一种基于自诱导仿生钛化固定化蛋白酶的方法技术

本发明专利技术提供了一种基于自诱导仿生钛化固定化蛋白酶的方法。利用木瓜蛋白酶对钛前驱体二羟基双(乳酸铵)钛仿生钛化的诱导效应，在诱导仿生钛化的过程中实现蛋白酶的固定化，获到以氧化钛为载体的固定化蛋白酶。本发明专利技术克服了现有传统固定化方法存在的固定化过程复杂、酶与载体的生物相容性差、其与载体之间的结合作用相对较弱、固定化酶的稳定性差、使用寿命低、其固定化反应通常较剧烈、容易造成酶的失活、活力降低等缺陷，具有固定化过程简单、条件温和、效率高、固定化酶的酶活回收率与包埋率好等优点。

【技术实现步骤摘要】
一种基于自诱导仿生钛化固定化蛋白酶的方法
本专利技术属于固定化酶制备
，特别涉及一种基于自诱导仿生钛化固定化蛋白酶的方法。
技术介绍
酶的化学本质是蛋白质,其催化作用具有高选择性、高催化活性、反应条件温和、环保无污染等特点。但游离状态的酶对热、强酸、强碱、高离子强度、有机溶剂等稳定性较差,易失活,并且反应后混入催化产物等物质,纯化困难,不能重复使用。为了克服这些问题,酶固定化技术于应运而生。传统的固定化方法有：吸附法、交联法、共价结合法、包埋法等，吸附法、交联法、共价结合法等均具有不同程度的缺陷，如：酶与载体的结合力弱、反应条件较激烈酶活回收率降低较大、酶易失活；与之相比，包埋法具有所需反应条件温和、酶分子不易泄漏、对生物活性单元失活作用小及可固定高浓度的生物活性单元等优点，得到的固定化酶的稳定性得以提高。包埋法所具有得较普遍的适用性，使其近年来得到了广泛的关注。在传统固定化酶方法的基础上,着力研究性能优异的载体材料,已成为固定化酶技术目前最为活跃的研究方向之一。随着材料仿生学的不断发展，固定化酶领域的研究人员将仿生的思想，特别是结构仿生和过程仿生的思想引入到固定化酶载体这种特本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种基于自诱导仿生钛化固定化蛋白酶的方法，其特征在于包括以下步骤：室温下，在固定化反应器中加入5～10mL浓度为0.1～0.3mol/L的钛前驱体溶液，再向固定化反应器中加入20～25mL用pH 6.0～8.0、浓度0.02mol/L～0.12mol/L的缓冲液配制的浓度为12mg/mL～22mg/mL游离蛋白酶溶液，使钛前驱体溶液与蛋白酶溶液的体积比为1:2～1:3；轻轻搅拌5min，5000rpm冷冻离心10min，收集沉淀；蒸馏水洗涤沉淀3次后，冷冻干燥，得到固定化酶。

【技术特征摘要】
1.一种基于自诱导仿生钛化固定化蛋白酶的方法，其特征在于包括以下步骤：室温下，在固定化反应器中加入5～10mL浓度为0.1～0.3mol/L的钛前驱体溶液，再向固定化反应器中加入20～25mL用pH6.0～8.0、浓度0.02mol/L～0.12mol/L的缓冲液配制的浓度为12mg/mL～22mg/mL游离蛋白酶溶液，使钛前驱体溶液与蛋白酶溶液的体积比为1:2～1:3；轻轻搅拌5min，5000rpm冷冻离心10min，收集沉淀...

【专利技术属性】
技术研发人员：李海云，韩文，余艳葵，阮贵华，李子院，
申请(专利权)人：桂林理工大学，
类型：发明
国别省市：广西,45