产生组胺的细菌菌株和它们在癌症中的用途制造技术

本发明专利技术在文中公开了产生组胺的细菌菌株，其用于预防、抑制、治疗癌症或降低癌症的复发风险，所述癌症包括结直肠癌。本发明专利技术也公开了产生组胺的细菌菌株用于制备药物的用途，所述药物用于治疗癌症，包括男性结直肠癌。

Bacteria producing histamine and their use in cancer

The invention discloses a histamine producing bacterial strain, which is used for preventing, inhibiting, treating cancer or reducing the recurrence risk of cancer, including cancer of the colon and rectum. The invention also discloses the use of a bacterial strain producing histamine for the preparation of a drug, which is used for the treatment of cancer, including male colorectal cancer.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】产生组胺的细菌菌株和它们在癌症中的用途
本专利技术一般地涉及乳酸细菌菌株，且具体地涉及产生组胺的乳酸细菌菌株和它们在例如癌症中的用途。
技术介绍
已经收集到指示组胺可以调节不同的正常细胞和恶性细胞的增殖的早前证据。已经报道了在不同的人癌症（包括黑素瘤、结肠癌和乳腺癌）中的高组胺生物合成和含量以及组胺受体。结直肠癌(CRC)也被称作结肠癌、直肠癌或肠癌，是第三大常见癌症和癌症相关死亡的第三主要原因。已经将结肠直肠癌发生与遗传和环境因素关联。结直肠癌是结肠和/或直肠中的癌症。罗伊乳杆菌（Lactobacillusreuteri）是一种共生的肠厚壁菌和益生菌，其广泛地存在于不同禽和哺乳动物物种的胃肠道中。该生物被认为是公认为安全的(GRAS)和有益的微生物，且已经在全球用作益生菌大约二十年。已经报道罗伊乳杆菌（L.reuteri）会在不同的啮齿动物模型中抑制肠上皮细胞中的促炎细胞因子、单核细胞和肠炎症。WO2013/011137公开了产生组胺的具体益生菌乳酸细菌菌株的选择和这样的菌株对于哺乳动物的有益效果的用途。选择的细菌菌株可以用于哺乳动物中的组胺的局部产生，尤其是用于炎性病症的治疗或预防。专利技术概述本文中的专利技术公开了用于治疗癌症（包括结直肠癌）的产生组胺的细菌菌株。专利技术人已经发现，产生组胺的益生细菌能够降低Hdc-/-的结直肠癌中的炎症相关的CRC的频率和严重程度。罗伊乳杆菌ATCCPTA-6475显著地减小结肠直肠肿瘤或结肠肿瘤的数目和大小。同时，罗伊乳杆菌ATCCPTA-6475的同基因hdcA突变体（其缺少组胺产生活性）没有表现出这样的效应，从而指示细菌hdcA基因在胃肠微生物群系和用于抑制结肠直肠肿瘤发生的组胺的产生中的重要作用。因此，所述实施方案的一个方面涉及一种产生组胺的乳酸细菌菌株，其用于预防、抑制、治疗结直肠癌或降低结直肠癌的复发风险。所述实施方案的另一个方面涉及一种产生组胺的乳酸细菌菌株，其在选自放射疗法和化学疗法的癌症治疗中用作佐剂。所述实施方案的另一个方面涉及一种产生组胺的乳酸细菌菌株，其用于预防、抑制或治疗与选自放射疗法和化学疗法的癌症治疗有关的胃肠紊乱。所述实施方案的另一个方面涉及一种选择乳酸细菌菌株的方法，所述乳酸细菌菌株用于预防、抑制、治疗结直肠癌或降低结直肠癌的复发风险。所述方法包括针对有活性的组氨酸操纵子的存在来筛选乳酸细菌。所述方法还包括选择用于预防、抑制、治疗结直肠癌或降低结直肠癌的复发风险的乳酸细菌菌株，所述菌株被鉴别为具有有活性的组氨酸操纵子且能够产生组胺的乳酸细菌菌株。所述实施方案的另一个方面涉及一种选择乳酸细菌菌株的方法，所述乳酸细菌菌株用于预防、抑制、治疗癌症或降低癌症的复发风险。所述方法包括针对有活性的组氨酸操纵子的存在以及产生二酰甘油激酶(DagK)的能力来筛选乳酸细菌。所述方法还包括选择用于预防、抑制、治疗癌症或降低癌症的复发风险的乳酸细菌菌株，所述菌株被鉴别为具有有活性的组氨酸操纵子且能够产生组胺和DagK的乳酸细菌菌株。所述实施方案的另一个方面涉及一种选择乳酸细菌菌株的方法，所述乳酸细菌菌株用于预防、抑制或治疗炎性病症。所述方法包括针对有活性的组氨酸操纵子的存在和产生DagK的能力来筛选乳酸细菌。所述方法还包括选择用于预防、抑制或治疗炎性病症的乳酸细菌菌株，所述菌株被鉴别为具有有活性的组氨酸操纵子且能够产生组胺和DagK的乳酸细菌菌株。所述实施方案的其它方面涉及一种新罗伊乳杆菌菌株罗伊乳杆菌DSM32273，这样的罗伊乳杆菌DSM32273菌株用于用作药物和尤其是用于预防、抑制、治疗癌症或降低癌症的复发风险或用于预防、抑制或治疗炎性病症。本专利技术的另一个目的提供了产生组胺的细菌菌株用于制备药物的用途，所述药物用于治疗男性结直肠癌。本专利技术的另一个目的提供了一种用于治疗男性结直肠癌的组合物，其包含有效量的所述细菌菌株和药学上可接受的媒介物。附图简述图1.野生型罗伊乳杆菌ATCCPTA-6475会在体内减轻AOM/DSS诱导的结肠癌，但是它的hdcA突变体不会。(A)小鼠实验的时间线。将11周龄Hdc-/-BALB/c小鼠随机地分成四组，包括阴性对照组、阳性对照组、罗伊乳杆菌ATCCPTA-6475治疗组和罗伊乳杆菌hdcA突变体治疗组。在罗伊乳杆菌ATCCPTA-6475治疗组或hdcA突变体治疗组中的小鼠分别通过口胃管饲法接受在0.2mlMRS中的5×109CFU野生型罗伊乳杆菌ATCCPTA-6475或同基因的罗伊乳杆菌hdcA突变株，每天一次持续7天且此后每三天一次。在阴性和阳性对照组中的小鼠仅接受富含微生物的介质(MRS)。在12周龄时，用一剂AOM(12.5mg/kg)通过腹膜内注射攻击这些小鼠，随后是持续6天的在饮用水中的2个2%DSS处理周期，仅在DSS施用日期之间存在2周的饮用水恢复期。在阴性对照组中的小鼠仅接受一剂PBS和饮用水，而不是AOM和DSS。在27-周龄将小鼠处死，并评价每个组中的结肠癌发生。(B)阴性对照组(MRS/PBS-H2O)、阳性对照组(MRS/AOM-DSS)、罗伊乳杆菌ATCCPTA-6475治疗组(罗伊乳杆菌6475/AOM-DSS)和同基因的罗伊乳杆菌hdcA突变体治疗组(hdcA突变体/AOM-DSS)中的小鼠的代表性结肠图像。(C)来自上述每个组中的小鼠的大(>3mm)和小(<3mm)结肠肿瘤的数目。将数据呈现为框和显示中位值和10%和90%的短线图(**P<0.01,***p<0.001，对于每个组n=8~10)。(D)来自阴性对照组(MRS/PBS-H2O)、阳性对照组(MRS/AOM-DSS)、野生型罗伊乳杆菌ATCCPTA-6475治疗组(罗伊乳杆菌6475/AOM-DSS)和同基因的罗伊乳杆菌hdcA突变体治疗组(hdcA突变体/AOM-DSS)中的小鼠的代表性显微镜结肠图像(H&E染色)。图2.通过PET成像检测结肠肿瘤发生减轻。(A)PET成像程序。(B)在每个组中通过PET/CT扫描捕获的代表性小鼠图像。码条代表FDG信号强度。(C)在每个组中使用SUV对整个小鼠结肠中的FDG信号的定量表明，罗伊乳杆菌ATCCPTA-6475施用与MRS介质对照相比显著地降低了小鼠结肠中的FDG强度，但是同基因的罗伊乳杆菌hdcA突变体缺乏这样的效应(盲分析)。将数据呈现为散布图(*P<0.05，对于每个组n=6)。图3.罗伊乳杆菌ATCCPTA-6475施用会影响鼠血浆中的细胞因子产生。通过Luminex测定确定，罗伊乳杆菌ATCCPTA-6475施用在蛋白水平显著地减少在雄性Hdc-/-小鼠血浆中的促炎细胞因子KC(A)、IL-22(B)和IL-6(C)产生，而缺乏产生组胺能力的同基因的罗伊乳杆菌hdcA突变体没有表现出这样的效应。将数据呈现为散布图(*P<0.05，**P<0.01，***p<0.001，对于每个组n=8~10)。图4.罗伊乳杆菌ATCCPTA-6475施用会影响结肠中的细胞因子基因表达。通过RT-qPCR确定，罗伊乳杆菌ATCCPTA-6475施用在本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种产生组胺的乳酸细菌菌株，其用于预防、抑制、治疗结直肠癌或降低结直肠癌的复发风险。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.03.26 US 62/1384911.一种产生组胺的乳酸细菌菌株，其用于预防、抑制、治疗结直肠癌或降低结直肠癌的复发风险。2.根据权利要求1使用的产生组胺的乳酸细菌菌株，其中所述产生组胺的乳酸细菌菌株用于预防、抑制、治疗炎症相关的结直肠癌或降低炎症相关的结直肠癌的复发风险。3.根据权利要求1或2使用的产生组胺的乳酸细菌菌株，其中所述产生组胺的乳酸细菌菌株用于在男性患者中预防、抑制、治疗结直肠癌或降低结直肠癌的复发风险。4.根据权利要求1-3中的任一项使用的产生组胺的乳酸细菌菌株，其中所述产生组胺的乳酸细菌菌株用于减少遭受结直肠癌的患者中的肿瘤的数目和/或大小。5.一种产生组胺的乳酸细菌菌株，其用于用作在选自放射疗法和化学疗法的癌症治疗中的佐剂。6.一种产生组胺的乳酸细菌菌株，其用于预防、抑制或治疗与选自放射疗法和化学疗法的癌症治疗有关的胃肠紊乱。7.根据权利要求6使用的产生组胺的乳酸细菌菌株，其用于预防、抑制或治疗与所述癌症治疗有关的腹泻。8.根据权利要求1-7中的任一项使用的产生组胺的乳酸细菌菌株，其中所述产生组胺的乳酸细菌菌株包含有活性的组氨酸操纵子。9.根据权利要求1-8中的任一项使用的产生组胺的乳酸细菌菌株，其中所述产生组胺的乳酸细菌菌株能够产生二酰甘油激酶(DagK)。10.根据权利要求1-9中的任一项使用的产生组胺的乳酸细菌菌株，其中所述产生组胺的乳酸细菌菌株是产生组胺的罗伊乳杆菌菌株。11.根据权利要求10使用的产生组胺的乳酸细菌菌株，其中所述产生组胺的罗伊乳杆菌菌株是罗伊乳杆菌ATCCPTA-6475。12.根据权利要求10使用的产生组胺的乳酸细菌菌株，其中所述产生组胺的罗伊乳杆菌菌株是罗伊乳杆菌ATCCPTA-4659。13.根据权利要求10使用的产生组胺的乳酸细菌菌株，其中所述产生组胺的罗伊乳杆菌菌株是罗伊乳杆菌DSM32273。14.根据权利要求1-13中的任一项使用的产生组胺的乳酸细菌菌株，其中所述产生组胺的乳酸细菌菌株能够抑制至少一种癌症相关的细胞因子的产生，所述细胞因子选自趋化因子(C-X-C基序)配体1、白介素22和白介素6。15.根据权利要求1-14中的任一项使用的产生组胺的乳酸细菌菌株，其中所述产生组胺的乳酸细菌菌株能够减小脾中的CD11b+Gr-1+未成熟的髓系细胞的丰度。16.一种选择用于预防、抑制、治疗结直肠癌或降低结直肠癌的复发风险的乳酸细菌菌株的方法，所述方法包括：针对有活性的组氨酸操纵子的存在来筛选乳酸细菌；和选择用...

【专利技术属性】
技术研发人员：J维萨洛韦，B梅尔斯塔姆，高春绪，B加内斯，
申请(专利权)人：拜奥加亚公司，
类型：发明
国别省市：瑞典,SE