本发明专利技术涉及靶向BRD4的抑制剂及其在肿瘤治疗药物中的应用，属于抗肿瘤药学技术领域。本发明专利技术解决的技术问题是提供一种作为BRD4抑制剂的化合物。该化合物包括如下所示的化合物或其药学上可接受的盐。本发明专利技术的化合物或其药学上可接受的盐，可以作为BRD4抑制剂，具有较明显的抗乳腺癌治疗效果。
BRD4 inhibitors and their use in tumor therapeutics
The invention relates to an inhibitor for targeting BRD4 and its application in tumor treatment medicine, belonging to the technical field of antineoplastic pharmacy. The technical problem solved by the invention is to provide a compound as a BRD4 inhibitor. The compound comprises a compound as described below or a pharmaceutically acceptable salt thereof. The compounds of the invention or pharmaceutically acceptable salts thereof can act as BRD4 inhibitors and have obvious anti breast cancer treatment effects.
【技术实现步骤摘要】
BRD4抑制剂及其在肿瘤治疗药物中的应用
本专利技术涉及BRD4抑制剂及其在肿瘤治疗药物中的应用，属于肿瘤治疗药物发现
技术介绍
溴含蛋白质4(BRD4)是溴和额外的终端(BET)蛋白家族的成员，在细胞分裂和转录调控作为一个中央单元传输表观遗传记忆。除了BRD4，还有其他三个成员，如BRD2、BRD3和BRDT，他们可能调控许多细胞过程通过溴结构域间的相互作用。BRD4是一种广泛表达的核蛋白，分子量为200kDa，含有两个串联的溴结构域(BD1和BD2)，在结构上是保守的但具有不相同的功能和一个ET结构域。最近，BRD4被报道参与致癌基因重排，导致高度致癌融合蛋白，从而在许多类型的癌症的发展中起着关键的作用，如乳腺癌。BRD4调节乳腺癌细胞转移是通过调节Sipa1酶的活性和调节ERα诱导的基因表达通过影响乳腺癌的RNA聚合酶II和组蛋白H2B单泛素化延伸相关的磷酸化。此外，BRD4调节细胞外基质基因的表达，在转移预测基因信号中经常出现；并能通过它的激活信号预测乳腺癌的进展和/或生存。自噬是一种进化上保守的、多步骤的溶酶体降解过程，用于清除受损或多余的蛋白质和细胞器。自噬机器包括超过36自噬相关基因(ATGs)，和UNC-51-样激酶1(ULK1)，它是酵母菌Atg1的直接同源基因，是唯一的丝氨酸苏氨酸激酶，是这些自噬相关基因中的启动酶。ULK的复杂互合体，包括ULK1，mAtg13,FIP200和Atg101，这些是启动自噬过程所必须的[17]。在自噬中，mTORC1和AMPK可以通过直接磷酸化对ULK1活性进行负调控。AMPK-mTORC1-ULK1轴可能发挥关键作用在自噬体的形成和自噬的调控。AMPKmTORC1、ULK1的功能及其参与的许多病理生理过程如乳腺癌已得到阐明。自噬是一种生理机制，可以作为暂时的生存手段，因而被称为保护性细胞自噬。相反，如果细胞应激导致连续或过度诱导的自噬，细胞死亡或细胞自噬相关的细胞死亡(ACD)将接踵而至。靶向小分子药物诱导的自噬相关的细胞死亡现在作为一个有前途的策略。因此，靶向AMPK-mTORC1-ULK1调制自噬相关的细胞死亡是乳腺癌治疗的新途径。最近，(+)JQ1作为第一个BRD4抑制剂，已经在保护性细胞自噬方面得到验证。例如，在急性髓系白血病(AML)中，AMPK-ULK1调节的保护自噬对BRD4抑制剂(+)JQ1产生了耐药性。(+)JQ1也已被报道抑制保护细胞自噬从而增加NPM1和HEXIM1表达在AML细胞中。可见，长期用药会伴随肿瘤细胞的耐药性，导致肿瘤的复发和转移。虽然(+)JQ1具有良好的活性，但是其缺乏专一性，是一种泛BET家族的抑制剂，不能够专一性的抑制BRD4。此外，(+)JQ1的体内药效动力学性质极差，成药性很低，阻碍了其进入临床试验。因此，需要开发一种新型的BRD4抑制剂。
技术实现思路
本专利技术解决的技术问题是提供一种作为BRD4抑制剂的新化合物。本专利技术提供结构式如式Ⅰ所示的化合物或其药学上可接受的盐：其中，R1和R2独立地为氢或C1-C4烷基，且R1和R2不同时为氢；或者R1和R2连接形成环状结构，所述环状结构为R3为苯环或被取代的苯环；n为0或1。本专利技术还提供上述化合物或其药学上可接受的盐在制备治疗乳腺癌药物中的用途。进一步的，所述治疗乳腺癌药物优选为BRD4抑制剂类药物。本专利技术还提供一种治疗乳腺癌的药物组合物，它包含有效剂量的上述化合物或其药学上可接受的盐。本专利技术的化合物或其药学上可接受的盐，可以作为BRD4抑制剂，具有较明显的抗乳腺癌治疗效果。特别是化合物36，能够专一性的与BRD4的BD1结构域结合，在乳腺癌中它能够在体内外诱导BRD4-AMPK调节的自噬性细胞死亡，这是第一个被报道的同时靶向BRD4和BRD4-AMPK相互作用的小分子抑制剂，将为在治疗乳腺癌治疗中，开发具有新的结构和PPIs作用的BRD4抑制剂提供了一个有效的范例。附图说明图1为分别用1.5或3μM的FL-411的处理MCF-7和MDA-MB-231细胞一定时间后，然后细胞用荧光显微镜检测MDC荧光染色图片。图2为分别用1.5或3μM的FL-411的处理MCF-7和MDA-MB-231细胞一定时间后，然后用电子显微镜检测的图片。图3为用GFP-LC3质粒转染MCF-7和MDA-MB-231细胞，然后用1.5或3μM的FL-411的处理，在荧光显微镜下检测的图片。图4为分别用1.5或3μM的FL-411的处理MCF-7和MDA-MB-231细胞24小时，通过免疫组化检测LC3B的表达。图5为分别用FL-411的处理MCF-7和MDA-MB-231细胞一定时间后，用免疫印迹法检测Beclin-1，p62和LC3的表达。图6为在BafA1的存在下，用分别用FL-411的处理MCF-7和MDA-MB-231细胞24小时，用免疫印迹法检测p62和LC3的表达。图7为分别用1.5或3μM的FL-411的处理MCF-7和MDA-MB-231细胞一定时间后，再用FL-411处理之前加入3-MA，然后用MTT检测细胞存活率。图8为分别用1.5或3μM的FL-411的处理MCF-7和MDA-MB-231细胞一定时间后，用免疫印迹法检测AKT，p-AKT，mTOR，p-mTOR，p70S6K和p-p70S6K的表达量。图9为分别用1.5或3μM的FL-411的处理MCF-7和MDA-MB-231细胞一定时间后，用免疫印迹法检测ULK1，p-ULK1，ATG13，p-ATG13，FIP200和ATG101的表达量。图10为用两种特异性BRD4的siRNA和阴性对照siRNA转染MCF-7和MDA-MB-231细胞，用免疫印迹法检测BRD4，c-Myc，AMPKα，p-AMPKα，ULK1，p-ULK1，p62和LC3的表达。图11为接种MCF-7或MDA-MB-231的小鼠每天用空白对照或不同浓度的FL-411处理一次。肿瘤体积用标准误(mean±SEM)表示。图12为分析最后一天的肿瘤体积变化。*p<0.05,***p<0.001，与对照组作比较。图13为各组小鼠的肿瘤重量。*p<0.05,***p<0.001，与对照组作比较。图14为FL-411处理期间小鼠的体重变化。图15为免疫组化分析小鼠肿瘤中的增殖标记物KI67和自噬标志物LC3II。定量分析各组图片阳性染色的百分比。肿瘤取自对照和FL-411(100mg/kg)处理组小鼠。***p<0.001，与对照组作比较。标尺为200μm。图16为取MCF-7和MDA-MB-231异种移植小鼠的肿瘤组织，裂解。westernblot分析BRD4,c-Myc,LC3,和caspase3的表达。图17为FL-411在斑马鱼模型中的抗肿瘤活力。CM-DIL标记的MCF7细胞加入空白或12.5,25,50μM的FL-411处理，用荧光显微镜捕捉亮场和荧光图片。图18为斑马鱼模型中的肿瘤荧光强度分析(mean±SEM)及各浓度FL-411处理48h后各组肿瘤体积的抑制率(**p<0.01,***p<0.001，与对照组作比较)。具体实施方式本专利技术提供如式Ⅰ所示的化合物：其中，R1和R本文档来自技高网...
【技术保护点】
结构式如式Ⅰ所示的化合物或其药学上可接受的盐：
【技术特征摘要】
1.结构式如式Ⅰ所示的化合物或其药学上可接受的盐：其中，R1和R2独立地为氢或C1-C4烷基，且R1和R2不同时为氢；或者R1和R2连接形成环状结构，所述环状结构为R3为苯环或被取代的苯环；n为0或1。2.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于：n为0。3.根据权利要求2所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于：R1和R2连接形成优选R1和R2连接形成R3为更优选R1和R2连接形成R3为4.根据权利要求2所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于：R1和R2独立地为氢或C1-C4烷基，且R1和R2不同时为氢；优选R1为氢；R2为C1-C4烷基；R3为更优选R1为氢；R2为R3为更优选R1为氢；R2为R3为5.根据权利要求2所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于：R1和R2连接形成优选R1和R2连接形成R3...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘博，欧阳亮，张岚，符雷蕾，姚大红，
申请(专利权)人：四川大学，
类型：发明
国别省市：四川,51
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。