一种具有抑制血管内皮生长因子受体信号传导的化合物制造技术

一种具有抑制血管内皮生长因子受体信号传导的化合物，涉及医药领域，具体涉及一种苯并噁唑类药物，具体为2‑芳基苯并噁唑芳酰胺化合物。该化合物有非常高的抑制肿瘤细胞生长的活性，尤其对于血管表皮生长因子受体2亚型高表达的人结肠癌细胞的生长具有显著的抑制效果，可用于抗肿瘤药物。

【技术实现步骤摘要】
一种具有抑制血管内皮生长因子受体信号传导的化合物
本专利技术涉及医药领域，具体涉及一种苯并噁唑类药物。
技术介绍
肿瘤是细胞异常表达的产物,它分为良性和恶性肿瘤。目前，恶性肿瘤已经成为威胁人类健康的一大杀手。近年来，全球患癌症人数急剧增长，预计2025年全世界因癌症死亡人数可能增至1900万。传统的肿瘤治疗方法都有不同程度的毒副反应，有时还会产生耐受性以及出现并发症，很难从根本上治疗肿瘤。癌症致死的主要原因之一是癌症晚期肿瘤细胞会发生转移。目前认为肿瘤细胞转移主要以三种形式：第一，肿瘤细胞浸入血管内壁，形成转移灶；第二，通过淋巴循环系统，进而进入淋巴-血液循环系统形成转移灶；第三，直接从肿瘤母体脱落，进入周边组织。肿瘤的生长分为无血管的缓慢生长期和有血管的快速增殖期。肿瘤需要新生血管供应营养才能高速增殖，如果没有新生血管，原生肿瘤一般不会超过1-2mm，一旦有新生血管生成，肿瘤细胞将会发生转移，继而导致患者死亡。血管内皮生长因子(VEGF)，也称通透性因子(VPF)，它是促进血管生成众多介导因子中最为重要的生长因子。它不仅在胚胎形成、细胞迁移和血管新生的过程中起至关重要的调节作用，而且对血管生长有很强的诱导作用。肿瘤细胞分泌出的VEGF需要通过与血管内皮细胞生长因子受体(VEGFR)结合，才能使血管产生一系列的刺激作用，而血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR-2)是VEGF的最主要受体，也是血管新生最主要的介导因子。VEGFR-2与VEGF结合的时候显示出很强的酪氨酸激酶的活性，引起内皮细胞增殖与转移，诱导血管向肿瘤实体生长，进入肿瘤细胞的吸氧范围，最终形成包裹着肿瘤实体的毛细血管网络，从而为肿瘤生长提供优越的生长环境并最终致使肿瘤转移。由此可见，血管内皮细胞增殖依赖于VEGFR-2，切断VEGFR-2与下游蛋白的信号传导能够有效地抑制血管新生。目前研究已表明在肿瘤细胞中VEGFR-2的异常表达和肿瘤的生长、迁移都有关，所以阻断VEGF/VEGFR-2信号通路可以有效的干扰实体肿瘤血管的新生，导致生长中的肿瘤细胞所需要的血液流动缓慢，甚至使肿瘤细胞因缺少营养而停止增长。因此，VEGFR-2激酶便成为抗肿瘤血管新生治疗中较为理想的靶点。目前,VEGFR-2信号途径的小分子抑制剂，第一代是索拉菲尼(Sorafenib)和舒尼替尼(Sunitinib)，此外还有阿西替尼(Axitinib)、帕唑帕尼(Pazopanib)等的小分子抑制剂已上市，还有至少100个的候选小分子药物正在进行不同阶段的临床试验。寻找新型化学结构，抑制VEGFR-2的药物先导化合物是目前世界各大制药公司及科研院所的热门课题。
技术实现思路
本专利技术目的是提供一种新的具有抑制血管内皮生长因子受体信号传导作用的新化合物。为实现以上目的，本专利技术通过以下技术方案予以实现。一种具有抑制血管内皮生长因子受体信号传导的化合物，其特征在于该化合物为2-芳基苯并噁唑芳酰胺化合物，具有如下结构：其中R1，R2，R3，R4，R5，R6选择H，Me，OMe，F，Cl，Br中的任意一种为其取代基；n＝0或1。优选的，上述2-芳基苯并噁唑芳酰胺化合物有以下37种结构，具体如下表2。表2上表中，序号为优选化学结构式的编号，表中R1，R2，R3，R4，R5，R6所对应的为该化学结构式所选择的取代基。本专利技术化合物的合成反应如下所示：具体包括以下步骤：(1)2-芳基苯并噁唑(化合物3)的合成。将2,4二氨基苯酚(化合物1)和取代苯甲酸(化合物2)溶于多聚磷酸(PPA)中，搅拌加热至170℃反应12h，TLC检测原料反应完毕，停止搅拌，用浓KOH溶液中和至中性，有黑褐色的沉淀生成，抽滤得到黑褐色的固体。黑褐色固体溶解于50mL乙酸乙酯中，分别用水50×2mL和食盐水50mL洗涤。有机相用无水硫酸钠干燥后，用硅胶柱层析分离得黄色或者淡黄色棉花状2-芳基苯并噁唑(化合物3)。(2)目标产物制备。在50mL圆底烧瓶中，加入取代苯甲酸或取代苯乙酸(化合物4)，溶于N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中，再依次加入HOBT、EDCI和TEA，然后在常温下磁力搅拌器搅拌10min左右，再加入用DMF溶解的2-苯基苯并噁唑(化合物3)，常温搅拌，反应2-4h，TLC检测原料反应完毕，停止搅拌，加入乙酸乙酯萃取，用稀盐酸洗涤2次，有机相用无水硫酸钠干燥，用硅胶柱层析分离可得到得黄色、白色固体目标产物。本专利技术的化合物用于抗肿瘤药物，所述肿瘤包括但不限于结肠癌、十二指肠癌、前列腺癌、乳腺癌、黑素瘤、导管癌、肝癌、胰腺癌、肾癌、子宫内膜癌、胃癌、非小细胞肺癌、神经恶性肿瘤和血液恶性肿瘤。本专利技术2-芳基苯并噁唑芳酰胺的新化合物展示有非常高的抑制肿瘤细胞生长的活性，尤其对于血管表皮生长因子受体2亚型高表达的人结肠癌细胞的生长具有显著的抑制效果，其IC50值能达到7.6μM左右，而且在鸡胚尿囊膜模型中具有良好的抗血管生成活性，具有较好的抗VEGF刺激HUVEC后细胞增殖的能力以及抗VEGF刺激HUVEC后增殖的特异性。具体实施情况如下。1、对上述37种化合物(表2中的5-1至5-37化合物)中的部分化合物体外细胞水平的抗HCT116、SW480、MDA-MB-231进行实验。以SRB染色法检测细胞活力，观察样品对肿瘤细胞增殖的影响，以评价样品的抗肿瘤效果。采用的阳性参照化合物为舒尼替尼(Sunitinib)和索拉菲尼(Sorafenib)。细胞需要接种于96孔板，过夜培养，加入样品(T)，同时做不加对照样(C)和加药前对照(T0)。加药前对照(T0)的细胞加入TCA进行固定，保留备用。添加样本(T)和无对照样品(C)的细胞继续培养48小时后再固定。全部固定好的细胞以SRB染液染色，再用醋酸溶液洗去游离的染料，空气干燥后加入Tris碱，振荡溶解混匀后490nM测定OD值。依据OD值计算生长率，实验结果如表1。如果T≥T0，生长率＝(T-T0)/(C-T0)×100％；如果T＜T0，(T-T0)/T0×100。初筛时每一个样品单浓度设双复孔，重复两次，生长抑制率大于50％的样品测定IC50值，测定时每个样品梯度稀释五个浓度，每个浓度设双复孔。Tabel1.化合物对细胞株抑制活性IC50(μg/mL)实验结果表明：这类2-芳基苯并噁唑酰胺类化合物是一类具有较好活性的肿瘤生长抑制剂，对SW480的抑制活性较为明显。2、进行鸡胚法筛选抗血管生成化合物实验，实验步骤如下：(1)制备琼脂糖颗粒。首先，受试样品溶解于分析纯的DMSO中备用，然后在79℃时，把备用液与2％的琼脂糖溶液混合制成10μL的琼脂糖颗粒(质量为5-100μg)。(2)受精鸡蛋的培养。在温度为37.5℃和相对湿度为62％的自动孵化的培养箱里培养受精鸡蛋。培养70h和移除8mL的鸡蛋白后，在鸡蛋壳上打开一个小口，可以在蛋壳上发现正在生长的萌发层。然后，用透明的胶带把这个小口封闭后，受精鸡蛋又被送回到相对湿度为90％不转向的培养箱里。(3)抗血管生成实验。培养75h后，把琼脂糖颗粒放置在血管区域，24h后，可以抓获样品处理区的抗血管生成的图片。(4)把得到的图片与阳性对照样的抑制图片进行对比，血管较细与对照样相似的被看做是有积极的抑制活性。由结果图本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种具有抑制血管内皮生长因子受体信号传导的化合物，其特征在于该化合物为2‑芳基苯并噁唑芳酰胺化合物，具有如下结构：

【技术特征摘要】
1.一种具有抑制血管内皮生长因子受体信号传导的化合物，其特征在于该化合物为2-芳基苯并噁唑芳酰胺化合物，具有如下结构：其中R1，R2，R3，R4，R5，R6选择H，Me，OMe，F，Cl，Br中的任意一种为其取代基；n＝0或1。2.如权利要求1所述的一种具有抑制血管内皮生长因子受体信号传导的化合物，其特征在于所述的2-芳基苯并噁唑芳酰胺化合物有以下37种结构，具体如下表2：表23.如权利要求1所述的一种具有抑制血管内皮生长因子受体信号传导的化合物，其特征在于该化合物的制备工艺具体如下：(1)2-芳基苯并噁唑的合成：将2,4二氨基苯酚和取代苯甲酸溶于多聚磷酸(PPA)中，搅拌加热至170℃反应12h，TLC检测原料反应完毕，...

【专利技术属性】
技术研发人员：金毅，刘玉文，杨庆益，张继虹，林军，
申请(专利权)人：云南大学，
类型：发明
国别省市：云南,53