多肽、包含该多肽的检测器件和检测试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及多肽、包含该多肽的检测器件和检测试剂盒。本发明专利技术的多肽由SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列构成。本发明专利技术的多肽、包含该多肽的检测器件和检测试剂盒在疟疾的诊断中是有用的。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术主要涉及多肽、包含该多肽的检测器件及检测试剂盒，属于生物

技术介绍
疟疾是一种急性传染病，是目前世界上对人类危害最为严重的蚊媒寄生原虫病，病原体是疟原虫，症状为周期性发冷发热。由于疟原虫的生活周期复杂，抗原具有阶段特异性等特点，疟疾的防治成为世界性的难题之一。其中，恶性疟疾每年感染3－5亿人，夺取数百万人的生命。2011年11月，世界卫生组织最新统计有2.16亿疟疾病例发生，死亡率高达655,000人。疟原虫主要分布在地球热带、亚热带各国，即非洲、东南亚、南美等地区，约有20亿人口仍生活在疫区，每年死于疟疾的儿童约100万。我国在华南、华中的某些地区，特别是云南和海南省为高发区。因此，疟疾也严重阻碍着发展中国家的经济发展。由于疟疾治疗药物的特殊性，精确快速的诊断不仅能及时发现并治疗疟疾患者，大大降低病死率，也能通过早期排除疟疾，及时挽救感染了其它传染性疾病患者的生命。以此同时，精确快速的早期诊断也是对疟疾实时流行病监测和控制的必要手段。目前，诊断疟疾的经典方法仍为血涂片显微镜检法，该方法对检验者的技能和检验要求很高，远远无法满足非洲和南美洲等发展中国家中绝大多数生活在偏远地区患者的需要。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种对疟疾的诊断有用的多肽、抗该多肽的抗体、包含该多肽的检测器件、包含该多肽或该检测器件的检测试剂盒、以及该多肽在检测疟原虫引起的疾病（例如疟疾）中的用途、该多肽在制备用于检测疟原虫引起的疾病（例如疟疾）的试剂盒或检测器件中的用途。即，本专利技术包含下述技术方案：1.由SEQIDNO：1所示的氨基酸序列构成的多肽。2.一种检测器件，其包括：固体载体，以及连接于该固体载体上的项1所述的多肽。3.根据项2所述的检测器件，其中，所述固体载体是SJ改性硅胶。4.一种检测试剂盒，其包括项1所述的多肽、或者项2或3所述的检测器件。5.抗项1所述的多肽的抗体。6.项1所述的多肽在制备用于检测疟原虫引起的疾病的试剂盒或检测器件中的用途。7.项6所述的用途，其中，所述疾病是疟疾。8.项6或7所述的用途，其中，所述疟原虫是恶性疟。9.编码项1所述的多肽的核酸。10.包含项9所述的核酸的表达载体。11.导入了项10所述的表达载体的宿主细胞。将本专利技术的多肽应用于疟原虫引起的疾病（例如疟疾）的诊断，能够取得令人满意的效果。附图说明图1将多肽通过化学共价固定于SJ改性硅胶表面的示意图。图2对SJ改性硅胶（iPDMS薄膜）的制作过程进行说明的示意图。图3对多肽微阵列化学固定过程进行说明的图。图4说明多肽微阵列点样模式的示意图。图5是显示对健康正常人或非疟疾病人血清进行检测的结果的照片。图6是显示对疟疾病人血清进行检测的结果的照片。具体实施方式本专利技术的多肽本专利技术的多肽是30肽。本专利技术的30肽由SEQIDNO：1所示的氨基酸序列构成，即：GKKNSVVKKEDNKKKGKNNKKKNKNQNLKD。如实施例所示，其对疟疾病人的血清呈阳性反应，而对健康正常人或非疟疾病人血清呈阴性反应。因此，该30肽作为疟原虫(例如恶性疟)引起的疾病（例如疟疾）的诊断工具是有用的。本专利技术的多肽在有市售的情况下，可以使用市售品，此外，还可以适宜采用(1)化学合成方法、或(2)酶反应合成方法等公知方法来获得，其中化学合成更为简便。在化学合成本专利技术的多肽情况下，通过使用肽合成仪合成或者半合成该多肽来进行。作为化学合成方法，可以列举出例如肽固相合成法等。这样合成的肽可以采用常规手段例如离子交换色谱、反相高效液体色谱、亲和色谱等进行纯化。这样的肽固相合成方法以及其后的肽纯化都是本
公知的。此外，在通过酶反应生产本专利技术的多肽的情况下，可以采用例如国际公开小册子WO2004/011653号所述的方法。即，可以这样来生产：将一方的氨基酸或二肽的羧基末端被酯化或酰胺化而得到的氨基酸或二肽、与氨基酸处于游离状态的氨基酸(例如羧基保护的氨基酸)在肽合成酶的存在下进行反应，生成的二肽或三肽。作为肽合成酶，可以列举出：具有生成肽的能力的微生物的培养物、由该培养物分离的微生物菌体、或该微生物的菌体处理物、或该微生物来源的肽合成酶。而且，除了上述的酶方法、化学合成方法以外，有些情况下，本专利技术的多肽还可能是天然存在(但未被分离出来)的。在天然存在的情况下，还可以将其分离出来。本专利技术的核酸、表达载体宿主细胞，以及抗本专利技术的多肽的抗体本专利技术还涉及编码该多肽的核酸(本专利技术的核酸)、包含该核酸的表达载体(本专利技术的表达载体)、导入了该表达载体的宿主细胞(本专利技术的宿主细胞)，它们优选可用于生产本专利技术的多肽。本专利技术的核酸、表达载体、宿主细胞可以采用本领域技术人员公知的方法来制备。本专利技术还涉及抗本专利技术的多肽的抗体，其可用于检测本专利技术的抗体。本专利技术的抗体可以采用本领域技术人员公知的方法来制备。本专利技术的检测器件本专利技术还涉及一种检测器件(本专利技术的检测器件)，其包括固体载体、以及连接于该固体载体上的本专利技术的多肽。在本专利技术中，对固体载体没有特殊限制，只要是作为固体或不溶性材料(例如是可以通过过滤、沉淀、磁性分离等从反应混合物中分离的材料)的载体即可。构成固体载体的材料包括但不限于：硅胶（聚二甲基硅氧烷，PDMS）、纤维素、特氟隆TM、硝基纤维素、琼脂糖、葡聚糖、壳聚糖、聚苯乙烯、聚丙烯酰胺、聚酯、聚碳酸酯、聚酰胺、聚丙烯、尼龙、聚偏二氟乙烯、胶乳、二氧化硅、玻璃、玻璃纤维、金、铂、银、铜、铁、不锈钢、铁氧体、硅晶片、聚乙烯、聚乙烯亚胺、聚乳酸、树脂、多糖类、蛋白(白蛋白等)、碳或它们的组合等。固体载体的形状包括但不要限于：珠子、磁珠、薄膜、微细管、滤膜、板、微量板、碳纳米管、传感器芯片等。正如本
公知的那样，薄膜或板等平坦的固体载体上可以设置凹坑、沟槽、滤膜底部等。在本专利技术中，磁珠可以具有约25nm~约1mm范围的球体直径。在优选的实施方式中，磁珠具有约50nm~约10μm范围的直径。磁珠的尺寸可以根据特定的用途来进行选择。在本专利技术中，由Sepharose等高交联球形琼脂糖制成的珠子具有约24μm~约165μm范围的直径。优选地，高交联球形琼脂糖珠具有约24μm~约44μm范围的直径。高交联球形琼脂糖珠的尺寸可以根据特定的用途来进行选择。具有疏水性表面的固体载体的例子包括可从Polysciences，Warrington，PA或Spherotech，Liberville，IL购买的制品等聚苯乙烯胶乳珠。二氧化硅(SiO2)-处理或二氧化硅(SiO2)基的固体载体的例子包括可从Polysciences，Warrington，PA购买的超常磁性二氧化硅珠等，其可以用于捕捉核酸(例如DNA)。或者，还可以使用可从DynalBiotech购买的M-280等。具有亲水性表面的磁珠可用于捕捉增殖期的细菌细胞、核酸以及其它成分。作为本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种多肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，即：GKKNSVVKKEDNKKKGKNNKKKNKNQNLKD。

【技术特征摘要】
2014.11.10 CN 20141062879501.一种多肽，其氨基酸序列如SEQIDNO：1所示，即：GKKNSVVKKEDNKKKGKNNKKKNKNQNLKD。
2.一种检测器件，其包括：
固体载体，以及
连接于该固体载体上的权利要求1所述的多肽。
3.根据权利要求2所述的检测器件，其中，所述固体载体是SJ改性硅胶。
4.一种检测试剂...

【专利技术属性】
技术研发人员：顾国浩，祁松楠，史进方，蒋敏，王琳，
申请(专利权)人：苏州大学附属第一医院，
类型：发明
国别省市：江苏;32