一种脐带间充质干细胞制剂质量的评估方法技术

本发明专利技术公开了一种脐带间充质干细胞制剂质量的评估方法，包括如下步骤：S1、抽取一定量(约15ml)脐血样本，进行传染病六项检测；S2、将通过六项检测后的脐血样本进行冻存细胞制品(P2代)检定；S3、进行发放(复苏)细胞检定；S4、按要求完成包装、冻存、运输及有效期的标定。本发明专利技术使得脐带间充质干细胞质量的评估全过程能够标准化、规范化、程序化，产品能被质量管理体系所控制。

Evaluation method of umbilical cord mesenchymal stem cell preparation quality

The invention discloses an umbilical cord mesenchymal stem cell preparation quality evaluation method, which comprises the following steps: S1, extraction amount (about 15ml) of cord blood samples of six infectious disease detection; S2, by six after detection of cord blood samples were frozen cell products (P2) test; S3 to release (recovery), cell test; S4, as required to complete the calibration of packaging, frozen storage, transportation and period of validity. The invention can standardize, standardize and program the whole process of umbilical cord mesenchymal stem cell quality evaluation, and the product can be controlled by the quality management system.

【技术实现步骤摘要】
一种脐带间充质干细胞制剂质量的评估方法
本专利技术涉及医疗领域，具体涉及一种脐带间充质干细胞制剂质量的评估方法。
技术介绍
间充质干细胞用于临床应用研究的种类主要是骨髓间充质干细胞和脐带间充质干细胞，这两类细胞都具有间充质干细胞共同的特点低免疫源性，特别是后者更为明显。脐带中组织结构简单，除了主要的大血管，其余均以结缔组织为主，造成了脐带间充质干细胞基本未与抗原接触，所以免疫源性很低，这极大的增加了临床应用的可能性。脐带来源的间充质干细胞不但能够成为骨髓间充质干细胞的理想替代物，而且具有更大的应用潜能。已经有较多的报道关于脐带间充质干细胞的制备。如何快速、有效地制备高品质的间充质干细胞用于临床和科研是目前干细胞的热点研究内容之一。目前尚未有关于脐带间充质干细胞制剂的质量评估方法的资料公开。
技术实现思路
为解决上述问题，本专利技术提供了一种脐带间充质干细胞制剂质量的评估方法。为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案为：一种脐带间充质干细胞制剂质量的评估方法，包括如下步骤：S1、抽取一定量(约15ml)脐血样本，进行传染病六项检测；S2、将通过六项检测后的脐血样本进行冻存细胞制品(P2代)本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种脐带间充质干细胞制剂质量的评估方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、抽取一定量脐血样本，进行传染病六项检测；S2、将通过六项检测后的脐血样本进行冻存细胞制品检定；S3、进行发放(复苏)细胞检定；S4、按要求完成包装、冻存、运输及有效期的标定。

【技术特征摘要】
1.一种脐带间充质干细胞制剂质量的评估方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、抽取一定量脐血样本，进行传染病六项检测；S2、将通过六项检测后的脐血样本进行冻存细胞制品检定；S3、进行发放(复苏)细胞检定；S4、按要求完成包装、冻存、运输及有效期的标定。2.如权利要求1所述的一种脐带间充质干细胞制剂质量的评估方法，其特征在于，所述六项检测包括HbsAg、抗-HCV、梅毒螺旋体抗体、抗-HIV、巨细胞病毒和ALT的检测；其中前四者采用酶联免疫法检测，检测结果应为阴性；巨细胞病毒采用酶联免疫法检测，IgG和IgM的检测结果应为阴性；ALT采用速率法检测，检测结果应≤40单位。3.如权利要求1所述的一种脐带间充质干细胞制剂质量的评估方法，其特征在于，所述步骤S2具体包括如下步骤：S21、细胞活率的检测；S22、通过倒置显微镜进行细胞形态的观察，收集的贴壁细胞应为成纤维状梭形细胞；S23、间充质干细胞表型特征的检测将样本按条码号顺序排列好，每份样本按照检测抗体种类的需要取流式专用管若干支，分别标记好同型对照管和抗体管；将样本移入专用流式管，500g离心5分钟；弃上清，再加入1mlPBS，充分混匀，500g离心5分钟，弃上清，再加入适当体积的PBS悬浮细胞沉淀；在两管中分别加入样本100μl细胞悬液；在相应的管中分别加入相应量抗体以及相应的同型对照试剂；充分混匀，置4℃冰箱避光孵育30分钟。加入1mlPBS，充分混匀，500g离心5分钟；弃上清液，然后加入1mLPBS清洗，充分混匀，500g离心5分钟；弃上清液，加入适量PBS，充分混匀，调整细胞至合适浓度，随后上机检测；在复苏冻存细胞直接检测或必要时复苏冻存细胞再培养72h后检测中，至少有一个检测点的结果应完全符合以下要求：阳性抗原：CD29，CD44，CD73，CD90，CD105，阳性指标表达率≥95％；阴性抗原：CD14，CD19，CD34，CD45，HLA-DR，阴性指标表达率≤2％；S24、取细胞末次洗涤上清液30ml，依《无菌检测标准操作程序》中血培养仪检测法进行无菌检测，检测结果应符合规定；S25、取细胞悬液100μl，依《支原体检测...

【专利技术属性】
技术研发人员：王一，李岚，牛奔，李帆，张维华，茹杏丽，王晖，高瑛，王岐山，
申请(专利权)人：陕西省人民医院，
类型：发明
国别省市：陕西,61