一种含复合亚型免疫抗体的禽流感免疫鸡蛋生产制程方法技术

一种含复合亚型免疫抗体的禽流感免疫鸡蛋生产制程方法，特别是将制备的减毒复合病毒株经解冻后加入抗生素灭菌后直接接种于12日龄鸡胚胎受精鸡蛋中，再抽取尿囊液作病毒培殖、制作成疫苗后施打于产蛋中的蛋鸡体内，再于二周及三周后各追加一剂，并于届满八周与十二周龄再各追补一剂。蛋鸡施打复合病毒疫苗(如H5N1及H7N9或H10N8)使鸡只体内产生抗体，经由血清移转到蛋黄中，第四周其产蛋的蛋黄即含有禽流感复合病毒株的免疫抗体Immunoglobulin of yolk(IgY)，且其抗体力价呈现稳定状态，该免疫鸡蛋供人食用，借被动免疫原理，使食用者具预防禽流感的效果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种含复合亚型免疫抗体的禽流感免疫鸡蛋生产制程方法，其是将禽流感H5、H7、H9及H10等亚型中，取二种以上复合亚型及N1、N2、N6、N7、N8、N9等病毒株的复合病毒株(如H5N1及H7N9或H10N8)经减毒纯化后制成疫苗(抗原)，打入鸡只体内，并于第二及第三周各追加抗原一剂，并于届满八周及十二周龄再各追补抗原一剂，则于第一次施打抗原四周后，其产蛋的蛋黄即开始含有复合亚型多病毒株的免疫抗体，借由人食用，可借被动免疫原理，达到人类预防感染禽流感的效果。
技术介绍
(一)世界卫生组织(WHO)统计：全球自2013年3月底至2014年10月底止，大陆十省二市及新疆自治区共有441人罹患H7N9确诊病例，逾176人死亡，死亡率为39.9％，且感染的年龄层有下降的趋势，显示H7N9对人类的传染性愈来愈强，并证实为「有限度的人传人疫情」，而2013年11月中国江西省发生全球首例的人类感染H10N8的确诊病例，震惊全球！！且2014年元月26日与2月14日又分别发生第二例及第三例H10N8，并已有2人死亡。据中国国家流感中心主任舒跃龙2月5日在权威医学期刊「TheLancet」上发表指出：H10N8是中国十七年来出现的第五种专利技术流感病毒株，属禽源性基因，其来源是中国禽鸟常见的H9N2病毒，且H5N1及H7N9亦来自H9N2的变异病毒株。(二)H7N9及H10N8在禽类属低病原性病毒，对禽类的致病率不强，但>人接触反而易罹病，其传染强度可能会比H5N1还高。又最近中国江西省、广西省、湖南省及北京市等城市也有人感染H7N7及H5N1型禽流感病例发生，据台湾中研院副院长陈建仁博士日前提出警示：中国江南汇集密集鸡、鸭、猪只及居住人口，人、禽、畜三类流感病毒容易进行基因重组，已是全球专利技术流感病毒重组装及制造的大工厂，未来十年至二十年间预计还会有新病毒不断的产生，致中国已全面陷入禽流感的流行病传染疫区，国人应加强防范！！(三)中国人感染禽流感病毒的亚型包括H5、H7、H9及H10等，而病毒株包括N1、N2、N7、N8及N9等，单一亚型及单一病毒株的疫苗或双亚型单一病毒株的免疫鸡蛋已无法满足当前的需求。(四)今专利技术人在台湾取得的专利技术专利「禽流感免疫鸡蛋的制作方法」(专利技术I309563号)，仅局限于H5单一亚型单一病毒株禽流感病毒，而发明人2011年7月在中国申请的专利案201110211929.5亦仅为双亚型单一病毒株的免疫鸡蛋制作方法，实为美中不足，又中国专利申请公开号：CN1384119「抗禽类病毒性疫病的复合卵黄抗体及其制备和应用」，其复合卵黄抗体指禽流感(AIV)及新城鸡瘟(NDV)二种，其病毒非同型禽类病毒，而本专利技术系指同一型复合亚型禽流感抗体，且抗原制备系以福尔马林进行灭菌，其效果不及于抗生素，又其抗原施打，仅于第一次免疫后7日再强化，取其卵黄复合抗体力价低且不稳定，又其复合抗体应用于禽类的药物或饲料的添加用，对人类感染致死性的禽流感无预防的效果。基上所述，将禽流感免疫鸡蛋的免疫球蛋白(IgY)抗体含括H5、H7、H9及H10等多亚型，来生产二种以上亚型及二种以上病毒株的复合型蛋黄免疫抗体(IgY)的免疫鸡蛋，提高其使用价值及抗体力价稳定性的制程，仍为专利技术人急需突破研究的课题。
技术实现思路
本专利技术所要解决的主要技术问题在于，克服现有技术存在的上述缺陷，而提供一种含复合亚型免疫抗体的禽流感免疫鸡蛋生产制程方法，食用本专利技术禽流感的免疫鸡蛋，可预防各种亚型及多病毒株的禽流感病毒的入侵(包括H5N1、H7N2、H7N9、H9N2及H10N8等)可避免禽流感大流行。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是：一种含复合亚型免疫抗体的禽流感免疫鸡蛋生产制程方法，是以可能产生变异，可感染人类的禽流感H5N1、H7N2、H7N9、H9N2及H10N8等亚型病毒株，选取二个以上亚型及二种以上复合病毒株，经去杂菌及减毒后，直接打入12日受精鸡胚胎蛋中增殖，再抽取尿囊液制备成不活化疫苗(抗原)后，施打于产蛋中的母鸡，蛋鸡施打疫苗后，其体内产生的抗体，经蛋母鸡卵巢上皮细胞的特异性受体(Receptor)接受后将血液中的抗体移行至蛋黄中(IgY)，即得含禽流感H5、H7、H9及H10等亚型及N1、N2、N7、N8及N9等病毒株的复合免疫抗体的免疫鸡蛋。所述的含复合亚型免疫抗体的禽流感免疫鸡蛋生产制程方法，其中，该疫苗施行的方法是施打疫苗第一剂后，于第二周及第三周后各追加一剂，并于届满八周及十二周龄再各追补一剂。所述的含复合亚型免疫抗体的禽流感免疫鸡蛋生产制程方法，其中，蛋黄中复合亚型及多病毒株免疫抗体力价的测定方法为血球凝集抑制试验(HI)。本专利技术是利用生物被动免疫原理，即是利用生物科技的免疫抗体(IgY)，将禽流感病毒(复合亚型及多病毒株)，经纯化减毒后，当做抗原施打于蛋鸡体内，并于第二周及第三周后各追加一剂，再于届满八周及十二周各追补一剂，利用长效性基剂的慢慢释放，蛋鸡体内会产生对禽流感病毒(复合亚型多病毒株)的抗体，由血清中移转到蛋黄中(称IgY)后，即可由被动免疫(passiveimmunigation)原理，而立即获得抗体，食用该禽流感的免疫鸡蛋，可预防H5、H7、H9及H10等各亚型及N1、N2、N7、N8及N9等病毒株的禽流感病毒的入侵，可预防人感染禽流感。本专利技术的有益效果是，食用禽流感的免疫鸡蛋(蛋黄含复合亚型及多病毒株的免疫抗体)可预防H5及H7或H10等各亚型及N1、N2、N7、N8、N9等病毒株的禽流感病毒的入侵人体，避免禽流感大流行。附图说明下面结合附图和实施例对本专利技术进一步说明。图1是本专利技术的制作流程方块图。表一.蛋黄中禽流感复合亚型多病毒株抗体力价测定值(mg/IgY)图中标号说明：1复合亚型多病毒株(如H5及H7或H10的多亚型及N1、N2、N7、N8、N9等多病毒株)2复合亚型多病毒株经减毒后接种于12日龄鸡胎胚3取出尿囊液经纯化制作成抗原(疫苗)4抗原(疫苗)接种鸡只体内5第二周及第三周后各追加一剂(疫苗)补强及届满八周及十二周各追补一剂抗原(疫苗)再补强6施打第一剂疫苗后第四周其产蛋蛋黄中即含有H5及H7或H10复合亚型及N1～N9等多病毒株免疫抗体(IgY)具体实施方式本专利技术的含复合亚型免疫抗体的禽流感免疫鸡蛋生产制程方法，敬请参阅图1所示，为本专利技术的制作流程方块图本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种含复合亚型免疫抗体的禽流感免疫鸡蛋生产制程方法，其特征在于，其制程如下：可感染人类的禽流感H5、H7、H9、H10等亚型及N1、N2、N7、N8、N9等病毒株，取二种以上复合亚型及多病毒株经去杂菌减毒后，直接打入受精12日鸡胚胎蛋中增殖，再抽取尿囊液制备成不活化疫苗(抗原)后，施打于产蛋中的母鸡，蛋鸡施打疫苗后，其体内产生的抗体，经蛋母鸡卵巢上皮细胞的特异性受体(Receptor)接受后将血液中的抗体移行至蛋黄中(IgY)，接种四周后，其即得含禽流感复合亚型多病毒株蛋黄免疫抗体的免疫鸡蛋。

【技术特征摘要】
1.一种含复合亚型免疫抗体的禽流感免疫鸡蛋生产制程方法，其特
征在于，其制程如下：可感染人类的禽流感H5、H7、H9、H10等亚型及N1、
N2、N7、N8、N9等病毒株，取二种以上复合亚型及多病毒株经去杂菌减毒
后，直接打入受精12日鸡胚胎蛋中增殖，再抽取尿囊液制备成不活化疫
苗(抗原)后，施打于产蛋中的母鸡，蛋鸡施打疫苗后，其体内产生的抗
体，经蛋母鸡卵巢上皮细胞的特异性受体(Receptor)接受后将血液中的
抗体移行至蛋黄中(IgY)，接种四周后，其即得含禽流感复合亚型多病
毒株蛋黄免疫抗体的免疫鸡蛋。
2.根据权利要求1所述的含复合亚型免疫抗体的禽流感免...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑长义，
申请(专利权)人：郑长义，
类型：发明
国别省市：中国台湾;71