The invention relates to the technical field of screening new gene methods. The method comprises the following steps: according to the clustering of known genes and new genes of similar analysis to get at least one pair of primers for the first of the new gene; step two: for detection of samples of DNA as template, using the primers were amplified by PCR PCR amplification products; step three: the PCR amplification the product was cloned; step four: the cloning sequence analysis, in order to obtain a new gene. By using the method of the invention, the probability of screening new genes is greatly improved, the operation steps are simplified, and the high throughput screening is realized.
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及筛选新基因的
技术介绍
在生物学领域，随着科学技术的发展，各种新基因的筛选，特别是有靶标活性的新基因的筛选是推动科学进步、发展应用的重要手段。然而，靶标新基因的筛选具有操作繁琐、样本量大等特点，因此，依靠传统的筛选方法耗时耗力，并且容易重复筛选到已知的现有基因，所以传统的筛选方法还具有筛选率低的缺点。为了提高筛选的靶标新基因的几率，有必要开发出一种新的筛选靶标基因的方法。
技术实现思路
因此，本专利技术提供了一种筛选新基因的方法，其包括如下步骤：步骤一：根据与新基因同类的已知基因进行聚类分析获得至少一对用于扩增所述新基因的第一引物；步骤二：以待检测样品的DNA为模板，利用所述引物进行PCR扩增得到PCR扩增产物；步骤三：将所述PCR扩增产物进行克隆；步骤四：对所述克隆进行分析，以获得新基因。通过使用本专利技术的方法，大大提高了筛选新基因的几率，并且简化了操作步骤，实现了高通量地筛选。并且一般来讲，在步骤三中获得的克隆一般为多个。在一个具体实施例中，所述第一引物位于所述已知基因的保守区，且成对的所述第一引物扩增的区域为所述已知基因的具有活性的可变区。并且用于扩增所述新基因的通用引物对中的碱基可以存在简并碱基。在一个具体实施例中，在所述步骤一中还包括至少一条用于特异性抑制成对的所述第一引物扩增所述已知基因的第二引物；优选所述第二引物位于所述已知基因的可变区；...
【技术保护点】
一种筛选新基因的方法，其包括如下步骤：步骤一：根据与新基因同类的已知基因的聚类分析获得至少一对用于扩增所述新基因的第一引物；步骤二：以待检测样品的DNA为模板，利用所述引物进行PCR扩增得到PCR扩增产物；步骤三：将所述PCR扩增产物进行克隆；步骤四：对所述克隆进行序列分析，以获得新基因。
【技术特征摘要】
1.一种筛选新基因的方法，其包括如下步骤：
步骤一：根据与新基因同类的已知基因的聚类分析获得至少一对用于扩增所述新基因
的第一引物；
步骤二：以待检测样品的DNA为模板，利用所述引物进行PCR扩增得到PCR扩增产物；
步骤三：将所述PCR扩增产物进行克隆；
步骤四：对所述克隆进行序列分析，以获得新基因。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第一引物位于所述已知基因的保守
区，且成对的所述第一引物扩增的区域为所述已知基因的具有活性的可变区。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，在所述步骤一中还包括至少一条用于
特异性抑制成对的所述第一引物扩增所述已知基因的第二引物；优选所述第二引物位于所
述已知基因的可变区；特别优选所述第二引物的Tm值大于所述第一引物的Tm值。
4.根据权利要求1-3中任意一项所述的方法，其特征在于，在所述步骤四中，利用基因
测序和/或PCR-RFLP对...
【专利技术属性】
技术研发人员：束长龙，张杰，张风娇，耿丽丽，彭琦，宋福平，
申请(专利权)人：中国农业科学院植物保护研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11
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