一种植物中高效筛选CRISPR/CAS9基因编辑系统候选sgRNA系统及应用技术方案

本发明专利技术公开了一种CRISPR/CAS9系统候选sgRNA靶位点高通量筛选系统及其应用，所述测试系统包括：(1)用于同时表达多个候选sgRNA的质粒；(2)用于表达CAS9的质粒；(3)利用拟南芥及水稻原生质体瞬时表达系统快速高通量鉴定候选sgRNA靶位点切割效率。CRISPR/CAS9系统在敲除或编辑基因之前，选择可以高效切割的靶序列至关重要，短时间内验证多个候选sgRNA靶位点的切割效率，从而选择最佳的sgRNA提高敲除的成功效率，不仅可以降低工作成本，还可以提高工作效率。

【技术实现步骤摘要】
一种植物中高效筛选CRISPR/CAS9基因编辑系统候选sgRNA系统及应用
本专利技术涉及一种植物高效筛选CRISPR/CAS9基因编辑系统候选sgRNA系统及应用，可利用拟南芥(双子叶植物)、水稻(单子叶植物)瞬时表达系统，快速高效筛选可有效用于编辑植物基因组的sgRNA靶位点。技术背景基因组编辑技术是人类改造生物基因组的重要技术，在农业、医学及科研等领域有巨大的应用价值。CRISPR/CAS9因其简单高效成为目前最常用的基因组编辑系统。它是由一种来自细菌及古细菌中降解入侵的病毒或其他外源的DNA序列的免疫机制改造而来。它包括三个要素：CAS9蛋白、cr(CRISPR-derivedRNA)RNA以及tracr(trans-activatingcrRNA)RNA。在CRISPR/CAS9系统中，crRNA通过碱基配对与tracrRNA结合形成tracrRNA/crRNA复合物，此复合物引导核酸酶CAS9蛋白在与crRNA配对的序列靶位点剪切双链DNA。而通过人工设计这两种RNA，可以改造形成具有引导作用的sgRNA(singleguideRNA)，足以引导CAS9对DNA的定本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种CRISPR/CAS9系统候选sgRNA切割效率筛选系统，其特征在于测试系统包括：(1)用于同时表达多个sgRNA的质粒；(2)用于表达CAS9的质粒。

【技术特征摘要】
1.一种CRISPR/CAS9系统候选sgRNA切割效率筛选系统，其特征在于测试系统包括：(1)用于同时表达多个sgRNA的质粒；(2)用于表达CAS9的质粒。2.如权利要求1所述CRISPR/CAS9工作效率高通量测试系统，其特征在于能够在同一次...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑天慧，
申请(专利权)人：江苏贝瑞利生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32