The invention relates to a use of plant based raw materials and endophytic bacteria co culture method for preparation of bioactive substances, which comprises the following steps: (1) the pretreatment of vegetable raw materials: aseptic culture of living plant cells and tissues such as propagules, or plant raw material after drying and / or powder and sterilization pretreatment; (2) endophytic bacteria: activation of endophytic bacteria were inoculated in the medium were pre cultured microbial culture, pre culture time is 1 25 days to prepare activated endophyte; (3) biological materials and endophytic bacteria were cultured in co culture equipment, inoculation steps (2) prepare the activation of endogenous bacteria, and add the step (1) in the culture medium containing mixed culture of the plant base material of solid or liquid, training time is 4 90 days, co culture products; (4) extraction of bioactive substances preparation . Through the co culture of plant and endophyte, the active substance is prepared. The process is simple and controllable, the product is stably expressed and the production cycle is short.
【技术实现步骤摘要】
利用植物基原料和内生菌共培养制备生物活性物质的方法
本专利技术涉及生物
,具体涉及一种利用植物基原料和内生菌共培养制备生物活性物质的方法。
技术介绍
生物活性物质(Bioactivesubstance),是指来自生物体内的对生命过程有调控作用的一类微量或少量物质,具备以下特点:一是含量少,二是生物活性高。具备医药用途的生物活性物质是指从生物组织或生物质中提取获得的一类对人体或动物具有显著调控作用的天然组分。这些天然组分尤其是对改善人类健康有积极功效。这类生物活性物质通过提取、改性、修饰、转化成为相关产业追求的目标。自然界的生物类群千差万别,每一种生物中都含有大量的生物活性物质,这些生物活性物质主要为生物体内的一次代谢产物与二次代谢产物。第一,这些一次代谢指植物细胞通过光合作用或微生物的代谢,生成生物体生存繁殖所必需的化合物,如糖类、氨基酸、脂肪酸、核酸及其聚合衍生物、乙酰辅酶A等的代谢过程。第二,有些是以二次代谢产物方式产生,其过程往往是以生物体本身的某些一次代谢产物作为起始原料,通过一系列生物化学反应生成的化合物是典型的生物活性物质,如萜类、甾体、生物碱、多酚类等;第三,这类二次代谢产物也可以是微生物利用植物或动物或微生物的代谢产物,转化合成而来,也可能是在植物或动物的前体或信号物质诱导下自身加快合成而来;后一种情况在药用植物及其内生菌相互作用关系中比较普遍。从自然界中的生物体内分离提取的生物活性物质,其种类包括活性多糖、低聚糖类、功能性糖醇类、膳食纤维、功能性油脂、功能性蛋白质、功能性氨基酸与多肽、生物碱、酚类化合物、黄酮类化合物、植物甾醇类、甙 ...
【技术保护点】
一种利用植物基原料和内生菌共培养制备生物活性物质的方法,具体包括以下步骤:(1)植物基原料的预处理:取无菌培养的活体植物细胞、植物组织或器官繁殖体,或将植物基原料经过烘干和/或造粉和灭菌预处理;(2)内生菌活化:将内生菌接种于微生物培养基上进行预培养,预培养时间为1‑25天,从而制得活化的内生菌;(3)生物材料与内生菌共培养:在共培养设备中接种步骤(2)中制得的活化的内生菌中,并加入步骤(1)中所制得的含植物基材料的固体或液体培养基进行混合培养,培养时间为4‑90天,获得共培养产物;(4)生物活性物质的提取:将步骤(3)中获得的共培养产物根据所需的生物活性物质的特点,采用醇提、水提、超临界提取、层析收集和喷雾干燥方法,获得生物活性物质的浓缩,再分离和纯化,得到生物活性物质。
【技术特征摘要】
1.一种利用植物基原料和内生菌共培养制备生物活性物质的方法,具体包括以下步骤:(1)植物基原料的预处理:取无菌培养的活体植物细胞、植物组织或器官繁殖体,或将植物基原料经过烘干和/或造粉和灭菌预处理;(2)内生菌活化:将内生菌接种于微生物培养基上进行预培养,预培养时间为1-25天,从而制得活化的内生菌;(3)生物材料与内生菌共培养:在共培养设备中接种步骤(2)中制得的活化的内生菌中,并加入步骤(1)中所制得的含植物基材料的固体或液体培养基进行混合培养,培养时间为4-90天,获得共培养产物;(4)生物活性物质的提取:将步骤(3)中获得的共培养产物根据所需的生物活性物质的特点,采用醇提、水提、超临界提取、层析收集和喷雾干燥方法,获得生物活性物质的浓缩,再分离和纯化,得到生物活性物质。2.如权利要求1所述的利用植物基原料和内生菌共培养制备生物活性物质的方法,其特征在于,所述植物基原料包括活的植物细胞和组织、组织培养所获得无性繁殖体和植物生物质;所述活的植物细胞和组织包括种子、细胞、新鲜茎、叶和根;组织培养所获得无性繁殖体包括愈伤组织、原球茎、幼苗、毛状根和胚状体;植物生物质包括药用植物茎秆、叶片、汁液、粉末和植物的愈伤组织、种苗、毛状根和提取物。3.如权利要求2所述的利用植物基原料和内生菌共培养制备生物活性物质的方法,其特征在于,共培养内生菌为具有产生生物活性物质能力的植物内生真菌或内生细菌或放线菌,是从产生生物活性物质的药用植物中分离获得的。4.如权利要求2所述的利用植物基原料和内生菌共培养制备生物活性物质的方法,其特征在于,所述步...
【专利技术属性】
技术研发人员:陈集双,陈国晶,樊小宽,王炜,张保钱,金磊磊,张本厚,胡燕花,
申请(专利权)人:南京博方生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:江苏,32
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