芽孢杆菌属物种的丝氨酸蛋白酶制造技术

本公开涉及从芽孢杆菌属物种克隆的丝氨酸蛋白酶及其变体。含有丝氨酸蛋白酶的组合物适合用于清洁织物和硬表面，以及用于各种工业应用。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】芽孢杆菌属物种的丝氨酸蛋白酶本公开涉及从芽孢杆菌属的物种(Bacillusspp.)克隆的丝氨酸蛋白酶及其变体。含有丝氨酸蛋白酶的组合物适合用于清洁织物和硬表面，以及用于各种工业应用。丝氨酸蛋白酶是具有启动蛋白质肽键水解的活性位点丝氨酸的酶(EC编号3.4.21)。基于它们的结构，存在两大类丝氨酸蛋白酶：胰凝乳蛋白酶样(胰蛋白酶样)和枯草杆菌蛋白酶样。原型枯草杆菌蛋白酶(EC编号3.4.21.62)最初从枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)获得。枯草杆菌蛋白酶及其同源物是MEROPS分类方案的S8肽酶家族的成员。家族S8的成员在其氨基酸序列中具有顺序为Asp、His和Ser的催化三联体。尽管在工业酶领域很久以来就已经知道丝氨酸蛋白酶，但是仍然需要适合于特定条件和用途的另外的丝氨酸蛋白酶。本专利技术的组合物和方法涉及从芽孢杆菌属的物种克隆的重组丝氨酸蛋白酶及其变体。含有丝氨酸蛋白酶的组合物适合用于清洁织物和硬表面，以及用于各种工业应用。在一些实施例中，本专利技术是枯草杆菌蛋白酶的BspE04637进化枝。在一些实施例中，本专利技术是BspE04637进化枝枯草杆菌蛋白酶的重组本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种枯草杆菌蛋白酶的BspE04637进化枝，所述枯草杆菌蛋白酶的BspE04637进化枝包含含有一个或多个选自以下基序的枯草杆菌蛋白酶或重组多肽或其活性片段：i.DTGIXXXHXDLXXXGGXSVFXXXXXXXXXXDXXGH(SEQ ID NO:31)基序，其中初始D是活性位点天冬氨酸，末端H是活性位点组氨酸，并且X是任何氨基酸；ii.DTGIXXXHXDLXXXGGXSVFXXXXXXDPXXDXXGH(SEQ ID NO:32)基序，其中初始D是活性位点天冬氨酸，末端H是活性位点组氨酸，并且X是任何氨基酸；iii.DTGIXXXHXDLNVXGGXSVFXXXXXXXXXXDXX...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.10.27 US 62/069,1791.一种枯草杆菌蛋白酶的BspE04637进化枝，所述枯草杆菌蛋白酶的BspE04637进化枝包含含有一个或多个选自以下基序的枯草杆菌蛋白酶或重组多肽或其活性片段：i.DTGIXXXHXDLXXXGGXSVFXXXXXXXXXXDXXGH(SEQIDNO:31)基序，其中初始D是活性位点天冬氨酸，末端H是活性位点组氨酸，并且X是任何氨基酸；ii.DTGIXXXHXDLXXXGGXSVFXXXXXXDPXXDXXGH(SEQIDNO:32)基序，其中初始D是活性位点天冬氨酸，末端H是活性位点组氨酸，并且X是任何氨基酸；iii.DTGIXXXHXDLNVXGGXSVFXXXXXXXXXXDXXGH(SEQIDNO:33)基序，其中初始D是活性位点天冬氨酸，末端H是活性位点组氨酸，并且X是任何氨基酸；iv.DTGIXXXHXDLNVXGGXSVFXXXXXXDPXXDXXGH(SEQIDNO:34)基序，其中初始D是活性位点天冬氨酸，末端H是活性位点组氨酸，并且X是任何氨基酸；v.DTGIDXXHXDLNVXGGXSVFXXXXXXXXXXDXXGH(SEQIDNO:35)基序，其中初始D是活性位点天冬氨酸且末端H是活性位点组氨酸，并且X是任何氨基酸；vi.DTGIDXNHXDLNVRGGXSVFTXXXXXDPXXDXXGH(SEQIDNO:36)基序，其中初始D是活性位点天冬氨酸，末端H是活性位点组氨酸，并且X是任何氨基酸；以及vii.DTGIDXNHXDLNVRGGXSVFTXXXXXDPYYDXXGH(SEQIDNO:37)基序，其中初始D是活性位点天冬氨酸且末端H是活性位点组氨酸，并且X是任何氨基酸。2.根据权利要求1所述的枯草杆菌蛋白酶的BspE04637进化枝，其中所述枯草杆菌蛋白酶或重组多肽或其活性片段进一步包含与选自由SEQIDNO:3、6和9组成的组的氨基酸序列具有至少70％氨基酸序列同一性的氨基酸序列。3.根据权利要求1或2所述的枯草杆菌蛋白酶的BspE04637进化枝，条件是所述枯草杆菌蛋白酶和/或重组多肽或其活性片段不包含BAD02409或JP2003325186-0001。4.如上述权利要求中任一项所述的枯草杆菌蛋白酶的BspE04637进化枝，其中所述枯草杆菌蛋白酶和/或重组多肽或活性片段具有蛋白酶活性。5.一种重组多肽或其活性片段，包含与选自由SEQIDNO:3、6和9组成的组的氨基酸序列具有至少80％氨基酸序列同一性的氨基酸序列。6.BspE04637进化枝的一种重组多肽或其活性片段。7.权利要求6所述的重组多肽或其活性片段，其中所述重组多肽或活性片段包含一个或多个选自以下的基序：i.DTGIXXXHXDLXXXGGXSVFXXXXXXXXXXDXXGH(SEQIDNO:31)基序，其中初始D是活性位点天冬氨酸，末端H是活性位点组氨酸，并且X是任何氨基酸；ii.DTGIXXXHXDLXXXGGXSVFXXXXXXDPXXDXXGH(SEQIDNO:32)基序，其中初始D是活性位点天冬氨酸，末端H是活性位点组氨酸，并且X是任何氨基酸；iii.DTGIXXXHXDLNVXGGXSVFXXXXXXXXXXDXXGH(SEQIDNO:33)基序，其中初始D是活性位点天冬氨酸，末端H是活性位点组氨酸，并且X是任何氨基酸；iv.DTGIXXXHXDLNVXGGXSVFXXXXXXDPXXDXXGH(SEQIDNO:34)基序，其中初始D是活性位点天冬氨酸，末端H是活性位点组氨酸，并且X是任何氨基酸；v.DTGIDXXHXDLNVXGGXSVFXXXXXXXXXXDXXGH(SEQIDNO:35)基序，其中初始D是活性位点天冬氨酸且末端H是活性位点组氨酸，并且X是任何氨基酸；vi.DTGIDXNHXDLNVRGGXSVFTXXXXXDPXXDXXGH(SEQIDNO:36)基序，其中初始D是活性位点天冬氨酸，末端H是活性位点组氨酸，并且X是任何氨基酸；以及vii.DTGIDXNHXDLNVRGGXSVFTXXXXXDPYYDXXGH(SEQIDNO:37)基序，其中初始D是活性位点天冬氨酸且末端H是活性位点组氨酸，并且X是任何氨基酸。8.权利要求6或7所述的重组多肽或其活性片段，其中所述重组多肽或其活性片段进一步包含与选自由SEQIDNO:3、6和9组成的组的氨基酸序列具有至少70％氨基酸序列同一性的氨基酸序列。9.权利要求5-8中任一项所述的重组多肽或其活性片段，条件是所述枯草杆菌蛋白酶和/或重组多肽或其活性片段不包含BAD02409或JP2003325186-0001。10.权利要求5-9中任一项所述的重组多肽或其活性片段，其中所述多肽具有蛋白酶活性。11.权利要求10所述的重组多肽或其活性片段，其中所述蛋白酶活性包括酪蛋白水解活性或二甲基酪蛋白水解活性。12.权利要求5-11中任一项所述的重组多肽或其活性片段，其中所述多肽在6至12的pH范围内和/或在55℃至80℃的温度范围内保留其最大蛋白酶活性的至少50％。13.权利要求5-12中任一项所述的重组多肽或其活性片段，其中所述多肽在胁迫条件下在50℃20分钟后保留至少60％的活性。14.权...

【专利技术属性】
技术研发人员：M·科尔克曼，A·H·凯利特史密斯，R·梅耶达尔，L·M·巴别，
申请(专利权)人：丹尼斯科美国公司，
类型：发明
国别省市：美国,US