一种在酿酒酵母蛋白Rav2p的C末端上快速添加FLAG标记的方法技术

一种在酿酒酵母蛋白Rav2p的C末端上快速添加FLAG标记的方法，涉及酿酒酵母中Rav2p基因的改造与修饰，属于分子生物学相关领域。本发明专利技术提供了一种在酿酒酵母蛋白Rav2p的C末端上快速添加FLAG标记，其特征在于使该菌蛋白Rav2p的C末端上带有FLAG标记，并插入抗生素G418抗性基因KanMX6，有利于重组菌的筛选。利用本发明专利技术人构建的线性DNA，实现对Rav2p的基因改造与修饰，从而构建Rav2p的C末端上含有FLAG标记的酿酒酵母重组菌。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及酿酒酵母中Rav2p基因的改造与修饰，属于分子生物学相关领域。
技术介绍
V-ATP酶(VacuolarATPase)是一种普遍存在于真核生物的内膜系统的蛋白质大分子，其可以水解ATP来转移质子，维持细胞的正常生理环境。V-ATP酶在细胞内通过质子的运输，使细胞器的PH平衡，进而对生物学过程例如细胞膜运输、蛋白质降解、小分子的偶联运输起重要作用。V-ATP酶由两大结构功能部分共14种亚基组成:一部分是水溶性的V1,由8种亚基组成，主要功能是水解ATP ;另一部分是嵌于膜中的Vtl,由6种亚基组成，主要功能是转移质子。这两大部分之间形成一种柄状结构从而使得这两部分从功能和结构上成为一个整体。V-ATP酶在萄糖浓度降低时可以可逆分解为VdPV1两部分来调节酶的活性，RAVE:(reg μ lator of theH+_ATPase of vacuolar and endosomal membranes)在 V-ATP 酶这种活性调节方式中起很重要的作用。RAVE复合物由SkpIp、RavIp和Rav2p三个亚基组成。目前有关RAVE以及RAVE对V-ATP酶活性调节机理的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种在酿酒酵母蛋白Rav2p的C末端上快速添加FLAG标记的方法，其特征在于使该菌蛋白Rav2pC末端上带有FLAG标记，并插入抗生素G418抗性基因KanMX6。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张震宇，顾春银，李忠浩，杨冬美，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：