人DNAJC24基因的用途及相关产品制造技术

本发明专利技术属于生物医药研究领域，具体涉及人DNAJC24基因作为靶标在制备肺癌治疗药物或者在制备肺癌诊断药物中的用途。本发明专利技术经过广泛而深入的研究发现，采用RNAi方法下调人DNAJC24基因的表达后可有效地抑制肺癌细胞的增殖、促进细胞凋亡，可以有效地控制肺癌的生长进程。本发明专利技术提供的siRNA或者包含该siRNA序列的核酸构建体、慢病毒能够特异性抑制肺癌细胞的增殖速率、促进肺癌细胞凋亡、抑制肺癌细胞克隆、抑制肺癌细胞侵袭、抑制肺癌细胞转移、抑制肺癌生长，从而治疗肺癌，为肺癌治疗开辟新的方向。

The use of human dnajc24 gene and related products

【技术实现步骤摘要】
人DNAJC24基因的用途及相关产品
本专利技术属于生物医药研究领域，具体涉及人DNAJC24基因的用途及相关产品。
技术介绍
白喉酰胺是一种独特的组氨酸翻译后修饰，仅在翻译伸长因子-2(EEF2)中发现，这种修饰从古细菌到人类都十分保守，是白喉毒素(DT)和外毒素A使EEF2ADP-核糖基化和失活的靶点，而DNAJC24是参与EEF2白喉酰化的其中一个酶。与DNAJC24相关的疾病是Aniridia1，其相关途径包括蛋白质的γ-羧化、羟脯氨酸的形成和芳基硫酸酯酶的活化和代谢。有研究发现许多急性淋巴细胞白血病患者对免疫毒素HA22抵抗，在一株HA22抵抗的ALL细胞株上发现，由于DANJC24基因启动子区的高甲基化，使得其表达水平显著降低，无法使EEF2蛋白白喉酰化，从而抑制了HA22的作用(ImmunotoxinresistanceviareversiblemethylationoftheDPH4promoterisauniquesurvivalstrategy.WeiH,etal.ProcNatlAcadSciUSA.2012May1；109(18):6898-903)。肺癌是发病率和死亡率增长最快、对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。肺癌包括小细胞肺癌(SCLC)和非小细胞肺癌(NSCLC)。NSCLC占肺癌中的85％癌症病例，通过组织病理学异质性研究又可将其进一步分为三类，包括腺癌(ADC)，鳞状细胞癌(SCC)，和大细胞癌。目前还未有DNAJC24基因用于肺癌治疗的相关报道。r>
技术实现思路
为了克服现有技术中所存在的问题，本专利技术的目的在于提供人DNAJC24基因的用途及相关产品。为了实现上述目的以及其他相关目的，本专利技术采用如下技术方案：本专利技术的第一方面，提供人DNAJC24基因作为靶标在制备肺癌治疗药物或者在制备肺癌诊断药物中的用途。所述人DNAJC24基因作为靶标在制备肺癌治疗药物具体是指：将DNAJC24基因作为作用对象，对药物或制剂进行筛选，以找到可以抑制人DNAJC24基因表达的药物作为肺癌治疗备选药物。如本专利技术所述的DNAJC24基因小分子干扰RNA(siRNA)即是以人DNAJC24基因为作用对象筛选获得的，可用作具有抑制肺癌细胞增殖作用的药物。除此之外，诸如抗体药物，小分子药物等也可将DNAJC24基因作为作用对象。所述将人DNAJC24基因作为靶标用于制备肺癌诊断药物具体是指：将DNAJC24基因表达产物作为一项肺癌诊断指标应用于肺癌诊断药物的制备。所述肺癌治疗药物为能够特异性抑制DNAJC24基因的转录或翻译，或能够特异性抑制DNAJC24蛋白的表达或活性的分子，从而降低肺癌细胞中DNAJC24基因的表达水平，达到抑制肺癌细胞的增殖、生长、分化和/或存活的目的。所述通过DNAJC24基因制备获得的肺癌治疗药物或者肺癌诊断药物包括但不限于：核酸分子、碳水化合物、脂类、小分子化学药、抗体药、多肽、蛋白或干扰慢病毒。所述核酸包括但不限于：反义寡核苷酸、双链RNA(dsRNA)、核酶、核糖核酸内切酶III制备的小干扰RNA或者短发夹RNA(shRNA)。所述肺癌治疗药物的施用量为足够降低人DNAJC24基因的转录或翻译，或者足够降低人DNAJC24蛋白的表达或活性的剂量。以使人DNAJC24基因的表达至少被降低50％、80％、90％、95％或99％。采用前述肺癌治疗药物治疗肺癌的方法，主要是通过降低人DNAJC24基因的表达水平抑制肺癌细胞的增殖来达到治疗的目的。具体的，治疗时，将能有效降低人DNAJC24基因表达水平的物质给药于患者。在一种实施方式中，所述DNAJC24基因的靶标序列如SEQIDNO：1所示。具体为：5’-AAGTACAGATGTACCAGCA-3’。本专利技术的第二方面，提供DNAJC24抑制剂在制备至少具备以下功效之一的产品中的用途：治疗肺癌；抑制肺癌细胞的增殖速率；促进肺癌细胞凋亡；抑制肺癌细胞克隆；抑制肺癌细胞侵袭；抑制肺癌细胞转移；抑制肺癌生长。所述产品必然包括DNAJC24抑制剂，并以DNAJC24抑制剂作为前述功效的有效成分。所述产品中，发挥前述功用的有效成分可仅为DNAJC24抑制剂，亦可包含其他可起到前述功用的分子。亦即，DNAJC24抑制剂为所述产品的唯一有效成分或有效成分之一。所述产品可以为单成分物质，亦可为多成分物质。所述产品的形式无特殊限制，可以为固体、液体、凝胶、半流质、气雾等各种物质形式。所述产品主要针对的对象为哺乳动物。所述哺乳动物优选为啮齿目动物、偶蹄目动物、奇蹄目动物、兔形目动物、灵长目动物等。所述灵长目动物优选为猴、猿或人。所述产品包括但不限于药物、保健品、食品等。所述DNAJC24抑制剂可以为核酸分子、抗体、小分子化合物。如本专利技术实施例列举的，所述DNAJC24抑制剂可以为降低肺癌细胞中DNAJC24基因表达的核酸分子。具体的，可以是双链RNA或shRNA。本专利技术的第三方面，提供了一种治疗肺癌的方法，为向对象施用DNAJC24抑制剂。所述的对象可以为哺乳动物或哺乳动物的肺癌细胞。所述哺乳动物优选为啮齿目动物、偶蹄目动物、奇蹄目动物、兔形目动物、灵长目动物等。所述灵长目动物优选为猴、猿或人。所述肺癌细胞可以为离体肺癌细胞。所述对象可以是罹患肺癌的患者或者期待治疗的肺癌的个体。或者所述对象为肺癌患者或者期待治疗肺癌的个体的离体肺癌细胞。所述DNAJC24抑制剂可以在接受肺癌治疗前、中、后向对象施用。本专利技术第四方面公开了一种降低肺癌细胞中DNAJC24基因表达的核酸分子，所述核酸分子包含双链RNA或shRNA。其中，所述双链RNA中含有能够与DNAJC24基因杂交的核苷酸序列；所述shRNA中含有能够与DNAJC24基因杂交的核苷酸序列。进一步的，所述双链RNA包含第一链和第二链，所述第一链和所述第二链互补共同形成RNA二聚体，并且所述第一链的序列与DNAJC24基因中的靶序列基本相同。所述DNAJC24基因中的靶序列即为核酸分子用于特异性沉默DNAJC24基因表达时，被所述核酸分子识别并沉默的mRNA片段所对应的DNAJC24基因中的片段。进一步的，所述双链RNA的靶序列如SEQIDNO：1所示。具体为：5’-AAGTACAGATGTACCAGCA-3’。更进一步的，所述双链RNA第一链的序列如SEQIDNO：2所示。具体为5’-AAGUACAGAUGUACCAGCA-3’。进一步的，所述双链RNA为小干扰RNA(siRNA)。SEQIDNO：2为以SEQIDNO:1所示的序列为RNA干扰靶序列设计的、针对人DNAJC24基因的小干扰RNA的一条链，另一条链即第二链的序列与第一链序列互补，该siRNA可以起到特异性沉默肺癌细胞中内源DNA本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.人DNAJC24基因作为靶标在制备肺癌治疗药物或者在制备肺癌诊断药物中的用途。/n

【技术特征摘要】
1.人DNAJC24基因作为靶标在制备肺癌治疗药物或者在制备肺癌诊断药物中的用途。


2.DNAJC24抑制剂在制备至少具备以下功效之一的产品中的用途：
治疗肺癌；
抑制肺癌细胞的增殖速率；
促进肺癌细胞凋亡；
抑制肺癌细胞克隆；
抑制肺癌细胞侵袭；
抑制肺癌细胞转移；
抑制肺癌生长。


3.根据权利要求2所述的用途，其特征在于，还包括以下特征中的一项或多项：
1)所述DNAJC24抑制剂是指对DNAJC24具有抑制效果的分子；
2)所述DNAJC24抑制剂为产品的唯一有效成分或有效成分之一；
3)所述DNAJC24抑制剂选自双链RNA、shRNA、抗体或小分子化合物。


4.根据权利要求3所述的用途，其特征在于，还包括以下特征中的一项或多项：
1)所述shRNA或双链RNA靶序列如SEQIDNO：1所示；
2)所述双链RNA包含第一链和第二链，所述第一链和所述第二链互补共同形成RNA二聚体，所述第一链的序列如SEQIDNO：2所示；
3)所述shRNA的核苷酸序列如SEQIDNO：3所示。


5.一种降低肺癌细胞中DNAJC24基因表达的核酸分子，所述核酸分子包含：
a.双链RNA，所述双链RNA中含有能够与DNAJC24基因杂交的核苷酸序列；或者
b.shRNA，所述shRNA中含有能够与DNAJC24基因杂交的核苷酸序列；
其中，所述双链RNA包含第一链和第二链，所述第一链和所述第二链互补共同形成RNA二聚体，并且所述第一链的序列与DNA...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭华，陈鹏，刘志勇，林丽，陈璐，陈丽维，罗艺，刘东明，张翠翠，
申请(专利权)人：天津医科大学肿瘤医院，
类型：发明
国别省市：天津;12