含油酵母变体、其获得方法及其用于脂质生产的用途技术

本发明专利技术涉及物种Rhodosporidium azoricum的含油酵母变体，其特征在于在已测定的条件下，相对于相同物种的野生型菌株而言，具有更高的生物质产量和细胞内脂质累积，从而可用于更高级的生物燃料的生产。本发明专利技术还涉及一种方法，通过该方法得到物种Rhodosporidium azoricum的所述含油酵母变体。本发明专利技术进一步涉及通过物种Rhodosporidium azoricum的含油酵母的所述变体菌株进行脂质生产。

Oily yeast variants, methods of obtaining them, and their use in lipid production

The invention relates to a variant of oleaginous yeast species Rhodosporidium azoricum, have been characterized at the measurement conditions, compared with wild type strains of the same species, with higher biomass yield and intracellular lipid accumulation, and thus can be used for more advanced biofuel production. The invention also relates to a method of the oleaginous yeast species Rhodosporidium azoricum variants obtained by this method. The variant strain of the invention further relates to oleaginous yeast species by means of Rhodosporidium azoricum for lipid production.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】含油酵母变体、其获得方法及其用于脂质生产的用途本专利技术涉及生物
具体而言，本专利技术涉及物种Rhodosporidiumazoricum的含油酵母变体，其特征为相对于相同物种的野生型菌株而言，在确定的条件下具有更高的生物质产量和细胞内脂质累积。此外，本专利技术涉及获得物种Rhodosporidiumazoricum的所述含油酵母变体的方法。本专利技术进一步涉及通过物种Rhodosporidiumazoricum的所述含油酵母变体进行脂质的生产。如此获得的脂质可以有利地用作合成中间体，特别是在所谓的“绿色化学”领域中或者在生物燃料生产(例如“生物柴油”或“绿色柴油”)中，其可以原样使用，或者在与其他发动机燃料的混合物中使用。目前，通过微生物工艺的脂质生产是由可再生来源的生产方法的有利的备选方法。与由植物进行脂质提取相比，由经济观点来看，微生物过程更廉价，因为它们能以更容易的方式按规模扩大，它们需要较少的人力，并且它们利用了在低成本的底物上进行快速繁殖的微生物有机体的性质，例如由木质纤维素材料水解得到的衍生物。此外，它们不受气候因素影响，并且不会与为食品目的进行土壤的农业开发形成本文档来自技高网...

【技术保护点】
物种Rhodosporidium azoricum的含油酵母变体，其特征在于具有细胞内脂质累积，其于2014年10月10日保藏在Leibniz‑Institut DSMZ‑Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zel lkul turen GmbH(DSMZ),Inhoffenstraβe 7 B 38124 Braunschweig(Germany)，保藏编号为DSM 29495。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.12.31 IT MI2014A0022921.物种Rhodosporidiumazoricum的含油酵母变体，其特征在于具有细胞内脂质累积，其于2014年10月10日保藏在Leibniz-InstitutDSMZ-DeutscheSammlungvonMikroorganismenundZellkulturenGmbH(DSMZ),Inhoffenstraβe7B38124Braunschweig(Germany)，保藏编号为DSM29495。2.根据权利要求1所述的含油酵母变体，其特征为当在富含氮源的培养介质中培养时，以高于或等于其细胞干重的60％的量、优选为62％至70％的量在细胞内进行脂质累积。3.根据权利要求1所述的含油酵母变体，当使用衍生自木质纤维素材料水解得到的底物作为氮源时，优选当所述的底物为得自芦竹(Arundodonax)(常见的甘蔗)的水解产物时，以高于或等于其细胞干重的40％的量、优选为45％至60％的量累积脂质。4.一种用于获得含油酵母变体的方法，所述的含油酵母变体优选地选自：亚罗酵母属的物种(Yarrowiaspp.),假丝酵母属的物种(Candidaspp.),隐球菌属的物种(Cryptococcusspp.),丝孢酵母属的物种(Trichosporonspp.),光滑球拟酵母属的物种(Torulopsisspp.),油脂酵母属的物种(Lipomycesspp.),红酵母属的物种(Rhodotorulaspp.)和红冬孢酵母属的物种(Rhodosporidiumspp.)，所述的方法包括以下步骤：i.将含油酵母菌株的细胞暴露于诱变剂，从而在基因组DNA中产生随机突变；ii.将经过所述诱变剂处理的细胞接种于培养介质中并培育，所述的培育介质的特征为存在浓度为20g/L至100g/L、优选为30g/L至50g/L的至少一种碳源，并且其中存在至少一种氮源，优选浓度为3g/L至40g/L、更优选地5g/L至20g/L；iii.将特征为较低密度的所述的酵母细胞与所述的细胞培养物分离。5.根据权利要求4所述的方法，其中所述方法的步骤ii优选地是在10℃至40℃、更优选地在20℃至30℃的温度下实施16至48个小时的时间。6.根据权利要求4或5所述的方法，其中所述方法的步骤iii包括以下子步骤：a)由所述的培养物收集样品，并加入适量的至少一种增稠剂；b)在低速下离心如此获得的细胞悬液；c)收集所述的离心上清液的较高的级份，以便将特征为较低密度的细胞与所述的细胞培养物的其他部分分离；d)在培养介质中接种在所述方法的子步骤c)中分离的所述上清液级份，并培育，其中所述培养介质的特征为存在浓度为20g/L至100g/L、优选为30g/L至50g/L的至少一种碳源，并且其中存在至少一种氮源，其浓度优选地3g/L至40g/L、更优选为5g/L至20g/L；e)重复a)至d)的子步骤至少2次，优选为至少5至20次；f)分离单个突变体集落。7.根据权利要求6所述的方法，其中所述的子步骤a)是通过向所述的培养物样品中添加山梨醇作为增稠剂，达到浓度至多为1M至3M。8.根据权利要求6或7所述的方法，其中所述的方法的子步骤d)优选地在10℃至40℃、更优选地在20℃至30℃的温度下实施16至48个小时的时间。9.根据权利要求4至8的任意一项所述的方法，其中所用的含油酵母为Rhodosporidiumazoricum。10.根据权利要求4至9的任意一项所述的方法，其中使用所述的方法获得的含油酵母为菌株RhodosporidiumazoricumDMS29495的变体。11.根据权利要求4至10的任意一项所述的方法，其中所述的至少一种氮源被以下物质所替代：i.浓度为3g/L至40g/L、优选为5g/L至20g/L的至少一种硫源，该硫源是无机的或有机的；或者ii.浓度为3g/L至40g/L、优选为5g/L至20g/L的至少一种磷源，该磷源是无机的或有机的。12.根据权利要求4至11的任意一项所述的方法，其中所述的诱变过程是通过以下过程实施的：i.通过将所述的酵母菌株暴露于波长为230nm至260nm的紫外辐射(UV)的物理方...

【专利技术属性】
技术研发人员：G·弗朗佐斯，D·库凯蒂，D·比安基，S·加拉法西，C·孔帕尼奥，
申请(专利权)人：艾尼股份公司，
类型：发明
国别省市：意大利,IT