乳制品中粘红酵母的检测探针、基因芯片和方法技术

本发明专利技术公开了一种乳制品中粘红酵母的检测方法，包括如下步骤：（1）、靶序列的确定；（2）、引物与探针的设计；（3）、模板提取：（4）、RT‑PCR扩增及荧光标记；（5）、芯片制备；（6）、分子杂交；（7）、结果分析。本发明专利技术通过该基因芯片能够在短时间内粘红酵母Rhodotorula glutinis进行定性定量检测，本发明专利技术方法适用于奶源样品、生产中间品、成品等全工艺链上的乳品检测，在大幅缩短乳品货架期同时还可以提供一种生产过程质控的新型检测方法。

【技术实现步骤摘要】
乳制品中粘红酵母的检测探针、基因芯片和方法
本专利技术属于食品安全领域，具体为一种乳制品中粘红酵母的检测探针及基因芯片和方法，将基因芯片技术应用于乳品污染微生物的分类鉴定。
技术介绍
乳制品是一种营养丰富，容易被消化和吸收的天然食品，随着人们生活水平的提高，已经成为生活中常见的食品。但是营养丰富的乳制品也是各种微生物青睐的温床，这导致乳制品的货架期非常有限，比如经巴氏灭菌的乳制品保质期一般不超过7天（巴氏鲜奶占全球液态奶70%的市场份额），近些年市场占有量越来越大的发酵酸奶，其保质期一般也只有21天。另一方面，国家《食品安全法》和《企业生产乳制品许可条件审查细则（2010版）》中明确要求企业必须对所生产、加工的乳制品进行出厂前微生物检验，包括5种指示菌和5种致病菌的检测。目前乳制品企业基本都是采用传统的平板培养法来检测微生物，这种方法的检测周期一般在3~4天左右，甚至有些致病菌不能仅凭菌落形态来判定，需要配合其他生化反应试验做进一步鉴定，这无疑又增加了检测周期。因此，较长的检测周期（完成国标要求检测的10种微生物需要5~6天）和较短乳制品保质期（营养物质没有被破坏的巴氏灭菌乳制品的货本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种乳制品中粘红酵母的检测探针，其特征在于：包括：粘红酵母ITS的检测探针：5’NH3—TTTTTTTTTTTTCGCTGCGTTCTTCATCGATGCGAGAGCC—3’；粘红酵母tubB的检测探针：5’NH3—TTTTTTTTTTTTCAGCGTGTCGCACGCCTCGGTCTCGTG—3’。

【技术特征摘要】
1.一种乳制品中粘红酵母的检测探针，其特征在于：包括：粘红酵母ITS的检测探针：5’NH3—TTTTTTTTTTTTCGCTGCGTTCTTCATCGATGCGAGAGCC—3’；粘红酵母tubB的检测探针：5’NH3—TTTTTTTTTTTTCAGCGTGTCGCACGCCTCGGTCTCGTG—3’。2.一种乳制品中粘红酵母的检测基因芯片，其特征在于：包括权利要求1所述的检测探针。3.一种乳制品中粘红酵母的检测方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）、靶序列的确定：真菌粘红酵母的特异性检测靶序列分别为：粘红酵母ITS：AAGGATCATTAGTGAATCTAGGACGTCCAACTTAACTTGGAGTCCGAACTCTCACTTTCTAACCCTGTGCATCTGTTAATTGGACTAGTAGCTCTTCGGAGTGAACCGCCATTCACTTATAAACACAAAGTCTATGAATGTATACAAATTTATAACAAAACAAAACTTTCAACAACGGATCTCTTGGCTCTCGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATACGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACCTTGCGCTCCTTGGTATTCCGAGGAGCATGCCTGTTTGAGTGTCATGAAATCTTCAACCCACCTCTTTCTTAGTGAATCTGGTGGTGCTTGGTTTCTGAGCGCTGCTCTGCTTCGGCTTAGCTCGTTCGTAATGCATTAGCATCCGCAACCGAACTTCGGATTGACTTGGCGTAATAGACTATTCGCTGAGGATTCTAGTTTACTAGAGCCGAGTTGGGTTAAAGGAAGCTCCTAATCCTAAAGTCTATTTTTTTGATTAGATCTCAAATCAGGTAGGACTACCCGCTGAACTTAA粘红酵母tubB：GGCGCCGAGCTCGTCGACTCGATCCTCGACCAGCTGCACCACGAGACCGAGGCGTGCGACACGCTGCAGGGCTTCCAGATGGTGCACTCGGTCGGCGGCGGGACCGGGTCGGAGCTCGGGACGCTCATCCTCAGCAAGATCCGCGAGGAGGTGCGTCTCTGCGGCTCTCTCTCGCTTATCTCTCTGCTGTTCCCCGTCGATGGTCGATCGGTGACGCTCTAGCACTCGCCTGCAGTTCCCCGACCGCATGCTCGCGACCTACTCGGGTGTGCCGTCGCCCAAGGTGTGCGAGAC...

【专利技术属性】
技术研发人员：李瑶，范晓军，李敏，聂凡雨，刘剑，
申请(专利权)人：太原格因生物科技有限公司，太原理工大学，
类型：发明
国别省市：山西,14