一种PK‑15细胞培养液及其制备方法、使用方法技术

技术编号：16321834 阅读：64 留言：0更新日期：2017-09-29 16:06

一种PK‑15细胞培养液及其制备方法、使用方法，属于兽用生物制品技术领域。该细胞培养液每1000ml去离子水中含有以下组分：DMEM粉末、黄芪多糖、葛根素、白术内酯Ⅰ、L‑Asp、L‑Lys、胰岛素样生长因子‑I、丙酮酸钠、青霉素和链霉素。本发明专利技术具有以下有益效果：本发明专利技术所使用的PK‑15细胞培养液，大大减少了血清的使用量，降低了细胞培养的成本；提高PK‑15细胞生长速度；增强PCV‑2对PK‑15细胞的敏感性，提高了病毒含量；由本发明专利技术所使用的PK‑15细胞培养液还可以大幅度提高PCV‑2疫苗的免疫原性。

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【技术实现步骤摘要】
一种PK-15细胞培养液及其制备方法、使用方法
本专利技术属于兽用生物制品
，具体涉及一种PK-15细胞培养液及其制备方法、使用方法。
技术介绍
PK-15细胞是PK-15a细胞的克隆系，在体外呈贴壁型生长，可连续传代培养，用于多种病毒的增殖及特性的研究，在猪圆环细胞源疫苗研究中被广泛使用。猪圆环病毒（PCV-2）能够引起断奶仔猪多系统衰竭综合征、皮炎肾病、仔猪传染性先天性震颤等多种疾病，PCV-2不仅可以引起猪的原发性感染，还能对畜体的免疫机能造成损伤，极易引起多种细菌或病毒的继发感染，从而使预防和控制该病的难度越来越大，目前控制PCV-2主要通过使用疫苗进行免疫防控。随着现代生物制品行业的不断发展，对疫苗制造的安全性和有效性要求不断提升，目前通常是在PK-15细胞培养基中添加含有5-10%的新生牛血清培养细胞，繁殖PCV-2制造猪圆环疫苗，但由于血清组分的复杂性和不确定性，以及其中存在病毒等病原微生物污染的潜在风险，影响着病毒疫苗的生产工艺和疫苗质量，且血清使用成本较高、存在批次差异等诸多缺点，使血清在细胞大规模培养中的应用受到限制。由使用血清所带来的诸多缺点，成为动物细胞无血清培养技术研究和应用的发展动力，无血清培养液具有诸多优势：避免血清对细胞的毒性作用和血清源性污染；添加成分相对确定，可用于研究细胞生长、增殖、分化、简化下游目的产物的分离纯化、节约成本；避免血清批次间的差异性等，因此无血清培养液受到人们越来越多的关注。
技术实现思路
针对现有技术存在的问题，本专利技术的目的在于设计提供一种PK-15细胞培养液及其制备方法、使用方法的技术方案。所...

【技术保护点】
一种PK‑15细胞培养液，其特征在于每1000ml 去离子水中含有以下重量的组分：DMEM粉末9‑12 g、黄芪多糖2‑10 mg、葛根素10‑50 ug 、白术内酯Ⅰ1‑10 mg、L‑Asp 5‑50 mg 、L‑Lys 2‑38 mg、胰岛素样生长因子‑I 1‑10 ug、丙酮酸钠10‑40 mg、青霉素5‑10万单位和链霉素5‑20mg。

【技术特征摘要】
1.一种PK-15细胞培养液，其特征在于每1000ml去离子水中含有以下重量的组分：DMEM粉末9-12g、黄芪多糖2-10mg、葛根素10-50ug、白术内酯Ⅰ1-10mg、L-Asp5-50mg、L-Lys2-38mg、胰岛素样生长因子-I1-10ug、丙酮酸钠10-40mg、青霉素5-10万单位和链霉素5-20mg。2.如权利要求1所述的一种PK-15细胞培养液，其特征在于每1000ml去离子水中含有以下重量的组分：DMEM粉末10-11g、黄芪多糖4-8mg、葛根素20-40ug、白术内酯Ⅰ2-8mg、L-Asp20-40mg、L-Lys8-25mg、胰岛素样生长因子-I2-8ug、丙酮酸钠20-30mg、青霉素6-8万单位和链霉素8-12mg。3.如权利要求1或2所述的一种PK-15细胞培养液的制备方法，其特征在于将所述重量的组分充分混合，...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈建军，张秀文，李阳，冷春青，
申请(专利权)人：浙江美保龙生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33

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