一种PK‑15细胞培养液及其制备方法、使用方法技术

技术编号:16321834 阅读:78 留言:0更新日期:2017-09-29 16:06
一种PK‑15细胞培养液及其制备方法、使用方法,属于兽用生物制品技术领域。该细胞培养液每1000ml去离子水中含有以下组分:DMEM粉末、黄芪多糖、葛根素、白术内酯Ⅰ、L‑Asp、L‑Lys、胰岛素样生长因子‑I、丙酮酸钠、青霉素和链霉素。本发明专利技术具有以下有益效果:本发明专利技术所使用的PK‑15细胞培养液,大大减少了血清的使用量,降低了细胞培养的成本;提高PK‑15细胞生长速度;增强PCV‑2对PK‑15细胞的敏感性,提高了病毒含量;由本发明专利技术所使用的PK‑15细胞培养液还可以大幅度提高PCV‑2疫苗的免疫原性。

【技术实现步骤摘要】
一种PK-15细胞培养液及其制备方法、使用方法
本专利技术属于兽用生物制品
,具体涉及一种PK-15细胞培养液及其制备方法、使用方法。
技术介绍
PK-15细胞是PK-15a细胞的克隆系,在体外呈贴壁型生长,可连续传代培养,用于多种病毒的增殖及特性的研究,在猪圆环细胞源疫苗研究中被广泛使用。猪圆环病毒(PCV-2)能够引起断奶仔猪多系统衰竭综合征、皮炎肾病、仔猪传染性先天性震颤等多种疾病,PCV-2不仅可以引起猪的原发性感染,还能对畜体的免疫机能造成损伤,极易引起多种细菌或病毒的继发感染,从而使预防和控制该病的难度越来越大,目前控制PCV-2主要通过使用疫苗进行免疫防控。随着现代生物制品行业的不断发展,对疫苗制造的安全性和有效性要求不断提升,目前通常是在PK-15细胞培养基中添加含有5-10%的新生牛血清培养细胞,繁殖PCV-2制造猪圆环疫苗,但由于血清组分的复杂性和不确定性,以及其中存在病毒等病原微生物污染的潜在风险,影响着病毒疫苗的生产工艺和疫苗质量,且血清使用成本较高、存在批次差异等诸多缺点,使血清在细胞大规模培养中的应用受到限制。由使用血清所带来的诸多缺点,成为动物细胞本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种PK‑15细胞培养液,其特征在于每1000ml 去离子水中含有以下重量的组分:DMEM粉末9‑12 g、黄芪多糖2‑10 mg、葛根素10‑50 ug 、白术内酯Ⅰ1‑10 mg、L‑Asp 5‑50 mg 、L‑Lys 2‑38 mg、胰岛素样生长因子‑I 1‑10 ug、丙酮酸钠10‑40 mg、青霉素5‑10万单位和链霉素5‑20mg。

【技术特征摘要】
1.一种PK-15细胞培养液,其特征在于每1000ml去离子水中含有以下重量的组分:DMEM粉末9-12g、黄芪多糖2-10mg、葛根素10-50ug、白术内酯Ⅰ1-10mg、L-Asp5-50mg、L-Lys2-38mg、胰岛素样生长因子-I1-10ug、丙酮酸钠10-40mg、青霉素5-10万单位和链霉素5-20mg。2.如权利要求1所述的一种PK-15细胞培养液,其特征在于每1000ml去离子水中含有以下重量的组分:DMEM粉末10-11g、黄芪多糖4-8mg、葛根素20-40ug、白术内酯Ⅰ2-8mg、L-Asp20-40mg、L-Lys8-25mg、胰岛素样生长因子-I2-8ug、丙酮酸钠20-30mg、青霉素6-8万单位和链霉素8-12mg。3.如权利要求1或2所述的一种PK-15细胞培养液的制备方法,其特征在于将所述重量的组分充分混合,...

【专利技术属性】
技术研发人员:沈建军张秀文李阳冷春青
申请(专利权)人:浙江美保龙生物技术有限公司
类型:发明
国别省市:浙江,33

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