鼠抗人CD61单克隆抗体杂交瘤细胞株、单克隆抗体及其制备方法和应用、流式检测试剂技术

本发明专利技术公开了一种鼠抗人CD61单克隆抗体杂交瘤细胞株、单克隆抗体及其制备方法和应用、流式检测试剂，属于生物工程技术领域。本发明专利技术以人外周血白细胞为免疫原免疫Balb/c小鼠，采用细胞融合技术，利用免疫细胞化学和流式间接免疫荧光法筛选杂交瘤细胞，应用免疫沉淀‑质谱法对单克隆杂交瘤细胞产生的抗体进行特异性鉴定，经Western Blot验证，获得一株能稳定分泌鼠抗人CD61单克隆抗体的杂交瘤细胞株ⅡD5G8，保藏编号为CGMCC No.13300。采用动物体内诱生法制备单抗，鉴定抗体重链为IgG1，轻链为kappa型，抗体纯化后经FITC标记可用于流式直标免疫荧光检测人外周血血小板CD61抗原表达。

【技术实现步骤摘要】
鼠抗人CD61单克隆抗体杂交瘤细胞株、单克隆抗体及其制备方法和应用、流式检测试剂
本专利技术涉及一种鼠抗人CD61单克隆抗体杂交瘤细胞株，同时还涉及由该杂交瘤细胞株分泌产生的鼠抗人CD61单克隆抗体和FITC标记的单克隆抗体，以及上述单克隆抗体的制备方法和应用，此外还涉及包含上述单克隆抗体的流式检测试剂，属于生物工程

技术介绍
CD61别名CD61A、GPIIb/IIIa或整合素β3链，分子量为110kDa，表达于血小板、巨核细胞及巨噬细胞上。CD61属于整合素β亚单位，其配体及相关分子式纤维连接蛋白、纤维蛋白原、纤维蛋白溶酶原、凝血酶原、TSP、玻璃连接蛋白、vWF、腱生蛋白、MMP-2、层黏蛋白及骨桥蛋白。CD41/CD61是血小板活化时出现的玻璃连接蛋白、纤维原蛋白、纤维蛋白、vWF的受体，与血小板凝集有关、CD51/CD61是玻璃连接蛋白、纤维蛋白原、纤维蛋白、vWF、TSP的受体，与细胞的粘附反应相关。临床上可用于Glanzmann血小板无力症、巨核细胞白血病、特发性血小板减少性紫癜的诊断。公布号CN101200708A的专利技术专利公开了鼠抗人CD41单克隆抗体本文档来自技高网...

【技术保护点】
鼠抗人CD61单克隆抗体杂交瘤细胞株，其特征在于：所述杂交瘤细胞株为ⅡD5G8，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号：CGMCC No.13300，保藏日期：2016年12月05日。

【技术特征摘要】
1.鼠抗人CD61单克隆抗体杂交瘤细胞株，其特征在于：所述杂交瘤细胞株为ⅡD5G8，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号：CGMCCNo.13300，保藏日期：2016年12月05日。2.如权利要求1所述杂交瘤细胞株分泌的鼠抗人CD61单克隆抗体。3.如权利要求2所述单克隆抗体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将杂交瘤细胞株接种至小鼠腹腔，采集腹水后提纯抗体，即得。4.FITC标记的单克隆抗体，其特征在于：采用FITC标记如权利要求2所述单克隆抗体得到。5.FITC标记的单克隆抗体的制备方法，...

【专利技术属性】
技术研发人员：张振强，张钟允，王爱萍，宋军营，曾华辉，孙向东，袁永，闫敏，刘文弟，
申请(专利权)人：河南中医药大学，
类型：发明
国别省市：河南,41