一种木麻黄青枯菌溢出分离的方法技术
Method for overflowing and separating Casuarina solanacearum
The invention discloses a method for Casuarina R.solanacearum overflow separation, the method comprises the following steps: digging 8 ~ 15cm long Casuarina equisetifolia root cause, wash, cut into two flat and put fresh section; wherein one end of the 3 ~ 5cm soaked in sterile water, 4 ~ 12h, on the other end section the root cause of the outflow of Casuarina milk white pus bacteria; bacteria were inoculated with needle pus cultured in crossed bacterial culture medium, selection of typical single colonies were isolated from the expanding culture. The method for separating and separating the Ralstonia solanacearum of the Casuarina equisetifolia has the advantages of easy operation, simple and fast, high reliability and low content of miscellaneous bacteria.
【技术实现步骤摘要】
一种木麻黄青枯菌溢出分离的方法
本专利技术属于生物
，具体是涉及一种木麻黄青枯菌溢出分离的方法。
技术介绍
目前木麻黄(Casuarina)青枯菌(Ralstoniasolanacearum)的分离一般采用植物细菌分离常规方法——稀释分离法。稀释分离法是植物细菌分离常规方法，长期以来应用于木麻黄青枯病菌的分离。其技术原理：自然条件下，木麻黄青枯菌从根系的根冠部位侵入，经细胞间隙侵入根系木质部的维管束，在根系维管束中大量繁殖、扩散，最终堵塞维管束中的液流运输造成植株死亡，稀释分离法取病根后，在无菌条件下清洗、剥去外皮均是为了避免杂菌污染，再将病根垂直于维管束将其切碎浸于水中，这时候生长于维管束中的青枯菌就会被释放出来。TTC培养基由于含有2,2,3-三苯基四唑氯，能与青枯菌发生显色反应，成为植物青枯病菌的选择性培养基，即利用TTC培养基特异性区分青枯菌和其他细菌，并根据菌落生长形态来判断其致病性的强弱。木麻黄青枯病菌稀释分离法具体的操作是：挖取10～12cm木麻黄新鲜病根，在流水下刷洗，去除病根表面泥垢。在超净工作台上将病根剪成2～3cm长，75％的酒精浸泡3...
【技术保护点】
一种木麻黄青枯菌溢出分离的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)挖取8～15cm长的木麻黄病根，洗净，两端切成平整的新鲜断面；(2)然后把其中一端的3～5cm浸泡于无菌水中，4～12h后，在木麻黄病根的另一端断面流出乳白色的菌脓；(3)用接种针挑取菌脓划线培养于细菌培养基上，选择分离出的典型单菌落进行扩大培养。
【技术特征摘要】
1.一种木麻黄青枯菌溢出分离的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)挖取8～15cm长的木麻黄病根，洗净，两端切成平整的新鲜断面；(2)然后把其中一端的3～5cm浸泡于无菌水中，4～12h后，在木麻黄病根的另一端断面流出乳白色的菌脓；(3)用接种针挑取菌脓划线培养于细菌培养基上，选择分离出的典型单菌落进行扩大培养。2.根据权利要求1所述的木麻黄青枯菌溢出分离的方法，其特征在于，步骤(1)中，挖取的木麻黄病根10～12cm长，洗净，两端切成平整的新鲜断面；步骤(2)中，浸泡6～8h。3.根据权利要求1所述的木麻黄青枯菌溢出分离的方法，其特征在于，还包括对扩大培养的细菌进行16srRNA测序鉴定。...
【专利技术属性】
技术研发人员：许秀玉，徐斌，王明怀，甘先华，张卫强，黄钰辉，温小莹，周毅，郭乐东，黄芳芳，
申请(专利权)人：广东省林业科学研究院，
类型：发明
国别省市：广东,44
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