一种检测绵羊胴体肌肉性状的试剂盒制造技术

本实用新型专利技术提供一种检测绵羊胴体肌肉性状的试剂盒，包括盒盖、盒体和置于盒体内部的衬垫，在所述衬垫上平行且对称设有用于放置冰块的凹槽一和凹槽二，将衬垫分为3排，在衬垫的第一排设有容器孔一和长方型凹槽，第二排横向设有大小一致且均匀排布的四个容器孔，分别为容器孔二、容器孔三、容器孔四和容器孔五，第三排一侧设有两列大小一致、平行且均匀排布的容器孔，每列有两个容器孔，分别为容器孔六、容器孔七、容器孔八和容器孔九，在第三排另一侧设有容器孔十，十个容器孔均为圆柱形，其直径大小为：容器孔十＞容器孔一＞容器孔六＞容器孔二。本实用新型专利技术的试剂盒将检测过程中所使用的多种试剂存放在一起，使用方便，设计合理。

A kit for detecting carcass muscle properties of sheep

The utility model provides a kit for detection of sheep carcass traits, including pad box cover and a box body and a box body, wherein the liner in parallel and symmetrically provided with a groove for placing ice and a groove two, the lining is divided into 3 rows, the container hole is arranged in the first row and a pad a rectangular groove, four container hole second transverse row with the size of uniform and homogeneous arrangement, respectively, two, Kong San, container vessel hole hole four and hole five container container, the container is arranged on one side of the two row third hole size consistent, parallel and uniformly arranged, each column has two container holes were eight container and container container hole hole six, hole seven, hole container nine, in the third row of the other side is provided with a container hole ten, ten containers are cylindrical hole, the diameter size of container vessel hole a hole ten > > six > volume container hole The device hole two. The reagent box of the utility model stores the various reagents used in the detection process, and is convenient for use and reasonable in design.

【技术实现步骤摘要】
一种检测绵羊胴体肌肉性状的试剂盒
本技术涉及一种检测绵羊胴体肌肉性状的试剂盒。
技术介绍
脂肪组织在机体能量储存、糖类代谢和脂肪酸代谢中扮演十分重要的角色。脂联素（Adiponectin，ADIPOQ）是一种脂肪细胞家族因子中的脂肪因子，其主要在白色脂肪组织表达，但在其它组织中也能检测到该脂肪因子，如：棕色脂肪组织、骨髓、肝脏和骨骼肌。脂联素主要通过与脂联素受体（ADIPOR）协同调节其特殊的生理功能，对动物机体的脂肪酸氧化、糖类摄取及胰岛素的分泌调节具有重要的作用。ADIPOQ基因首先在人类3号染色体中发现，全长与17kbp，包含3个外显子和2个内含子，其中，第1外显子，部分第2外显子和第5外显子不参与编码氨基酸，属于UTR区，ADIPOQ基因CDs区共编码247个氨基酸。ADIPOQ基因遗传变异具有独特的生物学功能。研究表明，ADIPOQ基因遗传变异与猪背脂肪厚度、背最长肌脂肪酸链长度，胴体性状及肉质等性状相关；与牛的背膘厚、眼肌面积、大理石花纹和肉质等级具有一定关联性。目前，ADIPOQ基因作为一种与脂肪生长相关的候选基因在国内外广泛研究，并在动物分子遗传育种标记方面加以应用。绵羊胴体肌肉性状相关基因分子标记选种技术基于PCR-SSCP技术对待测绵羊的ADIPOQ基因启动子区进行多态性分析，然后根据检测结果判定携带不同等位基因的胴体肌肉性状的优良，从而有效提高绵羊胴体肌肉性能的评估，加快绵羊的改良进程、提高绵羊的个体经济效益。上述检测过程需要使用多种试剂，因此很需要有一种试剂盒，能够将试剂瓶及主要辅助检测用品集装在一个盒中作为一个单元取用，检测者使用时只需取一次盒即可实施操作，使用完可以存回原盒送检，这将是很方便之举，同时这样也可避免造成二次污染。
技术实现思路
本技术的目的在于避免现有技术的不足之处而提供一种检测绵羊胴体肌肉性状的试剂盒，该试剂盒用于绵羊胴体肌肉性状相关基因分子选种技术，将检测过程中所使用的多种试剂存放在一起，使用方便，能够避免造成二次污染。本技术提供一种检测绵羊胴体肌肉性状的试剂盒，包括盒盖、盒体和置于盒体内部的衬垫，在所述衬垫上平行且对称设有用于放置冰块的凹槽一和凹槽二，将衬垫分为3排，在衬垫的第一排设有容器孔一和长方型凹槽，第二排横向设有大小一致且均匀排布的四个容器孔，分别为容器孔二、容器孔三、容器孔四和容器孔五，第三排一侧设有两列大小一致、平行且均匀排布的容器孔，每列有两个容器孔，分别为容器孔六、容器孔七、容器孔八和容器孔九，在第三排另一侧设有容器孔十，十个容器孔均为圆柱形，其直径大小为：容器孔十＞容器孔一＞容器孔六＞容器孔二。作为优选，所述盒盖和盒体为活动连接或扣合。作为优选，所述第二排的宽度小于另外两排的宽度。作为优选，所述衬垫的厚度在5厘米以上。作为优选，所述衬垫的厚度小于10厘米。作为优选，所述凹槽一和凹槽二的深度一致，均在衬垫厚度的1/2-2/3之间。作为优选，所述容器孔一与长方形凹槽的间距大于2.5厘米。作为优选，所述容器孔六至十的相邻边缘的间距均大于2.5厘米。作为优选，所述十个容器孔的深度均大于衬垫厚度的1/2并小于衬垫厚度的2/3。本技术的试剂盒将检测过程中所使用的多种试剂存放在一起，使用方便，能够避免造成二次污染，设计合理，取用方便。附图说明附图用来提供对本技术的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本技术的实施例一起用于解释本技术，并不构成对本技术的限制。在附图中：图1为4种标准等位基因DNA样本SSCP带型；图2为本技术的检测绵羊胴体肌肉性状的试剂盒；在图2中：盒盖：1，盒体：2，衬垫：3，凹槽一：4，凹槽二：5，容器孔一：6，长方形凹槽：7，容器孔二：8，容器孔三：9，容器孔四：10，容器孔五：11，容器孔六：12，容器孔七：13，容器孔八：14，容器孔九：15，容器孔十：16。具体实施方式以下的实施例便于更好地理解本技术，但并不限定本技术。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为市售。实施例11、试验材料本技术绵羊样品459份，均采自新西兰罗姆尼羊群体，收集具有胴体肌肉性状指标（热胴体重、后腿瘦肉量、腰部瘦肉量、肩部瘦肉量、总瘦肉量、后腿瘦肉比例和肩部瘦肉比例）的DNA血样，采用NaOH两步法提取绵羊基因组DNA。2、引物设计和PCR扩增根据GenBank公布的ADIPOQ基因参考序列（登录号NC—019458.1），应用Primer5.0在线设计特异性引物，对绵羊ADIPOQ基因启动子区进行扩增。引物序列为：ADIPOQ-F：5’-TTCCTGCTTCTGATCTTGACC-3’；ADIPOQ-R：5’-CAGCCTAGAAATTGAATCAGTC-3’。PCR反应体系为：总体积20μL，10×buffer缓冲液2μL，5×Q溶液2μL，3μMMgCl21.2μL，150μMdNTPs1.2μL，0.25μM上下游混合引物1μL，0.5UTaq聚合酶0.1μL，一个用于承载待测样本DNA或阳性对照的1.2mm滤纸小圆盘和12.5μL的ddH2O。PCR扩增条件：94℃预变性2分钟，94℃变性30秒，58℃退火30s，72℃延伸30秒，共37个循环，最后延伸5分钟，得到约372bp大小的PCR产物。3、PCR产物的SSCP检测为保证检测样本等位基因结果的准确性，将等位基因标准DNA样本与待测样本同时进行SSCP电泳，参照标准等位基因DNA样本（ADIPOQ*A、ADIPOQ*B、ADIPOQ*C和ADIPOQ*D）判定待测样本等位基因类型，4种标准等位基因DNA样本SSCP带型如图1所示。4种标准等位基因的核苷酸序列分别为：ADIPOQ*A的标准DNA样的核苷酸序列为：ADIPOQ*B的标准DNA样的核苷酸序列为：对绵羊胴体肌肉生产性能无影响的ADIPOQ*C核苷酸序列为：对绵羊胴体肌肉生产性能无影响的ADIPOQ*D核苷酸序列为：其中，等位基因见表1。表1罗姆尼羊ADIPOQ等位基因碱基突变SSCP电泳方法为：在20μL的PCR工作产物中加入100μLSSCP上样变性缓冲液（98%去离子甲酰胺、10mMEDTA、0.025%溴酚蓝和0.025%二甲苯青）。105℃热变性5分钟后立即置于冰水混合物中，然后将10μL变性产物上样于16×18cm的14%非变性聚丙烯酰胺凝胶（Arc：Bis=37.5:1）中，在300V电压，0.5倍TBE，17℃电泳槽中电泳19h。银染显色后判型、拍照并干燥保存。4、克隆、测序判定等位基因序列根据SSCP检测结果，选取不同基因型的个体利用纯化试剂盒纯化后测序；对所检测到的等位基因只存在于杂合子中的PCR产物，进行克隆纯化后送华大生物公司进行测序。测定结果通过MegAlign软件与等位基因标准DNA核苷酸序列（ADIPOQ*A、ADIPOQ*B、ADIPOQ*C和ADIPOQ*D）进行比对。5、数据分析应用MINTAB（Version16）一般线性混合效应模型（GeneralLinerMixed-effectModels，GLMMs）评估特定等位基因的存在/缺失胴体肉质性状存在影响。对某一特定基因本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测绵羊胴体肌肉性状的试剂盒，包括盒盖、盒体和置于盒体内部的衬垫，其特征在于：在所述衬垫上平行且对称设有用于放置冰块的凹槽一和凹槽二，将衬垫分为3排，在衬垫的第一排设有容器孔一和长方型凹槽，第二排横向设有大小一致且均匀排布的四个容器孔，分别为容器孔二、容器孔三、容器孔四和容器孔五，第三排一侧设有两列大小一致、平行且均匀排布的容器孔，每列有两个容器孔，分别为容器孔六、容器孔七、容器孔八和容器孔九，在第三排另一侧设有容器孔十，十个容器孔均为圆柱形，其直径大小为：容器孔十＞容器孔一＞容器孔六＞容器孔二。

【技术特征摘要】
1.一种检测绵羊胴体肌肉性状的试剂盒，包括盒盖、盒体和置于盒体内部的衬垫，其特征在于：在所述衬垫上平行且对称设有用于放置冰块的凹槽一和凹槽二，将衬垫分为3排，在衬垫的第一排设有容器孔一和长方型凹槽，第二排横向设有大小一致且均匀排布的四个容器孔，分别为容器孔二、容器孔三、容器孔四和容器孔五，第三排一侧设有两列大小一致、平行且均匀排布的容器孔，每列有两个容器孔，分别为容器孔六、容器孔七、容器孔八和容器孔九，在第三排另一侧设有容器孔十，十个容器孔均为圆柱形，其直径大小为：容器孔十＞容器孔一＞容器孔六＞容器孔二。2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述盒盖和盒体为活动连接或扣合。3.根据权利要求1所...

【专利技术属性】
技术研发人员：安清明，罗玉柱，王星，
申请(专利权)人：铜仁学院，
类型：新型
国别省市：贵州,52