L‑苏氨酸高产基因工程菌及其应用制造技术

本发明专利技术属于基因工程技术领域，具体涉及一株产L‑苏氨酸高产基因工程菌及其应用。所述工程菌以大肠杆菌为宿主细胞，通过敲除编码赖氨酸乙酰转移酶的pka基因和TCA循环转录调控因子arcA基因的同时，过表达磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶编码基因ppc构建的。将工程菌用于发酵生产L‑苏氨酸后，可将产量提高8.97％。

【技术实现步骤摘要】
L-苏氨酸高产基因工程菌及其应用
：本专利技术属于基因工程
，具体涉及利用基因工程技术改造大肠杆菌得到重组苏氨酸高产菌与利用高产菌发酵生产L-苏氨酸的应用。
技术介绍
：苏氨酸共有4种异构体,天然存在并对机体有生理作用的是L-苏氨酸。苏氨酸是人体8种必需氨基酸之一，动物体内不能合成苏氨酸，必须通过饲料供应获取。苏氨酸是仅次于蛋氨酸、赖氨酸和色氨酸的第4种限制性氨基酸，在药品、食品、饲料、化妆品及化工领域应用广泛，市场需求量日益增加，对于人类与动物的健康和营养有重要的意义。苏氨酸的生产方法主要有蛋白质水解提取法、化学合成法和微生物发酵法三种，最有效的生产苏氨酸的方法为微生物发酵法。用微生物发酵法生产L-苏氨酸，可以使用廉价的葡萄糖原料直接生产产品，此方法生产苏氨酸菌种特性专一，发酵液中其它氨基酸的含量很少，成本很低，环境污染小，有利于大规模的生产。目前用于L-苏氨酸发酵的主要生产菌株是谷氨酸棒杆菌(Corynebacteriumglutamicum)、黄色短杆菌(Brevibacteriumflavum)和大肠杆菌(Escherichiacoli),而大肠杆菌因繁殖速度快、生理周本文档来自技高网...

【技术保护点】
一株生产L‑苏氨酸的基因工程菌，其特征在于，所述工程菌以大肠杆菌为宿主细胞，通过敲除编码赖氨酸乙酰转移酶的pka基因和TCA循环转录调控因子arcA基因的同时，过表达磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶编码基因ppc构建的。

【技术特征摘要】
1.一株生产L-苏氨酸的基因工程菌，其特征在于，所述工程菌以大肠杆菌为宿主细胞，通过敲除编码赖氨酸乙酰转移酶的pka基因和TCA循环转录调控因子arcA基因的同时，过表达磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶编码基因ppc构建的。2.如权利要求1所述的一株生产L-苏氨酸的基因工程菌，其特征在于，所述宿主细胞为E.coliTHRD，保藏编号CGMCCNo.11074。3.如权利要求1所述的一株生产L-苏氨酸的基因工程菌，其特征在于，所述pka基因其核苷酸序列如序列表SEQIDNO.1所示；所述arcA基因其核苷酸序列如序列表SEQIDNO.2所示；所述ppc基因其核苷酸序列如序列表SEQIDNO.3所示。4.权利要求1所述的一株生产L-苏氨酸的基因工程菌的构建方法，其特征在于，步骤如下：(1)以E.coliTHRD为出发菌株，敲除基因pka，筛选出成功敲除pka基因的菌株E.coliJLTHRG；(2)再以菌株E.coliJLTHRG为基础，敲除基因arcA，筛选出成功敲除pka基因和arc...

【专利技术属性】
技术研发人员：王健，郭群群，苏跃稳，王森，张昕，
申请(专利权)人：吉林大学，
类型：发明
国别省市：吉林,22