The invention discloses a specific methylation detection primer and a diagnostic kit for endometriosis, and relates to the field of biotechnology. According to the invention of endometriosis in the genome of SF 1 gene designed primers for the amplification and detection of endometriosis related kit. Methylation specific PCR. Amplified by PCR using the primer and kit treated samples DNA test after bisulfite modification, according to information SF methylation sites 1 gene sequencing of PCR products, according to the methylation information to determine whether the sample is occurred in patients with endometriosis samples, so as to realize the diagnosis of endometrial endometriosis. The primers or kits provided by the invention can early, objectively, sensitively and stably diagnose endometriosis so as to carry out prompt and targeted treatment and improve the quality of life of women of child-bearing age.
【技术实现步骤摘要】
一种特异性甲基化检测引物及子宫内膜异位症诊断试剂盒
本专利技术涉及生物
，尤其涉及一种特异性甲基化检测引物及子宫内膜异位症诊断试剂盒。
技术介绍
子宫内膜异位症(endometriosis，内异症)是引起盆腔疼痛和不孕的常见因素,是指具有生长功能的子宫内膜组织在子宫腔被覆粘膜以外的其他部位生长、浸润、反复出血,可形成结节及包块。子宫内膜异位症是激素依赖性疾病，主要见于育龄妇女。近年来，其发病率越来越高，育龄妇女中的发病率约为10％，然而，由于它与不孕和盆腔痛的关系，在这些女性人群中，其患病率明显要高，已成为妇科常见病。据报道，不孕症妇女的内异症患病率为25％-35％，盆腔痛的妇女达39-59％。而内异症患者50％的病人有明显的痛经，30％合并不孕，严重地影响中青年妇女的健康和生活质量。子宫内膜异位症为妇科良性疾病，但具有恶性行为，发病率逐年上升，临床早期误诊率可达70％。而且，内异症的早期诊断比较困难，容易漏诊。现有的诊断方法有：影像学诊断：如超声、CT、MRI等，但主要适合于子宫内膜异位症囊肿的患者，有一定的局限性。血CA125测定：CA125是一种高分子...
【技术保护点】
一种子宫内膜异位症诊断试剂盒，其特征在于，其通过扩增经亚硫酸氢钠修饰的待测样本的SF‑1基因中的至少一个CpG岛，并同时检测SF‑1基因的启动子区域位点和内含子/外显子区域位点的甲基化信息，判断待测样本是否为子宫内膜异位症患者样本，包括PCR master mix和扩增引物，其中，所述特异性引物包括：如SEQ ID NO.1所示的上游引物和如SEQ ID NO.2所示的下游引物组成的第一引物对；如SEQ ID NO.3所示的上游引物和如SEQ ID NO.4所示的下游引物组成的第二引物对。
【技术特征摘要】
1.一种子宫内膜异位症诊断试剂盒，其特征在于，其通过扩增经亚硫酸氢钠修饰的待测样本的SF-1基因中的至少一个CpG岛，并同时检测SF-1基因的启动子区域位点和内含子/外显子区域位点的甲基化信息，判断待测样本是否为子宫内膜异位症患者样本，包括PCRmastermix和扩增引物，其中，所述特异性引物包括：如SEQIDNO.1所示的上游引物和如SEQIDNO.2所示的下游引物组成的第一引物对；如SEQIDNO.3所示的上游引物和如SEQIDNO.4所示的下游引物组成的第二引物对。2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述启动子区域位点为第+7和第+121位。3.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述内含子/外显子区域位点为第+4114和+4215位。4.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述通过扩增经亚硫酸氢钠修饰的待测样本的SF-1基因中的至少一个CpG岛，并同时检测SF-1基因的启动子区域位点和内含子/外显子区域位点的甲基化信息，判断待测样本是否为子宫内膜异位症患者样本包括：对待测样本提取的DNA进行亚硫酸氢盐修饰，使样本SF-1基因CpG岛中未发生甲基化的胞嘧啶转化为尿嘧啶；对所述经过亚硫酸氢盐修饰的样本DNA进行PCR扩增处理，获得大量SF-1基因片段；对所述SF-1基因片段依次进行纯化、TA克隆，取阳性克隆进行测序并同时分析第+7、+121、+4114、+4215位点是否发生甲基化，得到待测样本是否为子宫内膜异位症患者样本的诊断结果。5.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，取所述阳性克隆进行测序并分析第+7、+121、+4114、+4215位点是否发生甲基化，得到待测样本是否为子宫内膜异位症患者样本的诊断结果包括：将阳性克隆进行测序并分析第+7、+121、+4114、+421...
【专利技术属性】
技术研发人员：薛晴，曾诚，吴培莉，
申请(专利权)人：北京大学第一医院，
类型：发明
国别省市：北京,11
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