一种巨大芽孢杆菌菌粉肥料的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种巨大芽孢杆菌菌粉肥料的制备方法，包括如下步骤：①菌种活化；②种子培养；③上罐发酵培养；④板框压滤；⑤低温干燥；⑥稀释涂布平板计算活菌数；⑦包装。本发明专利技术提供了一种巨大芽孢杆菌菌粉肥料的制备方法，具体地说是利用板框压滤法经低温干燥制备菌粉，其中的菌液经板框压滤存活率较高，作为肥料施于土壤大大提高土壤中微生物数量，提高磷肥利用率。此外利用板框压滤技术制备菌粉，对节约水资源及降低电耗具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】
一种巨大芽孢杆菌菌粉肥料的制备方法
本专利技术涉及巨大芽孢杆菌
，具体为一种巨大芽孢杆菌菌粉肥料的制备方法。
技术介绍
巨大芽孢杆菌为革兰氏阳性好氧菌，不仅能分解有机磷物质，而且也能分解难溶性磷化合物。因此，在农业上可用于制造磷细菌肥料。板框过滤是在工作压力作用下，滤液透过滤膜或其它滤材，经出液口排出，残渣将留在板框内形成滤饼，从而达到固液分离的目的。然后经低温烘干和粉碎制得菌粉。该方法工艺简便，成本低廉，易于推广。巨大芽孢杆菌能产生芽孢，芽孢对高温干燥、挤压和酸碱等不良因素抵抗力较强。因此巨大芽孢杆菌具有耐高温及耐挤压等特性，其在板框压滤、粉碎及低温干燥等生产过程中，均能保持较高的稳定性和存活率。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种巨大芽孢杆菌菌粉肥料的制备方法，以解决上述
技术介绍
中提出的问题，具体地说是利用板框压滤法经低温干燥制备菌粉。为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种巨大芽孢杆菌菌粉肥料的制备方法，包括如下步骤：①菌种活化：将4℃斜面保存的巨大芽孢杆菌活化，将其分别划线于相应固体培养基上，恒温37℃，培养20h；②种子培养：挑取活化的菌落，将巨大芽孢杆菌接种于1号种子培养基进行种子培养，37℃、200r/min培养18h；③上罐发酵培养：将巨大芽孢杆菌一级种子液按5-10％接种量接入一级400L发酵罐中，发酵培养基为2号发酵培养基，通风比1:1，转速100r/min，37℃，培养8h后转入5t二级发酵罐，培养24h后收集菌液；④板框压滤：将收集后的菌液添加碳酸钙5％-7％，磷酸二氢钠2％-3％，氯化钙2.5-3％絮凝剂絮凝，然后分别使用孔径为300目、400目、500目、600目的滤布进行板框过滤，收集滤饼；⑤低温干燥，将滤饼进行低温干燥(60-80℃)，烘干后粉碎，制得菌粉；⑥稀释涂布平板计算活菌数：取1g巨大芽孢杆菌菌粉进行稀释涂布平板计算活菌数；⑦包装：采用无菌密封袋包装以制备复合菌剂。优选的，所述的固体培养基组成为：培养基(g/L):蛋白胨10，牛肉膏3，氯化钠5，琼脂18，pH7.2，所述的巨大芽孢杆菌，中国普通微生物菌种保藏管理中心，编号1.223。优选的，所述1号种子培养基组成为：培养基(g/L):葡萄糖10-12,磷酸氢二钾5-6，磷酸二氢钾2-3，尿素1-1.5，酵母粉5-6，硫酸镁0.35-0.41，用氢氧化钾调pH7.0。优选的，所述2号发酵培养基组成为：培养基(g/L):葡萄糖10，(NH4)2SO40.5，NaCl0.3，KC10.3，MgSO4·7H2O0.3，FeSO4·7H2O0.03，MnSO4·4H2O0.03，Ca3(PO3)25，pH7.0～7.5，121℃，20min灭菌。与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：本专利技术提供了一种巨大芽孢杆菌菌粉肥料的制备方法，具体地说是利用板框压滤法经低温干燥制备菌粉，其中的菌液经板框压滤存活率较高，作为肥料施于土壤大大提高土壤中微生物数量，提高磷肥利用率。此外利用板框压滤技术制备菌粉，对节约水资源及降低电耗具有重要意义。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。本专利技术提供了一种巨大芽孢杆菌菌粉肥料的制备方法，包括如下步骤：①菌种活化：将4℃斜面保存的巨大芽孢杆菌活化，将其分别划线于1号固体培养基上，37℃，培养20h；②种子培养：挑取活化的菌落，将巨大芽孢杆菌接种于1号种子培养基进行种子培养，37℃、200r/min培养18h。③上罐发酵培养：将巨大芽孢杆菌一级种子液按5-10％接种量接入一级400L发酵罐中，发酵培养基为2号培养基，通风比1:1，100r/min，37℃，培养8h后转入5t二级发酵罐，培养24h后收集菌液。④板框压滤：将收集后的菌液添加碳酸钙5％-7％，磷酸二氢钠2％-3％，氯化钙2.5-3％等絮凝剂絮凝。然后分别使用孔径为300目、400目、500目、600目的滤布进行板框过滤，收集滤饼。⑤将滤饼进行低温干燥(60-80℃)，烘干后粉碎，制得菌粉。⑥稀释涂布平板计算活菌数：取1g制得的菌粉进行稀释涂布平板计算活菌数。⑦包装：采用无菌密封袋包装。实施案例一将收集后的菌液添加碳酸钙5％-7％，磷酸二氢钠2％-3％，氯化钙2.5％-3％的絮凝剂絮凝。然后使用孔径为300目的滤布进行板框过滤，收集滤饼。将滤饼进行低温干燥(60-80℃)，烘干后粉碎，制得菌粉(含水量7％左右，碳酸钙5％，磷酸二氢钠2％，氯化钙2.5％)，然后进行稀释涂布活菌计数，菌量达到80亿cfu/g。实施案例二将收集后的菌液添加碳酸钙5％-7％，磷酸二氢钠2％-3％，氯化钙2.5％-3％的絮凝剂絮凝。然后使用孔径为400目的滤布进行板框过滤，收集滤饼。将滤饼进行低温干燥(60-80℃)，烘干后粉碎，制得菌粉(含水量7％左右，碳酸钙5％，磷酸二氢钠2％，氯化钙2.5％)，然后进行稀释涂布活菌计数，菌量达到85.9亿cfu/g。实施案例三将收集后的菌液添加碳酸钙5％-7％，磷酸二氢钠2％-3％，氯化钙2.5％-3％的絮凝剂絮凝。然后使用孔径为500目的滤布进行板框过滤，收集滤饼。将滤饼进行低温干燥(60-80℃)，烘干后粉碎，制得菌粉(含水量7％左右，碳酸钙5％，磷酸二氢钠2％，氯化钙2.5％)，然后进行稀释涂布活菌计数，菌量达到115亿cfu/g。实施案例四将收集后的菌液添加碳酸钙5％-7％，磷酸二氢钠2％-3％，氯化钙2.5％-3％的絮凝剂絮凝。然后使用孔径为600目的滤布进行板框过滤，收集滤饼。将滤饼进行低温干燥(60-80℃)，烘干后粉碎，制得菌粉(含水量7％左右，碳酸钙5％，磷酸二氢钠2％，氯化钙2.5％)，然后进行稀释涂布活菌计数菌量达到43亿cfu/g。尽管已经示出和描述了本专利技术的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本专利技术的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本专利技术的范围由所附权利要求及其等同物限定。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种巨大芽孢杆菌菌粉肥料的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：①菌种活化：将4℃斜面保存的巨大芽孢杆菌活化，将其分别划线于相应固体培养基上，恒温37℃，培养20h；②种子培养：挑取活化的菌落，将巨大芽孢杆菌接种于1号种子培养基进行种子培养，37℃、200r/min培养18h；③上罐发酵培养：将巨大芽孢杆菌一级种子液按5‑10％接种量接入一级400L发酵罐中，发酵培养基为2号发酵培养基，通风比1:1，转速100r/min，37℃，培养8h后转入5t二级发酵罐，培养24h后收集菌液；④板框压滤：将收集后的菌液添加碳酸钙5％‑7％，磷酸二氢钠2％‑3％，氯化钙2.5‑3％絮凝剂絮凝，然后分别使用孔径为300目、400目、500目、600目的滤布进行板框过滤，收集滤饼；⑤低温干燥，将滤饼进行低温干燥，温度60‑80℃，烘干后粉碎，制得菌粉；⑥稀释涂布平板计算活菌数：取1g巨大芽孢杆菌菌粉进行稀释涂布平板计算活菌数；⑦包装：采用无菌密封袋包装以制备复合菌剂。

【技术特征摘要】
1.一种巨大芽孢杆菌菌粉肥料的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：①菌种活化：将4℃斜面保存的巨大芽孢杆菌活化，将其分别划线于相应固体培养基上，恒温37℃，培养20h；②种子培养：挑取活化的菌落，将巨大芽孢杆菌接种于1号种子培养基进行种子培养，37℃、200r/min培养18h；③上罐发酵培养：将巨大芽孢杆菌一级种子液按5-10％接种量接入一级400L发酵罐中，发酵培养基为2号发酵培养基，通风比1:1，转速100r/min，37℃，培养8h后转入5t二级发酵罐，培养24h后收集菌液；④板框压滤：将收集后的菌液添加碳酸钙5％-7％，磷酸二氢钠2％-3％，氯化钙2.5-3％絮凝剂絮凝，然后分别使用孔径为300目、400目、500目、600目的滤布进行板框过滤，收集滤饼；⑤低温干燥，将滤饼进行低温干燥，温度60-80℃，烘干后粉碎，制得菌粉；⑥稀释涂布平板计算活菌数：取1g巨大芽孢杆菌菌粉进行稀释涂布平板计算活菌数；⑦包装：采用无菌密封袋包装以...

【专利技术属性】
技术研发人员：任友花，雷雨，周振金，张成玉，钟诚，
申请(专利权)人：临沂国龙生态科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37