肌苷在治疗T-reg缺乏中的应用制造技术

本发明专利技术提供肌苷在治疗与Treg缺乏或Treg功能障碍相关的疾病，特别是免疫失调、多内分泌腺病、肠病、X‑连锁综合征(IPEX)中的用途。在本发明专利技术的一个实施方案中，肌苷可以一种能够刺激肌苷产生的细菌菌株的形式提供。还提供在受试者中使用所述菌株刺激肌苷产生的方法，以及选择能够在受试者中刺激肌苷产生的细菌菌株的方法。

Application of inosine in the treatment of T-reg deficiency

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】肌苷在治疗T-reg缺乏中的应用专利
本专利技术涉及肌苷在治疗人类中的某些应用。本专利技术还涉及用于选择能够刺激肌苷产生的特定细菌菌株(包括乳酸细菌菌株)的方法，以及这样的菌株对宿主生物体产生有益作用的用途。专利技术背景肌苷是一种在次黄嘌呤与核糖环相连时形成的核苷，和通常存在于tRNA中。已知肌苷具有很强的免疫调节和神经保护作用，并且可作为膳食补充剂市售获得。肌苷在摄入后产生尿酸，和提示为一种天然抗氧化剂。肌苷已在几个临床试验中，例如在帕金森氏病和多发性硬化症中得到研究。益生菌被定义为在消费时提供健康益处的微生物。例如，联合国食品和农业组织将益生菌定义为“当以适当量给予时赋予宿主健康益处的活微生物”。产乳酸细菌(例如，乳酸菌(Lactobacillus)和双歧杆菌(Bifidobacteria))的某些菌株，常被用作各种类型的食品(如酸奶)中的益生菌。有害微生物的生长和定植可以被产乳酸菌通过其自身在哺乳动物上或在哺乳动物内的定植，通过生物膜的形成，通过有效养分的竞争，以及还有特定物质如过氧化氢、细菌素或降低pH的有机酸(包括乳酸和乙酸)的产生来阻止。例如乳酸细菌的一些菌株还已显示在炎性疾病的治疗方案中具有作用，以及对宿主的免疫成熟和稳态也具有影响。调节性T细胞(Treg)是一个调节免疫系统，保持对自身抗原的耐受性并消除自身免疫性疾病的T细胞亚群。Treg一般抑制或下调效应T细胞的诱导和增殖。调节性T细胞以多种形式出现，其中最充分被理解的是表达CD4、CD25和Foxp3的那些(CD4+CD25+调节性T细胞)。在人类和小鼠中编码Foxp3的基因的基因突变已基于由这些突变引起的遗传疾病而被鉴定。具有Foxp3的突变的人患有严重且迅速致命的自身免疫性病症，称为免疫失调、多内分泌腺病、肠病X-连锁(IPEX)综合征。专利技术简述本专利技术基于这样的令人惊讶的发现，即当研究scurfy小鼠模型(其是一种由于Foxp3的突变导致的免疫失调多内分泌腺病肠病X-连锁综合征(IPEX综合征)的模型)时，单独的肌苷可以补偿Treg缺乏或Treg功能障碍。因此，本专利技术的目的是使用含有肌苷的产品来补偿Treg功能障碍或Treg缺乏，例如在IPEX的治疗中。对于具有某种Treg功能障碍的各种疾病的疗法，或甚至在缺乏或减少Treg-细胞数量的情况下，这是有利的发现。本专利技术还基于这样的令人惊讶的发现，即乳酸细菌的某些菌株，特别是罗伊氏乳杆菌(Lactobacillusreuteri)的菌株，能够在体内刺激肌苷产生。事实上，据专利技术人所知，从前尚未报道益生菌在体内产生肌苷或刺激肌苷产生。因此，本专利技术还提供一种选择在体内有效刺激或诱导肌苷产生的特定细菌菌株(包括乳酸细菌的菌株)的新方法。因此，在一个方面，本专利技术提供用于治疗与Treg缺乏或Treg功能障碍相关的疾病的肌苷。在另一个方面，本专利技术提供一种在受试者中治疗与Treg缺乏或Treg功能障碍相关的疾病的方法，所述方法包括给予所述受试者有效量的肌苷的步骤。在另一个方面，本专利技术提供肌苷在制备用于治疗与Treg缺乏或Treg功能障碍相关的疾病的药物或组合物中的用途。在一些实施方案中，和如本文其它地方更详细描述的那样，肌苷可通过给予细菌菌株提供。因此，在一些实施方案中，肌苷通过给予能够刺激或诱导肌苷产生的细菌菌株，例如乳酸细菌菌株来提供。附图简述图1：实验方案。a,罗伊氏乳杆菌(L.reuteri)早期治疗SF小鼠(SFL)的方案，在8天龄(d8)开始，每日，至d125，以供生存确定。b,罗伊氏乳杆菌：晚期治疗SF小鼠(SFL)，在d15开始，每日，至d38，以供生存确定。c,肌苷治疗SF小鼠(SFI)，在d8开始，每日给予，直至d125，以供生存分析。图2：生命早期的罗伊氏乳杆菌治疗在SF小鼠中增加生存和抑制自身免疫。a,SF(n=17)和SFL(在d8开始LR-治疗)(n=10)小鼠的生存曲线。b,在d22，WT、SF和SFL小鼠的肝和肺的代表性H&E染色。c,WT(n=12)、SF(n=12)和SFL(n=10)的肝和肺的炎性浸润的形态计量学定量。d,IFN-γ和IL-4的血浆水平。e,f,在脾(e)和肠系膜淋巴结(f)中产生IFN-γ或IL-4的CD4+T细胞的比例。误差条，均值±s.e.m。*p<0.05，***p<0.001，SF对比WT。#p<0.05，##p<0.01，###p<0.001，SFL对比SF。图3：罗伊氏乳杆菌治疗结果：晚期治疗在SF小鼠中延长存活和抑制炎症。a,SF(n=17)与从d15至d38用罗伊氏乳杆菌治疗的SF(SFL,n=10)比较的生存曲线。b,WT、SF和SFL小鼠的肝和肺的代表性H&E染色。c,WT(n=12)、SF(n=12)和SFL(n=10)小鼠的肝(左)和肺(右)中炎性浸润的定量。d,IFN-γ和IL-4的血浆水平。e,在脾中产生IFN-γ或IL-4的CD4+T细胞的比例。误差条，均值±s.e.m。***p<0.001，SF对比WT。##p<0.01，###p<0.001，SFL对比SF。图4：罗伊氏乳杆菌治疗结果：早期治疗提高SF小鼠的小肠绒毛高度和隐窝深度。a,WT、SF和SFL小鼠的小肠的代表性H&E染色。b,c,WT(n=12)、SF(n=12)和SFL(n=10)中的平均绒毛高度(b)和隐窝深度(c)。误差条，均值±s.e.m。**p<0.01,***p<0.001，SF对比WT。##p<0.01,###p<0.001，SFL对比SF。图5：罗伊氏乳杆菌：早期治疗改变SF小鼠中因Treg-缺乏破坏的粪便和血浆的代谢组学特征。a,WT(n=6)、SF(n=6)和SFL(n=4)小鼠的粪便中657种代谢产物的热图。比例尺条指示SF对比WT或SFL对比SF的倍数变化。b,由SF对比WT或SFL对比SF小鼠影响的粪便代谢产物数量，上调(↑)或下调(↓)(p<0.05)。c,WT(n=6)、SF(n=6)和SFL(n=5)小鼠血浆中525种代谢产物的热图。比例尺条指示SF对比WT或SFL对比SF的倍数变化。d,由SF对比WT或SFL对比SF小鼠影响的血浆代谢产物数量，上调(↑)或下调(↓)(p<0.05)。e,显示用罗伊氏乳杆菌早期治疗的SF小鼠中明显改变的29种血浆代谢产物的水平的热图。颜色指示倍数变化(SF对比WT或SFL对比SF)。通过对比双向方差分析，指明的所有变化均为p<0.05。G=绿色，LG=浅绿色，LR=浅红色，R=红色。图6：血浆和粪便中的肌苷的相对定量。显示WT(n=6)、SF(n=6)和SFL(n=5)小鼠的血浆(a)和粪便(b)中肌苷的代谢产物的相对定量的图。误差条，均值±s.e.m。*p<0.05,SF对比WT。#p<0.05,SFL对比SF。图7：罗伊氏乳杆菌早期治疗对SF小鼠中肌苷代谢途径的影响。a,b,显示WT(n=6)、SF(n=6)和SFL(n=5)小鼠的血浆(a)和粪便(b)中肌苷代谢途径的代谢产物的相对定量的图。误差条，平均±s.e.m.**p<0.01，SF对比WT本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.在治疗与Treg缺乏或Treg功能障碍相关的疾病中应用的肌苷。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.05.27 US 62/3425081.在治疗与Treg缺乏或Treg功能障碍相关的疾病中应用的肌苷。2.权利要求1的肌苷，其中肌苷呈现为含有肌苷作为活性组分的组合物或药物组合物的形式。3.权利要求1或权利要求2的肌苷，其中肌苷呈现为口服制剂或注射制剂的形式。4.权利要求3的肌苷，其中所述肌苷呈现为胶囊或安瓿的形式。5.权利要求1的肌苷，其中肌苷以能够刺激肌苷产生的乳酸细菌菌株的形式提供。6.权利要求5的肌苷，其中所述菌株是罗伊氏乳杆菌(Lactobacillusreuteri)。7.权利要求1-6的任一项的肌苷，其中所述疾病是Treg缺乏或Treg功能障碍介导的自身免疫性疾病。8.权利要求1-7的任一项的肌苷，其中所述疾病选自：免疫失调多内分泌腺病肠病X-连锁综合征(IPEX)；IPEX-样综合征；和与Foxp3的突变或改变有关的疾病。9.权利要求8的肌苷，其中所述IPEX-样综合征由CTLA4、CD25、STAT1、STAT5b、ITCH和IL-2Rb的一种或多种的突变引起，或与CTLA4、CD25、STAT1、STAT5b、ITCH和IL-2Rb的一种或多种的突变相关。10.权利要求1-9的任一项的肌苷，其中所述应用对人受试者进行。11.一种在受试者中刺激肌苷产生的方法，所述方法包括以在所述受试者中有效刺激肌苷产生的量给予所述受试者乳酸细菌菌株，其中所述菌株能够刺激肌苷产生。12.权利要求11的方法，其中所述菌株是罗伊氏乳杆菌。13.权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：S罗斯，Y刘，B何，JM罗瓦斯，
申请(专利权)人：拜奥加亚公司，得克萨斯系统大学评议会，
类型：发明
国别省市：瑞典,SE