒样纳米颗粒对特定宿主肿瘤组织或肿瘤细胞的特异性)。本公开内容的病毒样纳米颗粒(还称为病毒样颗粒(virus-like particle，VLP))一般由L1衣壳蛋白或L1和L2衣壳蛋白的组合装配，并且在一些实施方案中，所述光敏分子与形成病毒样纳米颗粒的衣壳蛋白缀合。因此，本公开内容的多个方面提供了靶向肿瘤的病毒样纳米颗粒，其包含与衣壳蛋白缀合的光敏分子。本公开内容的一些方面还提供了靶向肿瘤的病毒样颗粒，其每个颗粒包含约50至约500、约50至约600、约50至约700、约50至约800、约50至约900或约50至约1000个光敏分子。在一些实施方案中，靶向肿瘤的病毒样颗粒每个颗粒包含约400、约500、约600、约700、约800、约900或约1000个光敏分子。在一些实施方案中，靶向肿瘤的病毒样颗粒每个颗粒包含500个光敏分子或1000个光敏分子。在一些实施方案中，所述衣壳蛋白是乳头瘤病毒(papilloma virus)衣壳蛋白。例如，在一些实施方案中，所述乳头瘤病毒衣壳蛋白为非人乳头瘤病毒(non-human papilloma virus)衣壳蛋白，例如牛乳头瘤病毒(bovine papilloma virus)衣壳蛋白。在一些实施方案中，所述病毒样颗粒包含人乳头瘤病毒(human papilloma virus)衣壳蛋白并且不与人乳头瘤病毒(human papilloma virus，HPV)16、HPV 18或对HPV具有特异性的已有(pre-existing)抗体交叉反应。在一些实施方案中，所述病毒样颗粒包含乳头状瘤L1或L1/L2蛋白(例如，人、牛或其他物种)。在一些实施方案中，所述L1或L1/L2 VLP不与针对人乳头瘤病毒(HPV)16、HPV 18的中和性抗体或对其他HPV具有特异性的已有抗体交叉反应。然而，在一些实施方案中，所述病毒样颗粒包含HPV16的人乳头瘤病毒衣壳蛋白。在一些实施方案中，所述光敏分子与衣壳蛋白的表面暴露的肽缀合。在一些实施方案中，所述病毒样颗粒包含L1衣壳蛋白或L1和L2衣壳蛋白的组合。在一些实施方案中，所述病毒样颗粒由L1衣壳蛋白组成。在一些实施方案中，病毒样颗粒包含BPV L1衣壳蛋白(例如，SEQ ID NO：2)，BPV L1和BPV L2衣壳蛋白的组合。在一些实施方案中，病毒样颗粒包含HPV L1衣壳蛋白或HPV L1和HPV L2衣壳蛋白的组合。在一些实施方案中，HPV L1衣壳蛋白是具有经修饰的免疫原性和/或抗原性的变体HPV16/31 L1蛋白(例如，SEQ ID NO：1)。因此，在一些实施方案中，病毒样颗粒包含变体HPV16/31 L1衣壳蛋白或变体HPV16/31 L1衣壳蛋白(例如，SEQ ID NO：1)和HPV L2衣壳蛋白的组合，或者由其组成。在一些实施方案中，病毒样颗粒的衣壳蛋白具有经修饰的免疫原性和/或抗原性。这样的衣壳蛋白的非限制性实例是HPV16/31 L1衣壳蛋白(例如，SEQ ID NO：1)。与野生型病毒样颗粒相比，本文中可将包含经修饰的衣壳蛋白的病毒样颗粒称为包含经修饰免疫原性和/或抗原性的病毒样颗粒。在一些实施方案中，所述光敏分子与衣壳蛋白共价缀合。在一些实施方案中，所述光敏分子与衣壳蛋白的氨基酸缀合。在一些实施方案中，所述光敏分子与衣壳蛋白的氨基酸的胺基团(例如，脂族伯胺)缀合。在一些实施方案中，所述光敏分子与衣壳蛋白的赖氨酸残基的胺基团(例如，赖氨酸的侧链胺)缀合。在一些实施方案中，所述光敏分子与衣壳蛋白的精氨酸和/或组氨酸残基的胺基团缀合。本公开内容提供了用于使光敏分子与赖氨酸以及包含胺基团的其他氨基酸缀合的方法。在一些实施方案中，所述光敏分子不破坏(compromise)(例如，阻止、干扰或抑制)病毒样颗粒与肿瘤细胞表面的结合。在一些实施方案中，所述光敏分子不破坏(例如，阻止、干扰或抑制)病毒样颗粒与肿瘤细胞表面上的硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(heparan sulphate proteoglycan)或其他多糖的结合。在一些实施方案中，所述病毒样颗粒包含约10至约1000个光敏分子。在一些实施方案中，所述病毒样颗粒包含约50至约1000个光敏分子。在一些实施方案中，所述病毒样颗粒包含约100至约1000个光敏分子。在一些实施方案中，所述病毒样颗粒包含约100至约500个光敏分子。在一些实施方案中，所述病毒样颗粒包含约500至约1000个或更多个光敏分子。在一些实施方案中，所述病毒样颗粒包含约10至约1000个光敏分子，所述光敏分子与L1衣壳蛋白、L2衣壳蛋白或L1衣壳蛋白和L2衣壳蛋白之组合的赖氨酸残基或其他氨基酸残基缀合。在一些实施方案中，所述光敏分子通过本文档来自技高网...

【技术保护点】
靶向肿瘤的病毒样颗粒，其包含与衣壳蛋白缀合的光敏分子。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2013.09.18 US 61/879,6271.靶向肿瘤的病毒样颗粒，其包含与衣壳蛋白缀合的光敏分子。2.权利要求1所述的病毒样颗粒，其中所述衣壳蛋白是乳头瘤病毒衣壳蛋白。3.权利要求2所述的病毒样颗粒，其中所述乳头瘤病毒衣壳蛋白为非人乳头瘤病毒衣壳蛋白。4.权利要求3所述的病毒样颗粒，其中所述非人乳头瘤病毒衣壳蛋白是牛乳头瘤病毒衣壳蛋白。5.权利要求2所述的病毒样颗粒，其中所述病毒样颗粒包含人乳头瘤病毒衣壳蛋白并且不与人乳头瘤病毒(HPV)16、HPV 18或对HPV具有特异性的已有抗体交叉反应。6.权利要求1至5中任一项所述的病毒样颗粒，其中所述衣壳蛋白包含L1衣壳蛋白。7.权利要求1至5中任一项所述的病毒样颗粒，其中所述衣壳蛋白包含L1和L2衣壳蛋白的组合。8.权利要求7所述的病毒样颗粒，其中所述衣壳蛋白由L1衣壳蛋白组成。9.权利要求1至8中任一项所述的病毒样颗粒，其中所述病毒样颗粒具有经修饰的免疫原性和/或抗原性。10.权利要求1至9中任一项所述的病毒样颗粒，其中所述光敏分子与所述衣壳蛋白共价缀合。11.权利要求1至10中任一项所述的病毒样颗粒，其中所述光敏分子与所述衣壳蛋白的赖氨酸残基缀合。12.权利要求10或11所述的病毒样颗粒，其中所述光敏分子通过共价酰胺键与所述衣壳蛋白缀合。13.权利要求1至12中任一项所述的病毒样颗粒，其中所述光敏分子不破坏所述病毒样颗粒与肿瘤细胞表面的结合。14.权利要求13所述的病毒样颗粒，其中所述光敏分子不破坏所述病毒样颗粒与肿瘤细胞表面上的硫酸乙酰肝素蛋白聚糖的结合。15.权利要求1至14中任一项所述的病毒样颗粒，其中所述病毒样颗粒包含约10至约1000个光敏分子。16.权利要求15所述的病毒样颗粒，其中所述病毒样颗粒包含约50至约1000个光敏分子。17.权利要求16所述的病毒样颗粒，其中所述病毒样颗粒包含约100至约1000个光敏分子。18.权利要求1至17中任一项所述的病毒样颗粒，其中所述光敏分子包含荧光染料、红外染料、近红外染料、卟啉分子、叶绿素分子或前述任意两种或更多种的组合。19.权利要求1至18中任一项所述的病毒样颗粒，其中所述光敏分子通过红外光、近红外光或紫外光来活化。20.权利要求1至19中任一项所述的病毒样颗粒，其中所述光敏分子选自酞菁染料、维替泊芬分子以及酞菁染料和维替泊芬分子的组合。21.靶向肿瘤的病毒样颗粒，其包含约50至约1000个光敏分子。22.权利要求21所述的病毒样颗粒，其中所述光敏分子与衣壳蛋白缀合，所述衣壳蛋白是乳头瘤病毒衣壳蛋白。23.权利要求22所述的病毒样颗粒，其中所述乳头瘤病毒衣壳蛋白为非人乳头瘤病毒衣壳蛋白。24.权利要求23所述的病毒样颗粒，其中所述非人乳头瘤病毒衣壳蛋白是牛乳头瘤病毒衣壳蛋白。25.权利要求22所述的病毒样颗粒，其中所述病毒样颗粒包含人乳头瘤病毒衣壳蛋白并且不与人乳头瘤病毒(HPV)16、HPV 18或对HPV具有特异性的已有抗体交叉反应。26.权利要求21至25中任一项所述的病毒样颗粒，其中所述光敏分子与所述病毒样颗粒的衣壳蛋白缀合。27.权利要求26所述的病毒样颗粒，其中所述衣壳蛋白包含L1衣壳蛋白。28.权利要求26或27所述的病毒样颗粒，其中所述衣壳蛋白包含L1和L2衣壳蛋白的组合。29.权利要求28所述的病毒样颗粒，其中所述衣壳蛋白由L1衣壳蛋白组成。30.权利要求21至29中任一项所述的病毒样颗粒，其中所述病毒样颗粒具有经修饰的免疫原性和/或抗原性。31.权利要求22至30中任一项所述的病毒样颗粒，其中所述光敏分子与所述衣壳蛋白共价缀合。32.权利要求22至31中任一项所述的病毒样颗粒，其中所述光敏分子与所述衣壳蛋白的赖氨酸残基缀合。33.权利要求31或32所述的病毒样颗粒，其中所述光敏分子通过共价酰胺键与所述衣壳蛋白缀合。34.权利要求21至33中任一项所述的病毒样颗粒，其中所述光敏分子不破坏所述病毒样颗粒与肿瘤细胞表面的结合。35.权利要求34所述的病毒样颗粒，其中所述光敏分子不破坏所述病毒样颗粒与肿瘤细胞表面上的硫酸乙酰肝素蛋白聚糖的结合。36.权利要求21至35中任一项所述的病毒样颗粒，其中所述病毒样颗粒包含约100至约1000个光敏分子。37.权利要求21至36中任一项所述的病毒样颗粒，其中所述光敏分子包含荧光染料、红外染料、近红外染料、卟啉分子、叶绿素分子或前述任意两种或更多种的组合。38.权利要求21至37中任一项所述的病毒样颗粒，其中所述光敏分子通过红外光、近红外光或紫外光来活化。39.权利要求21至38中任一项所述的病毒样颗粒，其中所述光敏分子选自酞菁染料、维替泊芬分子以及酞菁染料和维替泊芬分子的组合。40.包括以下的方法：向患有肿瘤的对象施用权利要求1至39中任一项所述的病毒样...

【专利技术属性】
技术研发人员：伊丽莎白·德洛斯皮诺斯，约翰·T·席勒，罗达·C·基尼斯，约翰·麦克杜格尔，
申请(专利权)人：奥拉生物科学公司，美国政府卫生与公众服务部，
类型：发明
国别省市：美国;US