lnc‑PCDH9‑13:1的检测试剂在制备肝癌诊断的试剂/试剂盒中的应用制造技术

本发明专利技术属于生物医药领域，涉及一种诊断肝癌的试剂及试剂盒。该试剂/试剂盒为长链非编码RNA(long non‑coding RNA,lncRNA)lnc‑PCDH9‑13:1检测试剂，该试剂的检测以唾液等为样本。本发明专利技术首次在唾液中寻找到诊断肝癌敏感特异的生物标志物，对肝癌的早诊早治，降低死亡率，减轻我国的医疗负担具有重大的意义。

LNC PCDH9 13:1 detection reagent used in preparing reagent / kit in the diagnosis of hepatocellular carcinoma

The invention belongs to the field of biological medicine, and relates to a reagent and a kit for diagnosing liver cancer. The reagent kit for long chain / non encoding RNA (long non coding RNA, lncRNA) LNC PCDH9 13:1 detection kit, the detection reagent in saliva samples. It is the first time to find sensitive and specific biomarkers of liver cancer in saliva, which is of great significance for early diagnosis and treatment of liver cancer, reducing mortality, and reducing the burden of medical treatment in china.

【技术实现步骤摘要】
lnc-PCDH9-13:1的检测试剂在制备肝癌诊断的试剂/试剂盒中的应用
本专利技术属于生物医药领域，涉及肝癌标志物lnc-PCDH9-13:1的检测试剂在制备肝癌诊断的试剂/试剂盒中的应用，及以一种诊断肝癌的试剂及试剂盒。
技术介绍
我国是肝癌大国，肝癌的发病率和死亡率都占了全球的一半以上。肝癌的准确诊断具有重要的现实意义。现时，国际上通常用来筛查肝癌的生物标志物是血清AFP(甲胎蛋白)。但其敏感性只有39％至65％，特异性只有76％至94％。由于其检测肝癌的敏感性跟特异性不甚理想，因此美国的治疗指南不推荐血清AFP用于肝癌的诊断。中国跟欧洲的治疗指南都指出，正常个体的AFP水平应小于20ng/ml，大于400ng/ml则可提示肝癌的诊断。而20至400ng/ml则是诊断的“灰色地带”。因此利用AFP筛查肝癌容易导致误诊漏诊。非编码RNA参与了多种疾病尤其是肿瘤发生的调控过程，是近期研究热点之一。如今，已发现人体有超过3万种非编码RNA。非编码RNA虽然不编码蛋白，但在生命中同样其中非常重要的作用。例如直接调节其他基因的表达，如基因的活化、沉默、印迹等。在转录水平和翻译水平调节R本文档来自技高网...

【技术保护点】
lnc‑PCDH9‑13:1的检测试剂在制备肝癌诊断试剂/试剂盒中的应用。

【技术特征摘要】
1.lnc-PCDH9-13:1的检测试剂在制备肝癌诊断试剂/试剂盒中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的lnc-PCDH9-13:1的序列如SEQIDNO：1所示。3.lnc-PCDH9-13:1在筛选抗肝癌药物中的应用；优选地，所述的lnc-PCDH9-13:1的序列如SEQIDNO：1所示。4.一组LncRNA引物，所述LncRNA引物为lnc-PCDH9-13:1的反转录引物，包括SEQIDNO：2和SEQIDNO：3所示的引物对，或者SEQIDNO：4和SEQIDNO：5所示的引物对，或者SEQIDNO：6和SEQIDNO：7所示的引物对。5.权利要求4所述的引物在制备肝癌诊断试剂/试剂盒中的应用。6.一种肝癌诊断试剂/试剂盒，其特征在于，所述的诊断试剂/试剂盒含有检测样本中lnc-PCDH9-13:1表达量的试剂；优选地，所述的lnc-PCDH9-13:1的序列如SEQIDNO：1所示；优选地，所述的样本为组织、血液、唾液；更优选地，为唾液；优选地，所述的检测样本中lnc-PCDH9-13:1表达量为通过qPCR、基因微阵列对lnc-PCDH9-13:1进行定量分析；更优选地，通过qPCR对lncRNAlnc-PCDH9-13:1进行定量分析；优选地，所述的试剂/试剂盒的检测结果为：当样本中的lncRNAlnc-PCDH9-13:1的表达量大于1.85时，肝癌阳性，当样本中的lnc-PCDH9-13:1的表达量小于1.85时，肝癌阴性；更优选地，当唾液中的lnc-PCDH9-13:1的表达量大于1.85时，肝癌阳性；当唾液中的lnc-PCDH9-13:1的表达量小于1.85时，肝癌阴性；更优选地，所述的lnc-PCDH9-13:1的表达量是通过qPCR相对表达量法测定的，其中内参为β-actin。7.根据权利要求6所述的肝癌诊断试剂/试剂盒，其特征在于，含有lnc-PCDH9-13:1的扩增引物；优选地，所述的扩增引物为用于qPCR反应；优选地，所述的扩增引物如SEQIDNO：2和SEQIDNO：3所示，或者如SEQIDNO：4和SEQIDNO：5所示，或者如SEQIDNO：6和SEQIDNO：7所示。8.根据权利要求7所述的肝癌诊断试剂/试剂盒，其特征在于，还含有蛋白酶；优选地，所述的蛋白酶为蛋白酶K；优选地，还含有酸酚氯仿混合物；更优选地，所述的酸酚氯仿混合物为盐酸-苯酚-氯仿混合物；更优选地；苯酚与氯仿的体积比为4.5-5.5:1...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴斌，谢子钧，
申请(专利权)人：中山大学附属第三医院，
类型：发明
国别省市：广东,44