抗‑MET抗体及其使用方法技术

本文提供了涉及特异性结合至MET(受体酪氨酸激酶)并且调节MET的表达和/或活性的抗体的组合物、方法和使用。还提供了控制、治疗或预防病症，如癌症的使用和方法。在一个方面，本文提供了结合至人MET的Sema/PSI域的单克隆抗体或其抗原结合片段。本文还提供了包含本文所提供的抗体或抗原结合片段的试剂盒。本文还提供了控制、保护抵抗或治疗受试者中癌症的方法，其包括向对其有需要的受试者施用治疗有效量的本文所提供的抗体或抗原结合片段。

Anti MET antibodies and methods of use

This article provides a composition, method, and use of antibodies that relate specifically to MET (receptor tyrosine kinase) and regulate the expression and / or activity of MET. It also provides control, treatment or prevention of disease, such as the use and method of cancer. In one aspect, this article provides a monoclonal antibody or an antigen binding fragment that is combined with the Sema/PSI domain of the human MET. This article also provides a kit containing the antibody or antigen binding fragments provided in this article. This article also provides a way to control, protect, or treat cancer in subjects. It includes applying the effective amount of antibody or antigen binding fragment to the subjects who need it.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗-MET抗体及其使用方法本专利技术申请主张2015年3月16日提交的美国临时专利申请No.62/133,789和2015年4月17日提交的美国临时专利申请No.62/149,465的权益，以上每篇专利以其全部内容作为参考并入本文。对电子提交的序列表的引用本专利技术申请作为参考引入了作为标题为“Sequence_Listing_12638_125_228.txt”的文本文件与本专利技术申请一起提交的序列表，该文本文件于2016年3月7日生成并且大小为153,511字节。1.
本文提供了涉及特异性结合至受体酪氨酸激酶MET并调节MET的表达和/或活性以用于控制、治疗或预防病症，如癌症的抗体的组合物、方法和使用。2.专利技术背景肝细胞生长因子(HGF)受体MET(也称为HGFR、c-MET)是由MET基因编码的单次跨膜(single-pass)受体酪氨酸激酶。MET酪氨酸激酶是杂二聚体，其包含通过二硫键连接至跨膜β-亚基的胞外α-亚基以及胞内蛋白酪氨酸激酶域(参见，例如，Giordano等人,Nature,1989,339:155-156)。MET的胞外区组织成3个功能区。Sema域还存在于导向蛋白和丛状蛋白中，其覆盖了约500氨基酸的保存序列。它对配体结合和受体二聚化是必需的。PSI域(对于丛状蛋白、导向蛋白和整合素中存在的域)覆盖了从N-末端开始的随后约50个残基。四个IPT(对于丛状蛋白和转录因子所共有的免疫球蛋白-样折叠)域将PSI域连接至跨膜螺旋。MET胞内部分具有了5个关键丝氨酸/酪氨酸残基(Ser975、Tyr1234、Tyr1235、Tyr1349和Tyr1356)，这些残基调控其酶活力或者形成接合体和信号转导蛋白的停泊位点(参见，例如，Trusolino和Comoglio,Nat.Rev.Cancer,2002,2:289-300；Kong-Beltran等人,CancerCell,2004,6:75-84；Trusolino等人,Nat.Rev.Mol.CellBiol.,2010,11:834-848)。已克隆了编码MET激酶的人MET基因，如Cooper等人，Nature,1984,311:29-33所述。一旦配体HGF结合，通过催化酪氨酸残基Tyr1234和Tyr1235的受体二聚化和转磷酸化作用激活MET激酶。C末端尾中Tyr1349和Tyr1356的后续磷酸化作用提供了信号转导接合体和转导蛋白募集的停泊位点。当与丛状蛋白寡聚时，还可以通过导向蛋白以不依赖于HGF的方式激活MET，从而导致MET下游效应因子的刺激。已表明MAPK(包括ERK1/2、JNK和p38)、PI3K-AKT、STAT和NF-κB信号通路的成员是MET信号转导的下游信号转导蛋白(参见，例如，Ponzetto等人,Cell,1994,77:261-271；Trusolino等人,Nat.Rev.Mol.CellBiol.,2010,11:834-848)。对于胚胎形态发生中的多个事件，需要MET功能。功能丧失研究表明MET信号转导支持肝细胞和胎盘滋养母细胞的生长和存活以及神经系统的正确分线(wiring)。此外，MET信号转导在创伤愈合以及肝和肾再生方面起到重要作用(参见，例如，Trusolino等人,Nat.Rev.Mol.CellBiol.,2010,11:834-848)。由于过表达、突变或自分泌配体生产，异常MET激活已涉及一些癌症。研究表明异常MET信号转导不仅对肿瘤生长，而且对肿瘤转移是重要的。需要调节MET的疗法以控制、治疗或预防涉及MET和/或异常MET活性(例如，MET信号转导)或异常MET表达的病况。3.专利技术概述在一个方面，本文提供了抗体(例如，单克隆抗体)，其包括其抗原结合片段，所述抗原结合片段特异性结合至MET，如人MET的胞外域(ECD)。在具体的方面，这些特异性结合至人MET的ECD(例如，人MET-ECD的Sema/PSI域)的抗-MET抗体与作为IgG1同种型相比，作为IgG2同种型时更好地抑制MET磷酸化并且抑制肿瘤细胞增殖或肿瘤生长。本文还提供了包含编码这些抗体的序列的多核苷酸和载体，包含这些多核苷酸或载体的细胞(例如，宿主细胞)和包含这些抗体的组合物、试剂和试剂盒。在另一个方面，本文提供了调节MET活性，例如，抑制MET活性或MET表达水平的方法、这些抗-MET抗体的诊断方法和使用以及治疗方法和使用。在某些方面，本文提供了调节配体-依赖性MET活性的方法。在某些方面，本文提供了调节MET-增强(例如，独立于配体)的MET活性的方法。在一个方面，本文提供了结合至人MET的Sema/PSI域的单克隆抗体或其抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段：(a)抑制细胞中MET的活性，如通过MET磷酸化的抑制所确定的；(b)引起细胞中MET降解；和(c)抑制肿瘤细胞增殖或肿瘤生长；和其中与作为IgG1同种型相比，作为人IgG2同种型时，所述抗体更好地抑制MET磷酸化，引起MET降解或者抑制肿瘤细胞增殖或肿瘤生长。在一个方面，所述单克隆抗体或其抗原-结合片段结合至人MET的Sema域。在某些方面，所述抗体或其抗原结合片段包含：(a)轻链可变区(VL)，其包含如表1中所列的抗体Ab235-Ab237、Ab239或Ab241-Ab255中任一个的VL互补决定区1(CDR1)、VLCDR2和VLCDR3；和(b)重链可变区(VH)，其包含如表2中所列的抗体Ab235-Ab237、Ab239或Ab241-Ab255中任一个的VH互补决定区1(CDR1)、VHCDR2和VHCDR3。在某些实施方式中，所述抗体或其抗原结合片段的VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3分别包含SEQIDNO：1、2和3的氨基酸序列，并且所述抗体或其抗原结合片段的VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3分别包含SEQIDNO：4、5和6的氨基酸序列。在某些实施方式中，所述抗体或其抗原结合片段的VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3分别包含SEQIDNO：7、8和9的氨基酸序列，并且所述抗体或其抗原结合片段的VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3分别包含SEQIDNO：10、11和12的氨基酸序列。在某些实施方式中，所述抗体或其抗原结合片段的VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3分别包含SEQIDNO：13、14和15的氨基酸序列，并且所述抗体或其抗原结合片段的VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3分别包含SEQIDNO：16、17和18的氨基酸序列。在某些实施方式中，所述抗体或其抗原结合片段的VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3分别包含SEQIDNO：25、26和27的氨基酸序列，并且所述抗体或其抗原结合片段的VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3分别包含SEQIDNO：28、17和29的氨基酸序列。在某些实施方式中，所述抗体或其抗原结合片段的VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3分别包含SEQIDNO：72、14和15的氨基酸序列，并且所述抗体或其抗原结合片段的VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3分别包含SEQIDNO：16、73和18的氨基酸序列。在某些实施方式中，所述抗体或其抗原本文档来自技高网...

【技术保护点】
结合至人MET的Sema/PSI域的单克隆抗体或其抗原‑结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段：a.抑制细胞中MET的活性，如通过MET磷酸化的抑制所确定的；b.引起细胞中MET降解；和c.抑制肿瘤细胞增殖或肿瘤生长；和其中与作为IgG1同种型相比，作为人IgG2同种型时，所述抗体更好地抑制MET磷酸化，引起MET降解或者抑制肿瘤细胞增殖或肿瘤生长。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.03.16 US 62/133,789;2015.04.17 US 62/149,4651.结合至人MET的Sema/PSI域的单克隆抗体或其抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段：a.抑制细胞中MET的活性，如通过MET磷酸化的抑制所确定的；b.引起细胞中MET降解；和c.抑制肿瘤细胞增殖或肿瘤生长；和其中与作为IgG1同种型相比，作为人IgG2同种型时，所述抗体更好地抑制MET磷酸化，引起MET降解或者抑制肿瘤细胞增殖或肿瘤生长。2.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：a.轻链可变区(VL)，其包含如表1中所列的抗体Ab235-Ab237、Ab239或Ab241-Ab255中任一个的VL互补决定区1(CDR1)、VLCDR2和VLCDR3；和b.重链可变区(VH)，其包含如表2中所列的抗体Ab235-Ab237、Ab239或Ab241-Ab255中任一个的VH互补决定区1(CDR1)、VHCDR2和VHCDR3。3.根据权利要求2所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3分别包含SEQIDNO：1、2和3的氨基酸序列，并且所述VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3分别包含SEQIDNO：265、5和6的氨基酸序列。4.根据权利要求2所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3分别包含SEQIDNO：7、8和9的氨基酸序列，并且所述VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3分别包含SEQIDNO：266、11和12的氨基酸序列。5.根据权利要求2所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3分别包含SEQIDNO：13、14和15的氨基酸序列，并且所述VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3分别包含SEQIDNO：16、17和18的氨基酸序列。6.根据权利要求2所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3分别包含SEQIDNO：25、26和27的氨基酸序列，并且所述VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3分别包含SEQIDNO：28、73和29的氨基酸序列。7.根据权利要求2所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3分别包含SEQIDNO：72、14和15的氨基酸序列，并且所述VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3分别包含SEQIDNO：16、73和18的氨基酸序列。8.根据权利要求2所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：a.VL，其包含：i.VLCDR1，其包含SASSSVX7YMF的氨基酸序列(SEQIDNO：41)，其中X7是任意氨基酸，例如，N或S；ii.VLCDR2，其包含DTX13X14LAS的氨基酸序列(SEQIDNO：43)，其中X13是任意氨基酸，例如，F或S，并且X14是任意氨基酸，例如，N或D；iii.VLCDR3，其包含QQWSX15YPYT的氨基酸序列(SEQIDNO：44)，其中X15是任意氨基酸，例如，I或N；和b.VH，其包含：i.VHCDR1，其包含X1YWIEW的氨基酸序列(SEQIDNO：36)，其中X1是任意氨基酸，例如，N或S；ii.VHCDR2，其包含EILPGSDX3TKYX4EKFKGK的氨基酸序列(SEQIDNO：38)，其中X3是任意氨基酸，例如，Y或F，并且X4是任意氨基酸，例如，N或S；和iii.VHCDR3，其包含PSTX6PPDC的氨基酸序列(SEQIDNO：40)，其中X6是任意氨基酸，例如，I或V。9.根据权利要求2所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含VL，所述VL包含QIVLTQSPAIMSX43SPGEKVTMTCSASSSVX44YMFWYQQKX45GSSPRLLIYDTX46X47LASGVPVRFSGSGSGTSYSLTISRMEAEDAATYYCQQWSX48IYPYTFGGGTKLEIK的氨基酸序列(SEQIDNO：48)，其中X43是任意氨基酸，例如，T或A，X44是任意氨基酸，例如，N或S，X45是任意氨基酸，例如，A或P，X46是任意氨基酸，例如，F或S，X47是任意氨基酸，例如，N或D，并且X48是任意氨基酸，例如，I或N。10.根据权利要求2所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含VH，所述VH包含QX57QLQQSGAELMKPGASVKISCKATGYX58FSX59YWIEWVKQRPGHGLEWIGEILPGSDX60X61KYX62EKFKGKATFTADTSSNTAYMQLSX63LTSEDSAVYYCARPSTX64PPDCWGQGTTLTVSA的氨基酸序列(SEQIDNO：50)，其中X57是任意氨基酸，例如，V或A，X58是任意氨基酸，例如，I或T，X59是任意氨基酸，例如，N或S，X60是任意氨基酸，例如，Y或F，X61是任意氨基酸，例如，T或I，X62是任意氨基酸，例如，N或S，X63是任意氨基酸，例如，S或N，并且X64是任意氨基酸，例如，I或V。11.根据权利要求2所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：a.VL，所述VL包含QIVLTQSPAIMSX43SPGEKVTMTCSASSSVX44YMFWYQQKX45GSSPRLLIYDTX46X47LASGVPVRFSGSGSGTSYSLTISRMEAEDAATYYCQQWSX48IYPYTFGGGTKLEIK的氨基酸序列(SEQIDNO：48)，其中X43是任意氨基酸，例如，T或A，X44是任意氨基酸，例如，N或S，X45是任意氨基酸，例如，A或P，X46是任意氨基酸，例如，F或S，X47是任意氨基酸，例如，N或D，并且X48是任意氨基酸，例如，I或N；和b.VH，其包含QX57QLQQSGAELMKPGASVKISCKATGYX58FSX59YWIEWVKQRPGHGLEWIGEILPGSDX60X61KYX62EKFKGKATFTADTSSNTAYMQLSX63LTSEDSAVYYCARPSTX64PPDCWGQGTTLTVSA的氨基酸序列(SEQIDNO：50)，其中X57是任意氨基酸，例如，V或A，X58是任意氨基酸，例如，I或T，X59是任意氨基酸，例如，N或S，X60是任意氨基酸，例如，Y或F，X61是任意氨基酸，例如，T或I，X62是任意氨基酸，例如，N或S，X63是任意氨基酸，例如，S或N，并且X64是任意氨基酸，例如，I或V。12.根据权利要求2所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含VL，所述VL包含SEQIDNO：57的氨基酸序列。13.根据权利要求2所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含VH，所述VH包含SEQIDNO：66的氨基酸序列。14.根据权利要求2所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：a.VL，其包含SEQIDNO：57的氨基酸序列；和b.VH，其包含SEQIDNO：66的氨基酸序列。15.根据权利要求2所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含VL，所述VL包含SEQIDNO：58的氨基酸序列。16.根据权利要求2所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含VH，所述VH包含SEQIDNO：67的氨基酸序列。17.根据权利要求2所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：a.VL，其包含SEQIDNO：58的氨基酸序列；和b.VH，其包含SEQIDNO：67的氨基酸序列。18.根据权利要求2所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：a.VL，其包含：i.VLCDR1，其包含SEQIDNO：13或72的氨基酸序列；ii.VLCDR2，其包含SEQIDNO：14的氨基酸序列；iii.VLCDR3，其包含SEQIDNO：15的氨基酸序列；和b.VH，其包含：i.VHCDR1，其包含SEQIDNO：16、28或DX2YMA(SEQIDNO：37)的氨基酸序列，其中X2是任意氨基酸，例如，S或C；ii.VHCDR2，其包含SEQIDNO：17或46或SISSDGGGTYYRDSVKGX5(SEQIDNO：39)的氨基酸序列，其中X5是任意氨基酸，例如，R或不存在；和iii.VHCDR3，其包含SEQIDNO：18或29或EX16X17YX18X19X20YYX21X22X23FX24X25(SEQIDNO：45)的氨基酸序列，其中X16是任意氨基酸，例如，G或R，X17是任意氨基酸，例如，I或Y，X18是任意氨基酸，例如，T或D，X19是任意氨基酸，例如，T或G，X20是任意氨基酸，例如，D或T，X21是任意氨基酸，例如，P或G，X22是任意氨基酸，例如，C或W，X23是任意氨基酸，例如，Y或不存在，X24是任意氨基酸，例如，N或D，并且X25是任意氨基酸，例如，Y或F。19.根据权利要求2所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：a.VL，其包含：i.VLCDR1，其包含SEQIDNO：25的氨基酸序列；ii.VLCDR2，其包含SEQIDNO：26的氨基酸序列；iii.VLCDR3，其包含SEQIDNO：27的氨基酸序列；和b.VH，其包含：i.VHCDR1，其包含SEQIDNO：16、28或DX2YMA(SEQIDNO：37)的氨基酸序列，其中X2是任意氨基酸，例如，S或C；ii.VHCDR2，其包含SEQIDNO：17或46或SISSDGGGTYYRDSVKGX5(SEQIDNO：39)的氨基酸序列，其中X5是任意氨基酸，例如，R或不存在；和iii.VHCDR3，其包含SEQIDNO：18或29或EX16X17YX18X19X20YYX21X22X23FX24X25(SEQIDNO：45)的氨基酸序列，其中X16是任意氨基酸，例如，G或R，X17是任意氨基酸，例如，I或Y，X18是任意氨基酸，例如，T或D，X19是任意氨基酸，例如，T或G，X20是任意氨基酸，例如，D或T，X21是任意氨基酸，例如，P或G，X22是任意氨基酸，例如，C或W，X23是任意氨基酸，例如，Y或不存在，X24是任意氨基酸，例如，N或D，并且X25是任意氨基酸，例如，Y或F。20.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含VL，所述VL包含DIQMTQSPX26SLSASX27GX28X29TIX30CLASADIHSNLAWYQQKPGX31X32PX33LLIYGNNLNDGVPSRFSGX34GX35GTX36X37X38LX39IX40SLQX41EDVX42IYFCQQSYDSPPTFGQGTKLEIK的氨基酸序列(SEQIDNO：47)，其中X26是任意氨基酸，例如，S或G，X27是任意氨基酸，例如，V或L，X28是任意氨基酸，例如，D或E，X29是任意氨基酸，例如，R或T，X30是任意氨基酸，例如，T或E，X31是任意氨基酸，例如，K或N，X32是任意氨基酸，例如，A或S，X33是任意氨基酸，例如，K或Q，X34是任意氨基酸，例如，F或S，X35是任意氨基酸，例如，F或S，X36是任意氨基酸，例如，D或Q，X37是任意氨基酸，例如，F或Y，X38是任意氨基酸，例如，T或S，X39是任意氨基酸，例如，T或K，X40是任意氨基酸，例如，S或N，X41是任意氨基酸，例如，P或S，并且X42是任意氨基酸，例如，A或S。21.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含VH，所述VH包含EVQLVESGGGLVQPGX49SLKLSCAASGFTFSDSYMAWVRQAPX50KGLEWVASISSDGGGTYYRDSVKGRFX51ISRDNAKX52SLYLQMDSLRX53EDTATYYCTTEGIYTTDYYPYCFNYWGX54GX55MVTVSX56的氨基酸序列(SEQIDNO：49)，其中X49是任意氨基酸，例如，G或R，X50是任意氨基酸，例如，G或T，X51是任意氨基酸，例如，T或S，X52是任意氨基酸，例如，S或N，X53是任意氨基酸，例如，T或S，X54是任意氨基酸，例如，Q或H，X55是任意氨基酸，例如，V或T，并且X56是任意氨基酸，例如，S或A。22.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：a.VL，其包含DIQMTQSPX26SLSASX27GX28X29TIX30CLASADIHSNLAWYQQKPGX31X32PX33LLIYGNNLNDGVPSRFSGX34GX35GTX36X37X38LX39IX40SLQX41EDVX42IYFCQQSYDSPPTFGQGTKLEIK的氨基酸序列(SEQIDNO：47)，其中X26是S或G，X27是V或L，X28是D或E，X29是R或T，X30是T或E，X31是K或N，X32是A或S，X33是K或Q，X34是F或S，X35是F或S，X36是D或Q，X37是F或Y，X38是T或S，X39是T或K，X40是S或N，X41是P或S，并且X42是A或S；和b.VH，其包含EVQLVESGGGLVQPGX49SLKLSCAASGFTFSDSYMAWVRQAPX50KGLEWVASISSDGGGTYYRDSVKGRFX51ISRDNAKX52SLYLQMDSLRX53EDTATYYCTTEGIYTTDYYPYCFNYWGX54GX55MVTVSX56的氨基酸序列(SEQIDNO：49)，其中X49是任意氨基酸，例如，G或R，X50是任意氨基酸，例如，G或T，X51是任意氨基酸，例如，T或S，X52是任意氨基酸，例如，S或N，X53是任意氨基酸，例如，T或S，X54是任意氨基酸，例如，Q或H，X55是任意氨基酸，例如，V或T，并且X56是任意氨基酸，例如，S或A。23.根据权利要求22所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含VL，所述VL包含SEQIDNO：59的氨基酸序列。24.根据权利要求22所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含VL，所述VL包含SEQIDNO：52的氨基酸序列。25.根据权利要求22所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含VL，所述VL包含SEQIDNO：53的氨基酸序列。26.根据权利要求10所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含VL，所述VL包含SEQIDNO：54的氨基酸序列。27.根据权利要求22所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含VL，所述VL包含SEQIDNO：55的氨基酸序列。28.根据权利要求22所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含VL，所述VL包含SEQIDNO：56的氨基酸序列。29.根据权利要求22所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含VL，所述VL包含SEQIDNO：61的氨基酸序列。30.根据权利要求22所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含VH，所述VH包含SEQIDNO：68的氨基酸序列。31.根据权利要求22所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含VH，所述VH包含SEQIDNO：63的氨基酸序列。32.根据权利要求22所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含VH，所述VH包含SEQIDNO：64的氨基酸序列。33.根据权利要求22所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含VH，所述VH包含SEQIDNO：65的氨基酸序列。34.根据权利要求22所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含VH，所述VH包含SEQIDNO：70的氨基酸序列。35.根据权利要求22所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：a.VL，其包含SEQIDNO：59的氨基酸序列；和b.VH，其包含SEQIDNO：68的氨基酸序列。36.根据权利要求22所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：a.VL，其包含SEQIDNO：52的氨基酸序列；和b.VH，其包含SEQIDNO：63的氨基酸序列。37.根据权利要求22所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：a.VL，其包含SEQIDNO：53的氨基酸序列；和b.VH，其包含SEQIDNO：63的氨基酸序列。38.根据权利要求22所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：a.VL，其包含SEQIDNO：54的氨基酸序列；和b.VH，其包含SEQIDNO：63的氨基酸序列。39.根据权利要求22所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：a.VL，其包含SEQIDNO：55的氨基酸序列；和b.VH，其包含SEQIDNO：63的氨基酸序列。40.根据权利要求22所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：a.VL，其包含SEQIDNO：56的氨基酸序列；和b.VH，其包含SEQIDNO：63的氨基酸序列。41.根据权利要求22所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：a.VL，其包含SEQIDNO：52的氨基酸序列；和b.VH，其包含SEQIDNO：64的氨基酸序列。42.根据权利要求22所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：a.VL，其包含SEQIDNO：53的氨基酸序列；和b.VH，其包含SEQIDNO：64的氨基酸序列。43.根据权利要求22所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：a.VL，其包含SEQIDNO：54的氨基酸序列；和b.VH，其包含SEQIDNO：64的氨基酸序列。44.根据权利要求22所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：a.VL，其包含SEQIDNO：55的氨基酸序列；和b.VH，其包含SEQIDNO：64的氨基酸序列。45.根据权利要求22所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：a.VL，其包含SEQIDNO：56的氨基酸序列；和b.VH，其包含SEQIDNO：64的氨基酸序列。46.根据权利要求22所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：a.VL，其包含SEQIDNO：52的氨基酸序列；和b.VH，其包含SEQIDNO：65的氨基酸序列。47.根据权利要求22所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：a.VL，其包含SEQIDNO：53的氨基酸序列；和b.VH，其包含SEQIDNO：65的氨基酸序列。48.根据权利要求22所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：a.VL，其包含SEQIDNO：54的氨基酸序列；和b.VH，其包含SEQIDNO：65的氨基酸序列。49.根据权利要求22所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：a.VL，其包含SEQIDNO：55的氨基酸序列；和b.VH，其包含SEQIDNO：65的氨基酸序列。50.根据权利要求22所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：a.VL，其包含SEQIDNO：56的氨基酸序列；和b.VH，其包含SEQIDNO：65的氨基酸序列。51.根据权利要求22所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：a.VL，其包含SEQIDNO：61的氨基酸序列；和b.VH，其包含SEQIDNO：70的氨基酸序列。52.根据权利要求1-51中任一项所述的抗体或其抗原结合片段特异性结合至人MET和猴MET，但不结合至小鼠MET或狗MET。53.根据权利要求1-52中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述MET活性的抑制发生在SNU-5细胞、A549细胞和/或Hop92细胞中。54.根据权利要求53所述的抗体或其抗原结合片段，其中SNU-5细胞中MET活性抑制的IC50在约100pM至约500pM、约25pM至约200pM，或约40pM至约160pM、约50pM至约125pM，或约5pM至约100pM之间。55.根据权利要求53所述的抗体或其抗原结合片段，其中SNU-5细胞中MET活性抑制的最大百分比为至少约10％、20％、30％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或100％。56.根据权利要求55所述的抗体或其抗原结合片段，其中在SNU-5细胞中IgG2同种型的MET活性最大抑制百分比比IgG1同种型的MET活性的最大抑制百分比大1倍、1.2倍、1.3倍、1.4倍、1.5倍、2倍、2.5倍、3倍、3.5倍、4倍、4.5倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍或10倍。57.根据权利要求53所述的抗体或其抗原结合片段，其中A549细胞中MET活性抑制的IC50在约40pM至约250pM，100pM至约500pM，约25pM至约200pM，或约40pM至约160pM，约50pM至约125pM，或约5pM至约100pM之间。58.根据权利要求53所述的抗体或其抗原结合片段，其中Hop92细胞中MET活性抑制的IC50在约100pM至约500pM、约25pM至约200pM，或约40pM至约160pM、约50pM至约125pM，或约5pM至约100pM之间。59.根据权利要求57所述的抗体或其抗原结合片段，其中Hop92细胞中MET活性抑制的IC50比不结合SEMA域的人源化抗-MET抗体或者结合至SEMA域的二价IgG4抗-MET抗体小1倍、1.2倍、1.3倍、1.4倍、1.5倍、2倍、2.5倍、3倍、3.5倍、4倍、4.5倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍、10倍、15倍、20倍、30倍、40倍、50倍、60倍、70倍、80倍、90倍或100倍。60.根据权利要求1-59中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中在MET氨基酸残基Tyr1234和/或Tyr1235确定MET磷酸化。61.根据权利要求1-60中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中在SNU-5细胞、A549细胞、U87MG细胞、H596细胞、Hop92细胞或在肿瘤细胞中发生MET降解的诱导。62.根据权利要求61所述的抗体或其抗原结合片段，其中SNU-5细胞中MET降解诱导的最大百分比为至少约10％、20％、30％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或100％。63.根据权利要求61所述的抗体或其抗原结合片段，其中在SNU-5细胞中IgG2同种型的MET降解最大诱导百分比比IgG1同种型的MET降解的最大诱导百分比大1倍、1.2倍、1.3倍、1.4倍、1.5倍、2倍、2.5倍、3倍、3.5倍、4倍、4.5倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍或10倍。64.根据权利要求1-63中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中在SNU-5肿瘤细胞、EBC-1肿瘤细胞、U87MG肿瘤细胞、A549肿瘤细胞和/或H596肿瘤细胞中发生肿瘤细胞增殖的抑制。65.根据权利要求64所述的抗体或其抗原结合片段，其中SNU-5肿瘤细胞增殖抑制的最大抑制百分比为至少约10％、20％、30％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或100％。66.根据权利要求64所述的抗体或其抗原结合片段，其中IgG2同种型对于SNU-5肿瘤细胞增殖抑制的最大抑制百分比比IgG1的最大抑制百分比大1倍、1.2倍、1.3倍、1.4倍、1.5倍、2倍、2.5倍、3倍、3.5倍、4倍、4.5倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍或10倍。67.根据权利要求64所述的抗体或其抗原结合片段，其中EBC-1肿瘤细胞增殖抑制的最大抑制百分比为至少约10％、20％、30％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或100％。68.根据权利要求64所述的抗体或其抗原结合片段，其中IgG2同种型对于EBC-1肿瘤细胞增殖抑制的最大抑制百分比比IgG1的最大抑制百分比大1倍、1.2倍、1.3倍、1.4倍、1.5倍、2倍、2.5倍、3倍、3.5倍、4倍、4.5倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍或10倍。69.根据权利要求64所述的抗体或其抗原结合片段，其中U87MG肿瘤细胞中肿瘤细胞增殖抑制的IC50在约100nM至约500nM、约25nM至约200nM，或约40nM至约160nM、约50nM至约125nM，或约5nM至约100nM之间。70.根据权利要求64所述的抗体或其抗原结合片段，其中A549肿瘤细胞中肿瘤细胞增殖抑制的IC50在约100nM至约500nM、约25nM至约200nM，或约40nM至约160nM、约50nM至约125nM，或约5nM至约100nM之间。71.根据权利要求64所述的抗体或其抗原结合片段，其中H596肿瘤细胞中肿瘤细胞增殖抑制的IC50在约100nM至约500nM、约25nM至约200nM，或约40nM至约160nM、约50nM至约125nM，或约5nM至约100nM之间。72.根据权利要求1-71中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述肿瘤生长是U87异种移植肿瘤模型、SNU15异种移植肿瘤模型或U87MG正位肿瘤模型。73.根据权利要求1-72中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其抑制细胞上MET和肝细胞生长因子(HGF)之间的相互作用。74.根据权利要求73所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述细胞是A549细胞。75.根据权利要求74所述的抗体或其抗原结合片段，其中A549细胞上MET和HGF之间相互作用的抑制的IC50在约0.01nM至10,000nM，0.01nM至1,000nM，0.1nM至500nM，0.1nM至100nM或0.1nM至50nM之间。76.根据权利要求1-75中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其引起细胞中MET的泛素化。77.根据权利要求76所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述细胞是A549细胞。78.根据权利要求1-77中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其抑制细胞中的MET信号。79.根据权利要求78所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述MET信号是HGF-依赖性的。80.根据权利要求78所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述MET信号是独立于HGF的。81.根据权利要求78-80中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中将MET信号的抑制鉴别为AKT和/或MET磷酸化的抑制。82.根据权利要求78-81中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述细胞是A549细胞。83.根据权利要求1-82中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其抑制HGF-诱导的内皮间充质转化(EMT)。84.根据权利要求1-83中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中通过DU145细胞分散(cellscatter)确定HGF-诱导的EMT的抑制。85.根据权利要求84所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述DU145细胞分散的IC50为约50nM、40nM、30nM、20nM、10nM、5nM、1nM、0.75nM、0.5nM、0.1nM、0.05nM、0.01nM、0.005nM或0.001nM。86.根据权利要求84或85所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述DU145细胞分散是抑制百分比，其为约5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、98％或99％。87.根据权利要求1-86中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中与所述抗体的IgG1同种型相比，所述抗体的IgG2同种型改变了MET二聚体的构型。88.结合至MET的Sema/PSI域的单克隆抗体或其抗原-结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：a.轻链可变区(VL)，其包含如表1中所列的抗体Ab235-Ab255中任一个的VL互补决定区1(CDR1)、VLCDR2和VLCDR3；和b.重链可变区(VH)，其包含如表2中所列的抗体Ab235-Ab255中任一个的VH互补决定区1(CDR1)、VHCDR2和VHCDR3。89.根据权利要求88所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3分别包含SEQIDNO：1、2和3的氨基酸序列，并且所述VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3分别包含SEQIDNO：265、5和6的氨基酸序列。90.根据权利要求88所述的抗体或抗原-结合片段，其中所述VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3分别包含SEQIDNO：7、8和9的氨基酸序列，并且所述VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3分别包含SEQIDNO：266、11和12的氨基酸序列。91.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨艳，斯瑞卡拉·曼迪亚恩，布雷特·罗宾逊，丽达·基梅尔，亚龙·哈达利，蒂莫西·大卫·琼斯，弗朗西斯·约瑟夫·凯尔，罗伯特·乔治·爱德华·霍尔盖特，理查德·韦尔登，
申请(专利权)人：塞尔德克斯医疗公司，
类型：发明
国别省市：美国,US