本发明专利技术属于基因的功能与应用领域。以神经元特异性TRAF6基因敲除小鼠以及TRAF6过表达小鼠为实验对象，通过小鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤造成脑卒中模型进行研究，结果表明与对照组小鼠相比，TRAF6基因敲除小鼠梗死体积明显降低，神经功能明显好转，死亡神经细胞数量减少；TRAF6基因过表达小鼠梗死体积明显增加，神经功能明显恶化，死亡神经细胞数量增多。体外细胞实验表明，腺病毒介导的TRAF6干扰可抑制原代皮层神经元细胞发生缺氧/复氧损伤，抑制神经元细胞凋亡。因此，TRAF6具有恶化神经功能的作用，能加重促进脑卒中的发展，将为研究预防、缓解和/或治疗脑卒中疾病的新靶点和新策略提供了理论依据和临床基础。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于基因的功能与应用领域，特别涉及TRAF6作为药物靶标在筛选预防、缓解和/或治疗缺血性脑卒中的药物中应用，以及TRAF6的抑制剂在制备预防、缓解和/或治疗缺血性脑卒中疾病的药物中应用。
技术介绍
数据显示，脑卒中在中国已成为第一位死亡原因，给中国造成了沉重的经济负担且有逐年上升的趋势。脑卒中主要分缺血性脑卒中和出血性脑卒中两大类，其中缺血性卒中占卒中患者总数的60％～80％。[1]缺血性脑卒中系由各种原因所致的局部脑组织区域血液供应障碍，导致脑组织缺血缺氧性病变坏死，进而产生临床上对应的神经功能缺失表现。缺血性脑卒中的病理生理改变主要涉及以下几个因素：兴奋性毒性、氧化应激、炎症反应、细胞凋亡。在缺血性卒中发生后，脑组织由于能量代谢障碍而导致兴奋性氨基酸如谷氨酸大量且迅速的释放，并伴有兴奋性氨基酸的再摄取障碍。大量聚集的谷氨酸过度激活一系列下游的信号通路，包括钙超载、活性氧的产生。活性氧物质比如过氧化氢、羟自由基、超氧根离子等会导致脂质过氧化、线粒体和DNA损伤、激活或抑制许多炎症反应、细胞凋亡、细胞坏死相关的信号通路。[2]与此同时，缺血的脑组织会释放损伤相关模式分子如热休克蛋白、ATP、硫酸乙酰肝素、DNA、RNA等，进而在趋化因子和粘附分子的调节下产生无菌性炎症反应。[3,4]缺血性脑卒中其病因可分为以下5类：大动脉粥样硬化、心源性、穿支动脉疾病、其他病因、病因不确定。[5]缺血性脑卒中的治疗主要包括：溶栓、抗血小板、抗凝、降纤、扩容等。目前已发现的TRAF家族包含(TRAF1-7)7个蛋白。它们的羧基末端都有共同的结构域，它们作为衔接蛋白参与调控细胞凋亡、细胞生长和细胞对压力的反应。[6]除此之外，TRAF6还参与调控一系列生物学活动，包括：适应性免疫、固有免疫、骨组织代谢和淋巴结、乳腺、皮肤、中枢神经系统的生长。[7]近来，有研究证实TARF6参与动脉粥样硬化的发生[8]，以及在心机肥厚的过程中发挥重要作用。[9]参考文献：[1]中华医学会神经病学分会脑血管病学组急性缺血性脑卒中诊治指南撰写组.中国急性缺血性脑卒中诊治指南2014[J].中华神经科杂志,2015,48(4):246-57.[2]CHAMORROA,DIRNAGLU,URRAX,etal.Neuroprotectioninacutestroke:targetingexcitotoxicity,oxidativeandnitrosativestress,andinflammation[J].TheLancetNeurology,2016,15(8):869-81.[3]CHENGY,NUNEZG.Sterileinflammation:sensingandreactingtodamage[J].NaturereviewsImmunology,2010,10(12):826-37.[4]GELDERBLOMM,LEYPOLDTF,STEINBACHK,etal.Temporalandspatialdynamicsofcerebralimmunecellaccumμlationinstroke[J].Stroke；ajournalofcerebralcircμlation,2009,40(5):1849-57.[5]ADAMSHP,JR.,BENDIXENBH,KAPPELLELJ,etal.Classificationofsubtypeofacuteischemicstroke.Definitionsforuseinamμlticenterclinicaltrial.TOAST.TrialofOrg10172inAcuteStrokeTreatment[J].Stroke；ajournalofcerebralcircμlation,1993,24(1):35-41.[6]BRADLEYJR,POBERJS.Tumornecrosisfactorreceptor-associatedfactors(TRAFs)[J].Oncogene,2001,20(44):6482-91.[7]WUH,ARRONJR.TRAF6,amolecμlarbridgespanningadaptiveimmunity,innateimmunityandosteoimmunology[J].BioEssays:newsandreviewsinmolecμlar,cellμlaranddevelopmentalbiology,2003,25(11):1096-105.[8]POLYKRATISA,VANLOOG,XANTHOΜLEAS,etal.Conditionaltargetingoftumornecrosisfactorreceptor-associatedfactor6revealsopposingfunctionsofToll-likereceptorsignalinginendothelialandmyeloidcellsinamousemodelofatherosclerosis[J].Circμlation,2012,126(14):1739-51.[9]JIYX,ZHANGP,ZHANGXJ,etal.TheubiquitinE3ligaseTRAF6exacerbatespathologicalcardiachypertrophyviaTAK1-dependentsignalling[J].Naturecommunications,2016,7(11267.
技术实现思路
为解决临床防治脑卒中疾病现有技术的缺陷和不足，本专利技术的目的是确定TRAF6基因的表达与脑卒中疾病之间的相互关系。提供一种TRAF6作为药物靶标在筛选防治脑卒中疾病的药物中的应用，进而提供一种TRAF6的抑制剂在制备防治脑卒中疾病的药物中的应用。本专利技术的目的通过下述技术方案实现：本专利技术以神经元特异性TRAF6基因敲除小鼠以及转基因小鼠为实验对象，通过小鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤造成脑卒中模型，研究TRAF6基因与脑卒中的关系，结果表明与对照组相比，TRAF6基因敲除小鼠梗死体积明显降低，神经功能明显好转，死亡神经细胞数量减少；TRAF6基因过表达小鼠梗死体积明显增加，神经功能明显恶化，死亡神经细胞数量增多。体外细胞实验表明，腺病毒介导的TRAF6干扰可保护原代皮层神经元细胞，减轻缺氧/复氧损伤的发生，会抑制神经元细胞凋亡。这提示TRAF6具有恶化神经功能的作用，能加重促进脑卒中的发展，为研究预防、缓解和/或治疗脑卒中疾病的新靶点和新策略提供了理论依据和临床基础。因此，TRAF6基因可作为药物靶点，构建TRAF6基因过表达的体外细胞模型或动物模型，用于筛选预防、缓解和/或治疗脑卒中疾病的药物；TRAF6基因也可作为基因治疗中的靶基因，设计并制备预防、缓解和/或治疗脑卒中疾病的药物和/或生物学试剂，通过基因工程技术达到预防、缓解和/或治疗脑卒中疾病的目的。例如以TRAF6为靶基因，设计可干扰TRAF6表达的双链siRNA，通过化学方法合成以后，注射入人体通过RNA干扰的方法使XX基因沉默来治疗脑卒中疾病；还可以设计并构建TRAF6的突变体，注本文档来自技高网...
【技术保护点】
TRAF6基因作为药物靶标在筛选保护神经功能的药物中的应用。
【技术特征摘要】
1.TRAF6基因作为药物靶标在筛选保护神经功能的药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述的药物是抑制TRAF6基因表达的药物。3.TRAF6基因作为药物靶标在筛选预防、缓解和/或治疗脑卒中疾病的药物中的应用。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述的药物是抑制T...
【专利技术属性】
技术研发人员：李红良，折志刚，
申请(专利权)人：武汉大学，
类型：发明
国别省市：湖北;42
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。