一种诱导真菌高产纤维素酶的组合物及其使用方法技术

本发明专利技术涉及纤维素酶发酵领域，特别涉及一种诱导真菌高产纤维素酶的组合物及其使用方法。本发明专利技术公开了一种诱导真菌高产纤维素酶的组合物，按重量份计，包括以下组分：木质纤维素0.5～1.5、以及微晶纤维素6～9.5。该诱导真菌高产纤维素酶的组合物的使用方法为：在真菌培养基中加入所述组合物，所述组合物的添加量为30～35g/L。本发明专利技术所述诱导真菌产纤维素酶的组合物配比简单，原料易于获得，且成本低，是新型廉价的纤维素酶合成的诱导物；该组合物的使用方法具有工艺简单，条件温和以及环境友好的优点，为纤维素酶高效低成本生产提供新的途径。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及纤维素酶发酵领域，特别涉及一种诱导真菌高产纤维素酶的组合物及其使用方法。
技术介绍
碳源是影响纤维素酶基因表达的首要因素，真菌的纤维素酶需要在纤维素底物存在的情况下才能被诱导出来。天然纤维素原料是真菌产纤维素酶的最佳底物，它能够有效地促进纤维素酶的产生。天然纤维素原料本身作为不溶性碳源并不能直接触发对纤维素酶的诱导作用，而是通过基础水平表达的纤维素酶水解纤维素释放出可溶性的寡糖，寡糖进入细胞内进而诱导纤维素酶大量表达。目前已对很多寡糖及其衍生物进行研究，发现纤维二糖，槐糖，龙胆二糖，乳糖等对纤维素酶的生产是有诱导作用的。但是以这种寡糖直接加入培养基中诱导真菌产生纤维素酶，成本过高，并且二糖对纤维素酶有反馈抑制作用，影响纤维素酶的降解作用。所以在培养基中采用二糖物质作为纤维素酶生产的诱导物是不合适的。目前亟待发现新型廉价的纤维素酶合成的诱导物，为纤维素酶高效低成本生产提供新的途径。
技术实现思路
本专利技术目的之一在于提供一种诱导真菌高产纤维素酶的组合物，用于解决现有纤维素酶诱导成本过高，诱导物效果一般的不足。本专利技术目的之二在于提供诱导真菌高产纤维素酶的组合物的使用方法，用于提供使用本专利技术所述诱导真菌高产纤维素酶的组合物的比较好的方法，发挥出诱导真菌高产纤维素酶的组合物的最佳效果。为实现上述目的，本专利技术所采取的技术方案为：一种诱导真菌高产纤维素酶的组合物，其特征在于，按重量份计，包括以下组分：木质纤维素0.5～1.5、以及微晶纤维素6～9.5。优选的是，按重量份计，包括以下组分：木质纤维素1～1.5、以及微晶纤维素7～8。优选的是，按重量份计，包括以下组分：木质纤维素1、以及微晶纤维素7.5。优选的是，所述木质纤维素为紫菜、水稻或者小麦中的任一种。优选的是，所述木质纤维素为紫菜。一种诱导真菌高产纤维素酶的组合物的使用方法，其特征在于，在真菌培养基中加入所述组合物，所述组合物的添加量为30～35g/L。优选的是，所述组合物的添加量为33g/L。优选的是，所述真菌培养基为液体培养基，所述液体培养基还包括真菌生长所需氮源和无机盐离子为：质量分数为1.7％的玉米浆干粉，质量分数为0.5％的(NH4)2SO4，质量分数为0.1％的MgSO4，质量分数为0.25％的甘油，质量分数为0.25％的CaCO3，并调节pH为4.5-5.5。优选的是，还包括以下步骤：在所述液体培养基中接入真菌的孢子悬液，于28-30℃的条件下，以转速170-200转/分速率的摇床上震荡培养96-120h。优选的是，所述真菌为桧状青霉或者里氏木霉中的一种。本专利技术的有益效果是：本专利技术方法采用将木质纤维素以及微晶纤维素按比例配合实现对木质纤维素的充分利用，节约资源；木质纤维素为紫菜、水稻或者小麦中的任一种，是普通常见，且极易获得的资源，成本低，且解决了日常生活中处理木质纤维素的难题；木质纤维素水解成的多糖为真菌大量繁殖和诱导其合成纤维素酶提供原料，取代了直接向培养基汇总加二糖物质作为纤维素酶生产的诱导物的做法，降低了生产成本，并且也不会发生对纤维素酶的反馈抑制作用，也不会影响纤维素酶的降解作用。总之，本专利技术所述诱导真菌产纤维素酶的组合物配比简单，原料易于获得，且成本低，是新型廉价的纤维素酶合成的诱导物；该组合物的使用方法具有工艺简单，条件温和以及环境友好的优点，为纤维素酶高效低成本生产提供新的途径。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。实施例1步骤一、将紫菜干燥至恒重，之后用粉碎机粉碎，将粉碎的紫菜使用80目标准筛子进行过筛处理，备用；步骤二、将微晶纤维素与过筛后的紫菜按照9.5∶0.5混合，作为诱导真菌产纤维素酶的组合物诱导真菌产纤维素酶的组合物加入真菌液体培养基中，添加量为30g/L；步骤三、向液体培养基中加入真菌生长需要的N源和无机盐离子，玉米浆干粉1.7％，(NH4)2SO40.5％，MgSO40.1％，甘油0.25％，CaCO30.25％，调节pH4.5-5.5；步骤四、在培养基中接入桧状青霉(Penicilliumpiceum)的孢子悬液，于30℃的条件下，以转速170-200转/分速率的摇床上震荡培养96-120h。发酵120h后，采用国际理论与应用化学联合会(IUPAC)推荐的国际标准方法测定发酵液酶活力，与只用微晶纤维素诱导桧状青霉酶液相比，利用诱导真菌产纤维素酶的组合物诱导桧状青霉酶液中beta-葡萄糖苷酶酶活力提高46.2％。蛋白浓度提高了35.7％，外切酶酶活力提高47.6％，滤纸酶活力提高14.2％。实施例2步骤一、将紫菜干燥至恒重，之后用粉碎机粉碎，将粉碎的紫菜使用80目标准筛子进行过筛处理，备用；步骤二、将微晶纤维素与过筛后的紫菜按照9∶1混合，作为诱导真菌产纤维素酶的组合物加入真菌液体培养基中，添加量为33g/L；步骤三、向液体培养基中加入真菌生长需要的N源和无机盐离子，玉米浆干粉1.7％，(NH4)2SO40.5％，MgSO40.1％，甘油0.25％，CaCO30.25％，调节pH4.5-5.5；步骤四、在培养基中接入桧状青霉(Penicilliumpiceum)的孢子悬液，于30℃的条件下，以转速170-200转/分速率的摇床上震荡培养96-120h。发酵120h后，采用国际理论与应用化学联合会(IUPAC)推荐的国际标准方法测定发酵液酶活力，与只用微晶纤维素诱导桧状青霉酶液相比，利用诱导真菌产纤维素酶的组合物诱导桧状青霉酶液中beta-葡萄糖苷酶酶活力提高61.2％。蛋白浓度提高了56.7％，外切酶酶活力提高61.4％，滤纸酶活力提高19.5％。实施例3步骤一、将紫菜干燥至恒重，之后用粉碎机粉碎，将粉碎的紫菜使用80目标准筛子进行过筛处理，备用；步骤二、将微晶纤维素与过筛后的紫菜按照8.5∶1混合，作为诱导真菌产纤维素酶的组合物加入真菌液体培养基中，添加量为35g/L；步骤三、向液体培养基中加入真菌生长需要的N源和无机盐离子，玉米浆干粉1.7％，(NH4)2SO40.5％，MgSO40.1％，甘油0.25％，CaCO30.25％，调节pH4.5-5.5；步骤四、在培养基中接入桧状青霉(Penicilliumpiceum)的孢子悬液，于30本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种诱导真菌高产纤维素酶的组合物，其特征在于，按重量份计，包括以下组分：木质纤维素0.5～1.5、以及微晶纤维素6～9.5。

【技术特征摘要】
1.一种诱导真菌高产纤维素酶的组合物，其特征在于，按重量份计，包
括以下组分：木质纤维素0.5～1.5、以及微晶纤维素6～9.5。
2.如权利要求1所述的诱导真菌高产纤维素酶的组合物，其特征在于，
按重量份计，包括以下组分：木质纤维素1～1.5、以及微晶纤维素7～8。
3.如权利要求2所述的诱导真菌高产纤维素酶的组合物，其特征在于，
按重量份计，包括以下组分：木质纤维素1、以及微晶纤维素7.5。
4.如权利要求3所述的诱导真菌高产纤维素酶的组合物，其特征在于，
所述木质纤维素为紫菜、水稻、小麦或者芒草中的任一种。
5.如权利要求4所述的诱导真菌高产纤维素酶的组合物，其特征在于，
所述木质纤维素为紫菜。
6.一种如权利要求1所述的诱导真菌高产纤维素酶的组合物的使用方
法，其特征在于，在真菌培养基中加入所述组合物，所述组合物的添加量为
30～35g/L。
7.如权利要求6所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：高乐，贾文娣，张东远，陈树林，
申请(专利权)人：中国科学院天津工业生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：天津;12