猪流行性腹泻S1蛋白融合基因及重组巨大芽孢杆菌和应用制造技术

本发明专利技术公开了猪流行性腹泻S1蛋白融合基因及重组巨大芽孢杆菌和应用。本发明专利技术将猪流行性腹泻病毒S糖蛋白的S1抗原位点和细胞壁锚定序列连接得到SEQ?ID?No.1所示的抗原融合基因。本发明专利技术进一步的构建了含有该抗原融合基因的分泌表达载体，将其转化到巨大芽孢杆菌中在其细胞壁或其表面表达重组蛋白。免疫印迹试验表明，所表达的重组蛋白能够与PEDV免疫血清发生反应，表明本发明专利技术所制备的重组蛋白与PEDV天然抗原一样具有相同的抗原性。诱导表达后的活菌体免疫荧光试验表明，所表达的重组蛋白定位于菌体的表面。实验结果表明，本发明专利技术所制备的重组蛋白能够用于制备成防治猪流行性腹泻的安全、有效的粘膜免疫活菌疫苗。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及抗原融合基因以及含有该抗原融合基因的重组菌株，尤其涉及猪流行性腹泻S1蛋白融合基因以及含有该融合基因的表达载体，本专利技术进一步涉及含有该表达载体的重组巨大芽孢杆菌菌株以及它们在制备防治猪流行性腹泻疫苗中的应用，属于猪流行性腹泻的防治领域。
技术介绍
猪流行性腹泻(PEDV)是由冠状病毒引起猪的一种急性高度接触性传染病，以水泻、呕吐和脱水为特征，该病在世界范围内广泛分布，危害严重，给养猪业带来重大经济损失。病毒主要通过肠道感染猪，具有明显的肠道组织嗜性的特点，在抗PEDV感染免疫过程中除体液免疫和细胞免疫外，局部肠粘膜免疫系统发挥着不可替代的作用。PEDV具有典型的冠状病毒结构，由4种主要结构蛋白组成，分别为磷酸化的核衣壳蛋白(N)、膜蛋白(M)、糖基化的纤突蛋白(S)和小囊膜蛋白(E)其中S糖蛋白携带主要的B淋巴细胞抗原决定簇能够诱导产生中和抗体和提供免疫保护作用的重要结构蛋白，因此，S蛋白对病毒感染、发挥其致病性和决定宿主细胞亲嗜性方面起关键作用。PEDV感染具有明显的嗜肠性，分泌型IgA抗体是保护猪体不受PEDV感染和免于发病的关键因素，口服免疫后，在肠液和血清本文档来自技高网...

【技术保护点】
猪流行性腹泻S1蛋白抗原融合基因，其特征在于：其多核苷酸序列为SEQ?IDNo.1所示。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：张金林，马立保，胡晓芬，
申请(专利权)人：武汉华扬动物药业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：