本发明专利技术涉及长链非编码RNA XLOC_000090在肺癌中的鉴定和用途。长链非编码RNA XLOC_000090表达基因的核苷酸序列为SEQ ID No.1。本发明专利技术探讨了XLOC_000090表达与NSCLC侵袭转移和预后的相互关系。通过基因芯片技术筛选出10对肺癌组织及其对应的正常肺组织中差异表达的lncRNA，其中发现XLOC_000090在肺癌中的表达明显高于正常肺组织中的表达。因此，本发明专利技术公开的长链非编码RNA XLOC_000090表达基因可以用于检测肺癌细胞是否转移方面。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医学
，涉及XLOC_000090表达与NSCLC侵袭转移和预后的相互关系，更具体的说是一种长链非编码RNAXLOC_000090在肿瘤中的鉴定和用途。
技术介绍
肺癌目前是世界上发病率和死亡率最高的恶性肿瘤。非小细胞肺癌（non-smallcelllungcancer，NSCLC）在肺癌中约占了80%-85%，其5年生存率仅为15%左右，NSCLC之所以有如此高的死亡率，是因为早起缺乏特异性诊断方法而难以发现，确诊时70%-80%的患者已出现远处转移，失去手术机会。如何有效地预防和治疗手术后非小细胞肺癌的复发和转移，已成为亟待解决地重要问题。大量的研究发现，在人类基因组中，仅不到2%的转录产物具有蛋白质编码功能，其余大部分均为非编码RNA（non-codingRNA，ncRNA），根据核苷酸序列的长度，一般将长度>200个核苷酸的ncRNA定义为长链非编码RNA（longnon-codingRNA，lncRNA）。随着近年来研究的深入，人们发现lncRNA参与了表观遗传、转录及转录后调控等多种途径的基因调控，尤其是肿瘤的发生、发展过程与肿瘤的增殖、侵袭、转移等生物学行为密切相关，成为近些年来研究的热点。我们通过基因芯片技术筛选出10对肺癌组织及其对应的正常肺组织中差异表达的lncRNA，其中发现XLOC_000090在肺癌中的表达明显高于正常肺组织中的表达，检索Pubmed及相关数据库发现，XLOC_000090在肿瘤中的功能未见报道。
技术实现思路
本专利技术探讨了XLOC_000090表达与NSCLC侵袭转移和预后的相互关系。为此本专利技术公开了一种长链非编码RNAXLOC_000090表达基因，其特征在于RNAXLOC_000090基因的核苷酸序列为SEQIDNo.1。本专利技术进一步公开了长链非编码RNAXLOC_000090表达基因在用于检测肺癌细胞是否转移方面的应用。特别是治疗非小细胞肺癌治疗靶点药物中的应用。本专利技术公开的长链非编码RNAXLOC_000090表达基因序列如下：ATTTGACCCTCTGCAGGAGGTGTGCTGAATGTCCCATTCCCCGGTGCTGCCAGCTCCTCAGAGCTCTGTAGGTTACCCCGTGAGACCTTCTCCCTGCACGCCTTTTTTTCTCTAATAGAAATACCTGCTACCTGTTGCCTTCTTCCCTGCAGGATCACAAGCGCTTGCCCAGTGCCTGGCATAGAGGCGGCCATAGCTGGACTCCTACCCTGTTCCAGATGAGGAAACTGCCGCTCAGAGACGGCAGCCGACCCAGCCAAGGCCGCACAGCCAGGATTCAAAGCCATACCGCTCAGCTCCTGCCTCCAGGCTCTGCCTTTGCATGTGGCTTCTCCTGGCTCCTGGACCCTTCCCCGGCCCTCCCAGCTGGCTGTGCTGTGACAGTGGGCGGGGGAGTGCCAAGGCTCTGCCCTGCCCCCCGCCCTTGGCATCTCCGGTCAATATGGCACTCACAGCTCCCTGGGCATGGACCCCCTCCTGCCATCCCCACTTAAAGTGAT附图说明：图1为XLOC_000090在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义；其中a为XLOC_000090在癌和正常组织中的表达；b为XLOC_000090在不同肿瘤大小中的表达；c为XLOC_000090在阳性和阴性淋巴结中的表达；d为XLOC_000090在不同分期中的表达；图2为XLOC_000090对细胞增殖能力的影响；其中a为抑制XLOC_000090后对A549细胞增殖能力的影响；b过表达XLOC_000090后对A549细胞增殖能力的影响；图3为上调或下调XLOC_000090对A549细胞克隆形成能力的影响；图4为XLOC_000090对细胞迁移能力的影响，其中（A）为过表达XLOC_000090后对A549细胞迁移的影响；（B）抑制XLOC_000090后对A549细胞迁移的影响；（C）过表达XLOC_000090后对H1299细胞迁移的影响；（D）抑制XLOC_000090后对Calu3细胞迁移的影响；图5为XLOC_000090对细胞迁移和侵袭能力的影响，其中为（A）抑制XLOC_000090后对A549细胞迁移和侵袭的影响；（B）抑制XLOC_000090后对Calu3细胞迁移和侵袭的影响；（C）过表达XLOC_000090后对A549细胞迁移和侵袭的影响；（D）过表达XLOC_000090后对H1299细胞迁移和侵袭的影响；图6为裸鼠尾静脉注射过表达XLOC_000090的A549细胞后，肺表面的转移结节和对照组之间的比较。具体实施方式下面通过具体的实施方案叙述本专利技术。除非特别说明，本专利技术中所用的技术手段均为本领域技术人员所公知的方法。另外，实施方案应理解为说明性的，而非限制本专利技术的范围，本专利技术的实质和范围仅由权利要求书所限定。对于本领域技术人员而言，在不背离本专利技术实质和范围的前提下，对这些实施方案中的物料成分和用量进行的各种改变或改动也属于本专利技术的保护范围。本专利技术所用原料及试剂均有市售。实施例11资料与方法1.1一般资料收集2008年2月至2010年12月天津医科大学肿瘤医院118例非小细胞肺癌患者癌组织及其对应的正常肺组织（外科手术切除病理证实为非小细胞肺癌，全体患者均签署了知情同意书，随访资料完整并建立患者临床病历资料数据库）。纳入标准：（1）经完全性手术切除（肺叶切除术或全肺切除术加肺门/纵膈淋巴结清扫术）；（2）且病理证实为非小细胞肺癌。排除标准：（1）术前化疗或放疗；（2）手术切缘阳性；（3）术后1个月内死亡的非小细胞肺癌患者。基于纳入和排除标准，共有118例非小细胞肺癌患者纳入了本研究。所有患者均为中国人。其中男76例，女42例；年龄31～79岁，平均(58.0±9.4)岁。肿瘤分期根据第七版的TNM分期如下：I期45例，II期29例，III期40例，IV期4例。末次随访日期为2010年12月，中位随访时间达46.0个月。1.2细胞系和主要试剂人肺癌细胞株A549、Calu3和H1299购于中国典型培养物保藏中心；胎牛血清购于美国Gibco公司；RPMI-1640和MEM培养基购于美国Hyclone公司，SYBRGreenPCR试剂盒购于美国Thermo公司；Transwell小室购于康宁生命科学有限公司；XLOC_000090的shRNA购于OriGene公司。1.3细胞培养人肺癌细胞株A549、Calu3和H1299的培养条件为含有10%胎牛血清的RPMI-1640或MEM培养基，37℃下在含有5%CO2的培养箱中培养。1.4细胞转染用表达XLOC_000090的慢病毒分别转染A549和H1299细胞，用表达特异性抑制XLOC_000090基因shRNA(shorthairpinRNA)的慢病毒转染病毒转染A549和Calu3细胞。1.5RT-PCR应用实时定量RT-PCR检测转染细胞和组织中XLOC_000090的表达，转染后48h收集各组细胞，利用TriZol法本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种长链非编码RNA XLOC_000090表达基因，其特征在于RNA XLOC_000090基因的核苷酸序列为SEQ ID No.1。
【技术特征摘要】
1.一种长链非编码RNAXLOC_000090表达基因，其特征在于RNAXLOC_000090基因的核苷酸序列为SEQIDNo.1。2.长链非编码RNAXLO...
【专利技术属性】
技术研发人员：王长利，张彬，张华，
申请(专利权)人：天津医科大学肿瘤医院，
类型：发明
国别省市：天津;12
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