一种利用光式发酵制备光合细菌的方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种利用光式发酵制备光合细菌SCO1的方法,包括菌种活化，种子液制备，发酵培养步骤，光合细菌SC01应用于水产养殖水体施用以净化水质,对有机物污染的水体中的氨氮及亚硝酸盐具有良好的降解效果,可缓解对海水养殖过程中残饵、粪便等导致的水质恶化问题，降低残饵率。

Method and application for preparing photosynthetic bacteria by light type fermentation

The invention discloses a method using light type fermentation preparation of photosynthetic bacteria SCO1 method, including strain activation, seed solution preparation, fermentation step, photosynthetic bacteria SC01 used in aquaculture water applied to purify water, ammonia nitrogen of organic pollution in water and nitrite has good degradation effect that can relieve the bait, feces and other water quality of aquaculture process led to the deterioration of the problem, reduce the rate of residual bait.

【技术实现步骤摘要】
一种利用光式发酵制备光合细菌的方法及应用
本专利技术属于水体净化领域，具体涉及一种光合细菌的制备方法，以及这种细菌菌剂的应用。
技术介绍
由于养殖后的海水中，饵料残留、养殖生物粪便等导致的海水中氨氮、亚硝氮、磷酸盐等营养成分丰富，容易引起藻类等有害生物的滋生。当环境条件合适时，一些繁殖迅速的赤潮藻类的爆发，常常引起海水中含氧量的急剧下降，造成养殖海区的养殖生物大量死亡，同时，由于养殖废水中含有抗生素、清洁剂、杀菌剂等有害物质，随意排海有可能造成近岸甚至近海生物多样性减少或消失，引起海底荒漠化等一系列严重生态问题。光合细菌(PhotosyntheticBacteria，PSB)是一类能够在厌氧光照条件下，以小分子有机化合物或二氧化碳为碳源进行光合作用的原核生物的总称。光合细菌可用于海水养殖过程的水质改善及海水养殖用水的进水及排放水的生物处理,可有效改善因海水养殖过程中残饵、粪便等导致的水质恶化问题，改善水质，降低残饵率，提高单位时间内养殖动物的重量。其作用是其他微生物无法替代的。目前，随着微生物水处理技术的兴起和发展，开发和利用新型的光合细菌来解决池塘养殖水体在养殖中后期氨氮、亚硝酸盐升高的问题，已受到了人们的普遍关注。
技术实现思路
本专利技术提供光式发酵光合细菌SC01的制备方法及其在海水养殖水质改善中的应用。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是，光合细菌SC01光式发酵制备方法，包括以下步骤：（1）菌种的活化，取-20℃保存的菌株光合细菌SC01（CGMCCNo.8248，中科院海岸带研究所保存），活化后接入到液体活化培养基中，放入37℃，150r/min摇床中活化培养；（2）种子液的制备，在无菌的操作台上，将光合细菌接种到250mL液体种子培养基中，接种量为20-25mL，拧紧瓶盖后放于灯光下培养，温度31-36℃，培养周期3-6天，得到光合细菌种子液；（3）发酵培养，向3.6L可密封的不锈钢发酵罐中加入发酵培养基，按照30-50%比例接入光合细菌种子液，拧紧盖后，在LED灯光照下发酵，检测发酵液中菌体数量，待菌体数量达到100亿/毫升时即可停止发酵。所述的步骤（1）中发酵培养基：蛋白胨20-50g/L，酵母浸粉5-8g/L，可溶性淀粉2-5g/L，磷酸氢二钾1-2g/L，氯化钠5-8g/L，七水硫酸镁1-3g/L和余量离子水，抗生素2-5g/L，pH值为7.0-7.5。所述的步骤（2）中液体活化培养基为蛋白胨10g/L，酵母膏5g/L，氯化钠10g/L和余量重蒸水，pH值为7.0。所述的步骤（3）中液体种子培养基为胰蛋白胨10g/L，氯化钠10g/L，酵母浸粉5g/L，氢氧化钠40mg和余量重蒸水，pH值为7.0。所述的抗生素采用的是氨苄青霉素。所述的步骤（3）中的发酵过程在室内LED灯光源下进行，每天摇动培养容器3-5次。所述的步骤（3）中菌体数量的检测采用双层琼脂检测法。本专利技术有益效果：通过对光合细菌制备方法进行优化，选择能促进光合细菌生长且廉价易得的培养条件，会对今后大规模应用光合细菌工厂化生产有重要作用。可有效改善因海水养殖过程中残饵、粪便等导致的水质恶化问题，降低残饵率，提高单位时间内养殖动物的重量。说明书附图图1不同浓度光合细菌处理养殖污水水质变化。具体实施方式围绕本专利技术所述制备的的光合细菌，及其在海水养殖水质改善中的应用。实施例1光合细菌SC01制备方法（1）菌种的活化，取-20℃保存的菌株光合细菌SC01（CGMCCNo.8248），活化后接入到液体活化培养基中，放入37℃，150r/min摇床中活化培养；（2）种子液的制备，在无菌的操作台上，将光合细菌接种到250毫升液体种子培养基中，接种量为20mL，拧紧瓶盖后放于灯光下培养，温度35℃，培养周期5天，得到光合细菌种子液；（3）发酵培养，向3.6L可密封的不锈钢发酵罐中加入发酵培养基，按照40%%比例接入光合细菌种子液，拧紧盖后，在LED灯光照下发酵，每天摇动培养容器3-5次，采用双层琼脂检测法，检测发酵液中菌体数量，待菌体数量达到100亿/毫升时即可停止发酵。所述的步骤（1）中发酵培养基：蛋白胨30g/L，酵母浸粉6g/L，可溶性淀粉3g/L，磷酸氢二钾1g/L，氯化钠6g/L，七水硫酸镁2g/L和余量离子水，氨苄青霉素3g/L，PH值为7.3。所述的步骤（2）中液体活化培养基：蛋白胨10g/L，酵母膏5g/L，氯化钠10g/L和余量重蒸水，pH值为7.0。所述的步骤（3）中液体种子培养基：胰蛋白胨10g/L，氯化钠10g/L，酵母浸粉5g/L，氢氧化钠40mg和余量重蒸水，pH值为7.0。实施例2光合细菌对养殖水氨氮和亚硝酸盐处理的室内试验取6个2L烧杯中各装1L养殖污水，分别定为A、B、C、D、E、F，其中A为空白对照。将光合细菌液分别以0、1、2、5、10、20ml投到烧杯中，放置于LED灯下。投放第5天测定未加菌液及加菌液的污水pH、氨氮、亚硝酸盐指标，并作比较（参见图1）。pH值由pH计测定，氨氮、亚硝酸盐采用水质分析仪测定，测定前将光合细菌以3000r/min去除。由图1可知增加光合细菌投入量，各种有害物质的含量逐渐减小，说明适量SC01的存在有利于养殖水体中氨氮、亚硝氮的控制。但当SC01的投加量增到20ml/L时，海水中的各监测指标不降反升。可见SC01的投入量在10-20ml/L。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利用光式发酵制备光合细菌的方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）菌种的活化：取‑20 ℃保存的菌株光合细菌SC01，活化后接入到液体活化培养基中，放入37 ℃，150 r/min摇床中活化培养；（2）种子液的制备：在无菌的操作台上，将光合细菌接种到250mL液体种子培养基中，接种量为20‑25mL，拧紧瓶盖后放于灯光下培养，温度31‑36℃，培养周期3‑6天，得到光合细菌种子液；（3）发酵培养：向3.6升可密封的不锈钢发酵罐中加入发酵培养基，按照30—50%比例接入光合细菌种子液，拧紧盖后，在LED灯光照下发酵，检测发酵液中菌体数量，待菌体数量达到100亿/毫升时即可停止发酵。

【技术特征摘要】
1.一种利用光式发酵制备光合细菌的方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）菌种的活化：取-20℃保存的菌株光合细菌SC01，活化后接入到液体活化培养基中，放入37℃，150r/min摇床中活化培养；（2）种子液的制备：在无菌的操作台上，将光合细菌接种到250mL液体种子培养基中，接种量为20-25mL，拧紧瓶盖后放于灯光下培养，温度31-36℃，培养周期3-6天，得到光合细菌种子液；（3）发酵培养：向3.6升可密封的不锈钢发酵罐中加入发酵培养基，按照30—50%比例接入光合细菌种子液，拧紧盖后，在LED灯光照下发酵，检测发酵液中菌体数量，待菌体数量达到100亿/毫升时即可停止发酵。2.根据权利要求1所述的一种光合细菌光式发酵的制备方法，其特征在于，所述的步骤（1）中发酵培养基为蛋白胨20-50g/L，酵母浸粉5-8g/L，可溶性淀粉2-5g/L，磷酸氢二钾1-2g/L，氯化钠5-8g/L，七水硫酸镁1-3g/L和余量离子水，抗生素2-5g/L，pH值为7.0-7.5。3.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴中英，焦绪栋，
申请(专利权)人：烟台寒武纪生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37